- •Введение
- •Глава 1. Хакактеристика пищевых продуктов
- •§ 1.1. Особенности формирования органолептических свойств
- •1.1.1. Химический состав
- •1.1.2. Биохимические особенности, определяющие органолептические свойства
- •§ 1.2. Особенности процесса усвоения пищевых продуктов
- •1.2.1. Усвоение белков
- •1.2.2. Усвоение углеводов
- •1.2.3. Усвоение жиров
- •Желчные кислоты
- •Контрольные вопросы:
- •Глава 2. Качество продуктов питания
- •§ 2.1. Виды и отбор проб. Пробоподготовка
- •§ 2.2. Вода в пищевых продуктах и ее определение
- •2.2.1. Определение общего содержания влаги
- •2.2.2. Определение свободной и связанной влаги
- •Контрольные вопросы:
- •§ 2.3. Белки
- •2.3.1. Классификация белков и их значение для жизнедеятельности организма
- •2.3.2. Определение общего белка
- •2.3.3. Определение аминокислот
- •2.3.4. Определение аминокислотного состава
- •Контрольные вопросы:
- •§ 2.4. Углеводы
- •2.4.1 Классификация углеводов и их функции в организме
- •2.4.2. Усваиваемые и неусваиваемые углеводы. Органические кислоты
- •2.4.3. Определение углеводов в продуктах питания
- •Контрольные вопросы:
- •§ 2.5. Жиры (липиды)
- •2.5.1. Состав липидов. Функции липидов и жирных кислот в организме
- •2.5.2. Методы извлечения и количественного определения липидов
- •2.5.3. Химические характеристики липидов
- •2.5.4. Определение фракционного состава липидов и состава жирных кислот пищевых продуктов
- •Контрольные вопросы:
- •§ 2.6. Витамины
- •2.6.1. Жирорастворимые витамины
- •2.6.2. Водорастворимые витамины
- •2.6.3. Витаминоподобные вещества
- •2.6.4. Определение витаминов в продуктах питания
- •1 Стадия
- •2 Стадия
- •Контрольные вопросы:
- •§ 2.7. Минеральные вещества
- •2.7.1. Макроэлементы
- •2.7.2. Микроэлементы
- •Контрольные вопросы:
- •Глава 3. Безопасность продуктов питания
- •Классификация загрязняющих веществ пищевых продуктов. В литературе встречаются различные виды классификаций загрязняющих веществ пищевых продуктов. Рассмотрим некоторые из них.
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.1. Бактериальные токсины
- •Контрольные вопросы:
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.3. Токсичные элементы
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.4. Радиоактивное загрязнение
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.5. Диоксины и диоксинподобные соединения (полихлорированные ароматические соединения)
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.6. Полициклические ароматические углеводороды
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.7. Пестициды
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.8. Нитраты, нитриты, нитрозоамины
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.9. Пищевые добавки
- •Контрольные вопросы:
- •§ 3.10. Генетически модифицированные продукты
- •Агробактериальная трансформация
- •Баллистическая трансформация
- •Контрольные вопросы:
- •Глава 4 лабораторный практикум
- •§ 4.1. Оценка органолептических свойств нативного крахмала
- •§ 4.2. Выделение и идентификация белка
- •§ 4.3. Определение белкового азота в мясе и мясных продуктах
- •§ 4.4. Определение диастазного числа меда
- •Цель: овладеть методикой диастазного числа меда и определить качество меда по данному показателю.
- •2.1. Подготовка к испытанию.
- •§ 4.5. Определение массовой доли редуцирующих сахаров и сахарозы в натуральном меде
- •Выдержка из государственного стандарта «Мед натуральный» гост 19792-87
- •§ 4.6. Определение сырой клетчатки в овощах
- •§ 4.7. Определение содержания аскорбиновой кислоты в соках по методу Тильманса
- •Вещества, используемые в анализе:
- •3. Изучение термостойкости витамина с. Четыре пробы стандартного раствора ак по 5 мл нагреть в конических колбах:
- •§ 4.8. Определение массовой доли кофеина фотометрическим методом
- •Выдержка из межгосударственного стандарта «Кофе натуральный жареный» гост 6805-97
- •§ 4.9. Экстракционно-фотометрическое определение кофеина в чае
- •§ 4.10. Определение содержания таннина в чае
- •Список рекомендуемой литературы
- •Приложение Микроорганизмы
- •Республиканское унитарное предприятие «Научно-практический центр национальной академии наук беларуси по продовольствию» Республика Беларусь, 220037, г. Минск, ул. Козлова, 29,
§ 1.2. Особенности процесса усвоения пищевых продуктов
Все пищевые продукты, главным образом, состоят из белков, углеводов и липидов. В процессе пищеварения в желудочно-кишечном тракте млекопитающих три основных компонента пищи: углеводы, жиры и белки подвергаются ферментативному гидролизу, распадаясь при этом на составляющие строительные блоки, из которых они образованы. Этот процесс необходим для утилизации пищевых продуктов, поскольку клетки, выстилающие кишечник, способны всасывать в кровоток только относительно небольшие молекулы. Усвоение полисахаридов и даже дисахаридов становится возможным только после их полного гидролиза пищеварительными ферментами до моносахаридов. Аналогичным образом белки и липиды также должны быть гидролизованы до блоков, из которых они построены.
