40 Билет

1. Непрямое дезаминирование аминокислот. Связь между трансаминированием и дезаминированием. Роль витамина В_6. Специфичность аминотрансфераз. Диагностическое значение определения активности аминотрансфераз (АЛТ, АСТ).

Непрямым дезаминированием называют трансаминирование – реакции межмолекулярного переноса аминогруппы (NH2-) от аминокислоты на α-кетокислоту без промежуточного образования аммиака.

Ферменты – аминотрансферазы (трансаминазы). Кофермент трансаминаз – пиридоксальфосфат (производное витамина В6), который в процессе реакции превращается в пиридоксаминфосфат.

Механизм трансаминирования.

+ через образование оснований Шиффа

+

фосфопиридоксамин

Связь между трансаминированием и дезаминирование заключается в том, что большинство ферментов дезаминирования (оксидаз L-аминокислот) активны при pH=10, т.е. реакции дезаминирования в организме протекать не могут. Исключением является глутаматдегидрогеназа, которая активна при pH=7.4. Поэтому остальные аминокислоты вступают в реакцию трансаминирования с α-кетоглутаратом, а образовавшийся глутамат уже вступает в реакцию дезаминирования.

Трансаминазы обладают специфичностью по отношению к субстрату, т.е. для каждой аминокислоты существует своя аминотрансфераза. От аминокислот, с которыйх происходит перенос аминогруппы образуется название фермента (аспартатаминотрансфераза переносит аминогруппу с аспарагиновой кислоты, аланинаминотрансфераза – с аланина и т.д.)

Аминотрансферазы обладают высокой активностью в органах и тканях, в крови же их активность очень мала, поэтому определение уровня ряда трансаминаз в сыворотке крови служит диагностическим признаком поражения разных органов. Для клинических целей наибольшее значение имеют аспартат-аминотрансфераза (АсАТ, АСТ) и аланин-аминотрансфераза (АлАТ, АЛТ), катализирующие соответсвующие реакции:

Органические поражения органов при острых и хронических заболеваниях, сопровождающихся деструкцией клеток, приводят к выходу ферментов в кровь. Чаще всего эти ферменты имеют диагностическое значение при поражениях печени и миокарда.

2. Буферные системы крови. Кислотно-основное состояние. Понятие об ацидозе и алкалозе.

Нормальный pH крови 7,36 -7,44. Кислотно-основное равновесие в крови поддерживается буферными системами плазмы и клеток крови.

Буферные системы – это смеси, состоящие из слабой кислоты и ее соли с сильным основанием или слабого основания с солью сильной кислоты. Они обладают буферными свойствами, т.е. способны противодействовать изменению pH при внесении в систему кислот или оснований.

4 важнейшие буферные системы крови:

1. Бикарбонатная система

Механизм действия:

2. Фосфатная система

Механизм действия:

3) Белковая система

Механизм действия:

3. Гемоглобиновая система

Может быть рассмотрена как гемоглобиновая и оксигемоглобиновая, которые являются взаимопревращающимися и существуют как единое целое.

Механизм действия:

В легких:

Если компенсаторные механизмы организма не способны предотвратить сдвиги концентрации Н⁺, то нарушается кислотно-основное равновесие. При этом могут наблюдаться 2 пртивоположных явления – ацидоз (повышение Н⁺) и алкалоз (понижение Н⁺). В зависимости от механизмов нарушения выделяют дыхательный и метаболический ацидоз и алкалоз.

Дыхательный ацидоз возникает при гиповентиляции легких (при бронхиальной астме, отеке, эмфиземе, механической асфиксии и др.). В результате гиповентиляции повышается содержание СО₂ в крови, а следовательно увеличивается содержание H₂CO₃, а затем и HCO₃^- за счет гемоглобинового буфера.

Метаболический ацидоз обусловлен накоплением в тканях и крови органических кислот. Он возможен при диабете, голодании, лихорадке, заболеваниях ЖКТ, травматическом (ожоговом, кардиогенном) шоке.

Дыхательный алкалоз возникает при резко усиленной вентиляции легких (при вдыхании чистого кислорода, одышке и др.) приводящей к снижению концентрации CO₂, в следствии чего снижается H₂CO₃.

Метаболический алкалоз развивается при потере большого количества кислотных компонентов (неукротимая рвота), всасывании основных компонентов, которые не подвергались нейтрализации HCl желудка, при накоплении основных компонентов в тканях (при длительной тетании). Наблюдается повышение HCO₃ в плазме.

3. Кофакторы и их связь с витаминами. Типичные примеры.

Белки выполняют свою ферментативную функцию большей частью в комплексах с низкомолекулярными соединениями – кофакторами, связанными с ними валентными связями.

Многие из них являются витаминами. Именно поэтому витамины так необходимы нашему организму, но в очень маленьких количествах, т.к. они выполняют каталитическую функцию.

Основные участники окислительно-восстановительных процессов никотинамидные коферменты НАД, НАДФ и флавиновые коферменты ФАД и ФМН. Функциональная группа НАД и НАДФ – важнsй витамин PP, представляющий собой амид никотиновой кислоты.

В состав флавиновых коферментов входит рибофлавин – витамин В₂.

Аскорбиновая кислота или витамин С также является важным участников восстановительно-окислительных процессов.

Пиридоксальфосфат (витамин В₆) является участвует в превращении аминокислот в реакциях трансаминирования.

Тиаминпирофосфат  - тиаминсодержащий (витамин В₁) кофермент ряда ферментов окислительного и неокислительного декарбоксилирования α-кетокислот (пировиноградной и а-кетоглютаровой кислот) и обмене α-кетосахаров.

4. Содержание и формы билирубина в крови. Диагностическое значение форм билирубина.

В крови взрослого здорового человека содержится 4-26 мкмоль/л билирубина. В крови присутствуют 2 формы билирубина: прямой и непрямой.

Непрямой (свободный, неконьюгированный) билирубин – пигмент красного цвета, он токсичен, он нерастворим в воде, поэтому легко адсорбируется на белках плазмы (альбуминах). Такой билирубин определяется в реакции с диазореактивом Эрлиха только одновременно с осаждением белков (непрямая диазореакция). На долю непрямого билирубина приходится 75% всего билирубина крови. Повышение его концентрации до 35 мкмоль/л приводит к желтухе, а более высокий уровень приводит к тяжелому отравлению.

Непрямой билирубин, поступая с током крови в печень подвергается обезвреживанию путем связывания с глюкуроновой кислотой. При этом к билирубину присоединяется 2 остатка люкуроновой кислоты с образованием сравнительно индифферентного комплекса билирубин-диглюкуронида (БДГ) – прямой (коньюгированный, связанный). Он нетоксичен, растворим в воде и дает прямую реакцию с диазореактивом.

В крови количество прямого и непрямого билирубинов и их соотношение резко меняется при поражениях печени, селезенки, костного мозга, при болезнях крови и т.д., поэтому определение содержания обеих форм билирубина в крови имеет существенное значение при дифференциальной диагностике различных форм желтухи.