Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Metody_obschey_bakteriologii.doc
Скачиваний:
1057
Добавлен:
14.02.2015
Размер:
1.5 Mб
Скачать

Модификация по Синеву.

Вариант Синева: вместо карболового или анилинового раствора генцианвиолета берут по­лоски фильтровальной бумаги, заранее пропитанные следующим раствором:

Кристаллвиолет

1 г

Спирт 96°

100 мл

Глицерин (не обязательно)

5 мл

Кристаллвиолет может быть заменен метилвиолетом или генцианвиолетом в равных количествах. Через сутки стояния раствор краски готов и может сохраняться долгое время. Фильтровальную бумагу (один слой), помещен­ную на стекло, обливают указанным раствором краски, высушивают и режут на полоски размером 2040 мм; бумажки хранят в темной склянке с при­тертой пробкой.

Клемпарская предлагает для окраски препаратов по методу Грама в модифика­ции Синева при отсутствии фильтровальной бумаги пропитывать 10% спир­товым раствором генцианвиолета полоски обыкновенной газетной бумаги (типографская краска не мешает). Техника окраски та же.

Техника окраски. На фиксированный мазок наливают 2—3 капли дистиллированной воды, опускают и придавливают к стеклу пинцетом полоску бумаги, приготовленной вышеуказанным способом. Бумажку через 2 минуты смывают водой или, лучше, снимают пинцетом. Дальше производится обработка раствором Люголя, спиртом или йодированным спиртом, водой и дополнительная окраска.

Модификация по Синеву особенно удобна для походных лабораторий, в экспедиционной работе и т. п.; получаются хорошие препараты, свободные от осадков, при малом расходе краски.

Клемпарская рекомендует готовить красящие бумажки для метода Грама и Циль-Нильсена по следующей прописи: для основной окраски (кристаллвиолет, генцианвиолет и метилвиолет) к 1 г краски добавить 10 мл спирта и 0,5 мл глицерина (краску всыпать в спирт и добавить глицерин), для фуксина — 10 мл спирта; для дополнительной окраски (сафранин, метиленовая синька)—к 1 г краски добавить 10 мл нагретого до 45—50° спирта, 1 мл насыщенного водного раствора буры и 0,5 мл глицерина (сна­чала нагревают спирт, добавляют буру и глицерин, а затем краску); для раствора Люголя — к 1 г кристаллического йода добавить 2,5 г йодистого калия и 10 мл дистиллированной воды.

Модификация по Эткинсу.

Для данной модификации можно при­менять любую из красок, относящихся к производным парарозанилина (кристаллвиолет, генцианвиолет или метилвиолет), с раствором сернокислого анилина. Растворы красок получаются очень стойкие и совершенно не дают осадков. Для окраски необходимы следующие растворы:

I. Генцианвиолет

Насыщенный спиртовой раствор

1 часть

Сернокислый анилин (1% водный раствор)

3 части

При отсутствии готового сернокислого анилина таковой может быть приготовлен следующим образом. К 100 мл 5% водного раствора серной кислоты прибавляют по каплям 20 мл анилинового масла. Выпавший обиль­ный рыхлый белый осадок отфильтровывают, снимают с фильтра и разбав­ляют в 30 мл 95° спирта, а затем снова отфильтровывают и осадок высу­шивают.

II. Раствор йода

Кристаллический йод

2 г

Едкий натр (4%)

10 мл

После растворения прибавляют 90 мл дистиллированной воды.

Для дополнительной окраски применяют спирто-водный сафранин (можно везувин или пиронин): 1 часть насыщенного спиртового раствора краски на 10 частей дистиллированной воды.

Соседние файлы в предмете Микробиология