Процесс пищеварения начинается с ротовой полости и желудка, тогда как конечные этапы переваривания всех основных компонентов пищи и всасывание в кровь составляющих их структурных блоков происходят в тонком кишечнике. Анатомически тонкий кишечник хорошо приспособлен для выполнения этой функции, поскольку он обладает очень большой площадью поверхности, через которую происходит всасывание. Тонкий кишечник характеризуется не только большой длиной ≈ 4,5 м), но также наличием на его внутренней поверхности множества складок с большим количеством пальцевидных выступов, называемых ворсинками. Каждая ворсинка покрыта эпителиальными клетками, несущими многочисленные микроворсинки. Ворсинки создают огромную поверхность, через которую продукты переваривания быстро транспортируются в эпителиальные клетки, а из них – в капилляры кровеносной системы и в лимфатические сосуды, расположенные в стенке кишечника. Площадь поверхности тонкого кишечника человека составляет ≈ 180 м2, т.е. лишь немногим меньше игровой площадки теннисного корта.
В микроворсинках содержатся пучки актиновых микрофиламентов, соединенных в основаниях микроворсинок с сетью миозиновьк нитей. Эта система нитей обеспечивает волнообразные колебания микроворсинок, благодаря которым происходит местное перемешивание и лучшее всасывание переваренных питательных веществ.
1.2.1. Усвоение белков
Белки пищи расщепляются ферментами в желудочно-кишечном тракте до составляющих их аминокислот (рис. 1.1). Белки, поступающие в желудок, стимулируют выделение гормона гастрина, который в свою очередь вызывает секрецию соляной кислоты обкладочными клетками желез слизистой желудка, а также пепсиногена главными клетками. Желудочный сок имеет рН от 1,5 до 2,5. Благодаря такой кислотности он действует как антисептик, убивая большинство бактерий и других клеток. Кроме того, в условиях низкого рН желудочного сока глобулярные белки подвергаются денатурации, их молекулы разворачиваются и вследствие этого внутренние пептидные связи полипептидных цепей становятся более доступными для ферментативного гидролиза. Пепсиноген, являющийся неактивным предшественником фермента, или зимогеном, превращается в желудочном соке в активный пепсин в результате ферментативного действия самого пепсина, т.е. путем автокатализа. В ходе этого процесса с N-конца полипептидной цепи пепсиногена отщепляются 42
N-конец |
|
С-конец |
Пептидная связь |
Белок (Ser-Gly-Tyr-Ala-Leu) |
|
1
Аминокислота
Фермент |
Активность |
Пепсин (К.Ф. 3.4.4.1) |
Атакует пептидные связи образованные: Tyr, Phe, Trp, Leu, Glu, Gln |
Трипсин (К.Ф. 3.4.4.4) |
Атакует пептидные связи образованные: Lys, Arg |
Химотрипсин (К.Ф. 3.4.4.5) |
Атакует пептидные связи образованные: Tyr, Phe, Trp |
Карбоксипептидаза (К.Ф. 3.4.2.1) |
Последовательное отщепление С-концевых остатков |
Аминопептидаза (К.Ф. 3.4.1.1) |
Последовательное отщепление N-концевых остатков |
Рис. 1.1. – Переваривание белков: 1 – протеолитические ферменты
аминокислотных остатка в виде смеси коротких пептидов. Остающаяся интактной остальная часть молекулы пепсиногена представляет собой ферментативно активный пепсин (К.Ф. 3.4.4.1). В желудке пепсин гидролизует те пептидные связи в белках, которые образованы ароматическими аминокислотами: тирозином, фенилаланином и триптофаном, а также рядом других; в итоге из длинных полипептидных цепей образуется смесь более коротких пептидов.
Как только кислое содержимое желудка попадает в тонкий кишечник, в нем под влиянием низкого рН начинается секреция гормона секретина, поступающего в кровь. Этот гормон в свою очередь стимулирует выделение из поджелудочной железы в тонкий кишечник бикарбоната, что приводит к нейтрализации НС1 желудочного сока. В результате рН резко возрастает от 1,5–2,5, до ≈ 7. В тонком кишечнике переваривание белков продолжается. Поступление аминокислот в двенадцатиперстную кишку вызывает освобождение гормона холецистокинина, который стимулирует секрецию нескольких ферментов поджелудочной железы с оптимумом рН около 7. Три из них: трипсин (К.Ф. 3.4.4.4), химотрпсин (К.Ф. 3.4.4.5) и карбоксипептидаза (К.Ф. 3.4.2.1) – вырабатываются экзокринными клетками поджелудочной железы в виде ферментативно неактивных зимогенов: трипсиногена, химотрипсиногена и прокарбоксипептидазы, соответственно. Благодаря синтезу протеолитических ферментов в виде неактивных предшественников экзокринные клетки не подвергаются разрушению этими ферментами. Попав в тонкий кишечник, трипсиноген, под действием энтерокиназы, специализированного протеолитического фермента, секретируемого клетками кишечного эпителия, превращается в активную форму – трипсин. Свободный трипсин по мере своего образования также участвует в каталитическом превращении трипсиногена в трипсин. Образование свободного трипсина обусловлено отщеплением гексапептида от N-конца полипептидной цепи трипсиногена.
