Тематический план лабораторно-практических работ «Микробиология, физиология питания, санитария и гигиена»

Наименование темы лабораторно-практической работы	Количество аудиторных часов при очной форме обучения
№1 Устройство микроскопа и приготовление препаратов	2
№2 Питательные среды для выращивания микроорганизмов. Стерилизация	2
№3 Микроскопирование бактерий	2
№4 Микроскопирование плесневых грибов	2
№5 Микроскопирование дрожжей	1
№6 Определение микробиологических показателей безопасности. (Санитарно-бактериологический анализ проб воды, воздуха, почвы, оборудования, смывов с рук)	2
№7 Определение микробиологических показателей безопасности (пищевых продуктов, кулинарной продукции)	2
№8 Микробиологический контроль персонала и качества сырья	2
№9 Анализ материалов расследования пищевых отравлений. Разработка мероприятий по профилактике пищевых отравлений	2
№10 Разбор данных санитарно-бактериологического анализа готовых блюд и кулинарных изделий	2
№11 Составление меню суточного рациона для разных групп взрослого населения и его физиологическая оценка	2
№12 Составление набора продуктов суточного рациона в соответствии с указанной диетой	3

Лабораторно-практическая работа №1 Устройство микроскопа и приготовление препаратов

Цель работы: научиться работать с микроскопом и приготовлять препараты для микроскопических исследований.

Оборудование: чашка Петри, бактериологическая петля, предметные и покровные стекла, спиртовка, фильтровальная бумага.

Техника безопасности: Во время работы уделять внимание бережной работе с микроскопом, предметными и покровными стеклами. Аккуратно работать с горелкой.

Методика выполнения работы

1. Ознакомление с устройством микроскопа

Поскольку микробиология изучает организмы, большинство из которых невозможно рассмотреть нево­оруженным глазом, для установления их внешней формы, размеров, строения пользуются микроскопом (от греч. micros - малый, scopeo - смотрю). Это оптический прибор, состоящий из механической, осве­тительной и оптической частей (рис. 1).

Рис.1

Микроскоп 1 - основание; 2 - коробка с механиз­мом микрометрической фокусиров­ки; 3 - микрометрический винт; 4 - предметный столик; 5- 6 - винты для перемещения предметного столика; 7 - тубусодержатель; 8 - макрометрический винт; 9 - головка; 10 - тубус с окуляром; 11 - винт для крепления насадки; 12 - револьвер с объективами; 13 - винт, фиксирующий револьвер относительно оси тубуса; 14 - крон­штейн конденсора; 15 - винт пере­мещения конденсора; 16 - конден­сор; 17 - винт для крепления конденсора; 18 - дополнительная линза; 19 - зеркало.

Механическая часть, или штатив микроскопа, состоит из сле­дующих деталей.

Ножка подковообразной или прямоугольной формы, служащая опорой микроскопа.

Тубусодержатель имеет форму дуги и используется в каче­стве ручки при переноске микроскопа.

Тубус - зрительная трубка микроскопа. В верхнее отверстие тубуса свободно вставляется окуляр.

Револьверная насадка крепится к нижней стороне тубуса. Вращая насадку, можно быстро менять ввинченные в нее объек­тивы, во время работы, подводя под тубус любой из них. Объек­тив должен быть, центрирован, т. е. установлен в рабочее поло­жение, при котором главная оптическая ось линз объектива со­впадает с главной оптической осью линз окуляра. Для этого на верхнем диске насадки против объектива имеется желобок, в ко­торый входит ступица (пружинка), закрепляющая объектив. При попадании ступицы в желобок ощущается щелчок.

Предметный столик - устройство, на которое помещают изу­чаемый объект. Препарат, закрепляют имеющимися на столике зажимами (клеммами). В центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света, освещающих препарат. Предметный столик может передвигаться в двух взаимно перпен­дикулярных направлениях с помощью двух симметрично распо­ложенных на краях столика винтов. Подвижность столика позво­ляет любую точку препарата расположить под объективом. Сто­лик может быть также закреплен неподвижно.