Активный центр трипсина состоит из трех аминокислотных остатков: серин-195 (принято, что нумерация аминокислотных остатков в трипсине соответствует их положениям в проферменте), гистидин-57 и аспарагиновая кислота-102. Сорбционный участок содержит карбоксильную группу аспарагиновой кислоты-189, которая определяет специфичность трипсина к положительно заряженным субстратам. Механизм каталитического гидролиза включает стадию сорбции субстрата, расщепления пептидной связи с образованием ацилфермента и переноса ацильной группы на нуклеофильный акцептор. Трипсин гидролизует пептидные связи, образованные с участием карбонильных групп лизина и аргинина.
Молекула химотрипсиногена представляет собой одну полипептидную цепь с несколькими внутрицепочечными дисульфидными связями. Попав в тонкий кишечник, химотрипсиноген превращается в химотрипсин под действием трипсина, который разрывает длинную полипептидную цепь химотрипсиногена в двух местах, выстригая дипептиды. Три фрагмента, образовавшиеся из исходной цепи химотрипсиногена, удерживаются, однако, вместе посредством перекрестных дисульфидных связей. Химотрипсин гидролизует пептидные связи, образованные остатками фенилаланина, тирозина и триптофана. Следовательно, трипсин и химотрипсин расщепляют полипептиды, образовавшиеся в желудке под действием пепсина, на пептиды меньшей величины. Этот этап переваривания белков протекает с очень высокой эффективностью, поскольку пепсин, трипсин и химотрипсин проявляют при гидролизе полипептидных цепей разную специфичность в отношении пептидных связей, образованных разными аминокислотами.
Деградация коротких пептидов в тонком кишечнике осуществляется другими пептидазами. К ним относится в первую очередь карбоксипептидаза – цинксодержащий фермент, синтезируемый в поджелудочной железе в виде неактивного зимогена прокарбоксипептидазы. Активный центр карбоксипептидазы имеет форму кармана, в полости которого находится атом Zn. В активный центр входят также остатки глутаминовой кислоты, тирозина и аргинина. Функция последнего в механизме катализа – связывание С-концевой карбоксильной группы. Карбоксипептидаза последовательно отщепляет от пептидов С-концевые остатки.
Тонкий кишечник секретирует также аминопептидазу (К.Ф. 3.4.1.1), отщепляющую от коротких пептидов один за другим N-концевые остатки.
В результате последовательного действия этих протеолитических ферментов и пептидаз перевариваемые белки в конечном итоге превращаются в смесь свободных аминокислот, которые далее транспортируются через эпителиальные клетки, выстилающие тонкие кишки. Свободные аминокислоты проникают в капилляры ворсинок и переносятся кровью в печень.
В желудочно-кишечном тракте человека не все белки перевариваются целиком. Большинство животных белков почти полностью гидролизуются до аминокислот, однако ряд фибриллярных белков, например кератин, переваривается только частично. Многие белки растительной пищи, в частности белки зерен злаков, неполностью расщепляются в силу того, что белковая часть семян и зерен покрыта неперевариваемой целлюлозной оболочкой (шелухой).
Известно редкое заболевание стеаторрея (упорный понос), при котором ферменты кишечника не способны переваривать определенные водорастворимые белки зерна, в частности глиадин, повреждающий эпителиальные клетки кишечника. Из пищи таких больных исключают зерновые продукты. Другим заболеванием, связанным с отклонением от нормы активности протеолитических ферментов пищеварительного тракта, является острый панкреатит. При этом заболевании, обусловленном нарушением процесса выделения сока поджелудочной железы в кишечник, предшественники протеолитических ферментов (зимогены) превращаются в соответствующие каталитически активные формы слишком рано, будучи еще внутри клеток поджелудочной железы.
В результате эти мощные ферменты воздействуют на ткань самой железы, вызывая глубокое и очень болезненное разрушение органа, что может привести к смертельному исходу. В норме зимогены, выделяемые поджелудочной железой, не активируются до тех пор, пока не попадут в тонкий кишечник. Поджелудочная железа защищается от самопереваривания и другим путем: в ней синтезируется особый белок – специфический ингибитор трипсина. Поскольку свободный трипсин активирует не только трипсиноген и химотрипсиноген, но также и зимогены двух других пищеварительных ферментов: прокарбоксипептидазу и проэластазу, ингибитор трипсина успешно предотвращает преждевременное образование свободных протеолитических ферментов в клетках поджелудочной железы.