Винты - микро и макро. С их по­мощью тубус можно передвигать вверх и вниз для установления его на необходимом расстоянии от препарата. При вращении винтов по часовой стрелке тубус опускается, при вращении против часовой стрелки - поднимается. Микро­винтом пользуются для ориентировочной грубой установки объектива на «фо­кус», т.е. на то расстояние от препарата, при котором он де­лается видимым. Для точной настройки объектива служит микровинт.

Осветительная часть мик­роскопа состоит из зеркала, конденсора и ирис-диафрагмы, расположенных под предметным столиком микроскопа.

Зеркало имеет две поверхности: плоскую и вогнутую Оно отражает световые лучи и направляет их к конденсору. Обычно при работе зеркало повернуто к свету плоской стороной.

Конденсор - представляет собой систему сильных линз и служит для усиления яркости освещения рассматриваемого объекта. Собирая лучи света, отраженные зеркалом, конденсор концентрирует их в плоскости препарата. Конденсор можно передвигать в вертикальном направ­лении при помощи винта.

Ирис-диафрагма, расположенная под конденсором, состоит из тонких металлических пластинок, которые при помощи ры­чажка можно сдвигать или раздвигать, в результате чего отвер­стие диафрагмы может сужаться или расширяться. Ирис-диа­фрагмой регулируют интенсивность освещения препарата. При малом раскрытии диафрагмы возрастают глубина резкости.

Оптическая часть микроскопа представлена объективами и окуляром.

Объектив состоит из линз, заключенных в металлическую оправу. Линза, обращенная к предмету, называется фронтальной. Объектив обладает определенной увеличительной способностью и определенной глубиной фокуса. Чем больше кривизна линз, тем короче фокусное расстояние и больше увеличение объектива. Объектив дает действительное, увеличенное, обратное изображение. На оправе каждого объектива нанесены цифры, показывающие его увеличение. Биологические микроскопы МБР-1, МБИ-1, «Биолам» и другие обычно имеют 3-4 объектива с цифровыми обозначениями 8^x,20^x,40^x,90^x, показывающими их собственное увеличение.

Объективы подразделяют на сухие и иммерсионные. При рассматривании препарата с сухим объективом (8^x, 20^x, 40^x) между его фронтальной линзой и препаратом находится воздух. Так как лучи света проходят среды с различными показателями преломления (предметное стекло, вода, покровное стекло, воздух), часть их отклоняется и не попадает в объектив. При работе с иммерсионным объективом (90^x) для устранения светорассеивания расстояние между фронтальной линзой объектива и препаратом заполняют кедровым (иммерсионным) маслом, которое подвергают специальной обработке, в результате чего его показатель преломления света становится примерно таким же, как у стекла. Коэффициент преломления такого кедрового масла равен 1,515, коэффициент преломления стекла - 1,53. Световые лучи при переходе стекла в слой кедрового масла практически не преломляются и, не отражаясь, попадают в объектив. Таким образом достигается наилучшее освещение рассматриваемого объекта. Кроме того, применение иммерсионного масла повышает разрешающую способность микроскопа.

Окуляр (от лат. oculus - глаз) вставляется в верхний конец тубуса и представляет собой систему двух плосковыпуклых линз, обращенных выпуклостью в сторону объектива. Линза, обращенная к глазу, называется глазной, к препарату - собирательной. Биологические микроскопы снабжены тремя сменными окулярами. На оправе верхней линзы окуляра указано его собственное увеличение. Обычно окуляр увеличивает изображение, данное объективом в 7, 10, 15 раз. Для того чтобы определить общее увеличение используемой оптической системы, необходимо увеличение объектива умножить на увеличение окуляра.

Используя биологический микроскоп, можно рассмотреть объект размером не менее 0,2 мкм (микрометр).

Осветитель используют при микроскопировании, применяя часто электрический свет. Для работы применяют специальные осветители ОИ-7, OИ-9 и ОИ -21.