§ 4.7. Определение содержания аскорбиновой кислоты в соках по методу Тильманса

Принцип метода. Принцип метода заключается в том, что АК оттитровывается в кислой среде при помощи краски 2,6-дихлорфенолиндофенола (реактив Тильманса). Этот реактив имеет в кислой среде красную окраску, которая может быть восстановлена вновь присоединением двух атомов водорода. До тех пор, пока идет окисление аскорбиновой кислоты и восстановление краски, титруемая жидкость остается бесцветной, когда же окисление аскорбиновой кислоты заканчивается и одновременно прекращается восстановление краски, первая же капля избытка ее приводит к появлению бледно-красной окраски титруемой жидкости, что указывает на конец реакции.

Цель: овладеть методикой определения содержания аскорбиновой кислоты в соках, консервах по методу Тильманса.

Задачи:

1. Определить содержание АК в апельсиновом (грейфрутовом) соке: консервированном и свежевыжатом. Сравнить полученные данные.

2. Изучить устойчивость АК к нагреванию.

Вещества, используемые в анализе:

1. Соляная кислота, х.ч.;

2. Серная кислота, х.ч.;

3. Натрий 2,6-дихлорфенолиндофенолят х.ч.;

4. Кислота аскорбиновая (фармокоп.);

5. Вода дистиллированная.

Приготовление реактивов:

1. 2% раствор соляной кислоты. 46 мл соляной кислоты плотностью 1,185 г/мл растворить в 300–500 мл дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 мл, довести до метки дистиллированной водой и перемешать.

2. Раствор 2,6-дихлорфенолиндофенолят натрия (раствор красителя). Взвесить 0,2000,001 г 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, растворить в 300 мл свежекипяченой дистиллированной воды температурой 80–85°С, отфильтровать через складчатый фильтр в мерную колбу вместимостью 500 мл и промыть фильтр водой той же температуры. Охладить раствор до 20–25ºС и довести до метки охлажденной до той же температуры водой. Титр устанновить по стандартному раствору АК. Раствор хранить при 6–8°С не более 7 суток.

3. 0,001н. раствор аскорбиновой кислоты. 0,0880 г аскорбиновой кислоты растворить в 1000 мл дистиллированной воды. (Mr (C₆H₈O₆) = 176, молярная масса эквивалента аскорбиновой кислоты равна 88).

Порядок работы:

1.Определение концентрации раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия.

1.1.Холостая проба. В коническую колбу (50 мл) для титрования отобрать 10 мл 2%-ного раствора соляной кислоты. Раствор кислоты оттитровать раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до светло розовой окраски, не исчезающей 15 с. Титрование повторить 2 раза, данные усреднить.

1.2.Титрование стандартного раствора АК. В коническую колбу (50 мл) отобрать 9 мл 2%-ного раствора соляной кислоты и 1 мл стандартного (0,001 н.) раствора АК и быстро оттитровать раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до светло-розовой окраски, не исчезающей в течение 15 с. Титрование повторить 2 раза, данные усреднить.

1.3.Рассчет концентрации (г-экв/л) раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия. Нормальность раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия (N_ДХФИФ) рассчитывается по формуле:

,

где	VAK и NAK –	объем и нормальность стнадартного раствора АК, равные соответственно 1 и 0,1 мл;
	V1 ДХФИФ –	объем раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, пошедший на титрование стандартного раствора АК;
	V2 ДХФИФ –	объем раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, пошедший на титрование расвтора соляной кислоты (холостая проба).

2.Определение содержания АК в соках. Жидкие продукты, как-то: витаминизированные сиропы, настои, соки, экстракты и пр. перед отбором проб тщательно и осторожно перемешивают без взбалтывания во избежание аэрации, что может привести к частичному окислению витамина С.

2.1.Проведение определения. 10 мл исследуемого сока (в зависимости от содержания АК в соке объем, отбираемый для анализа, может быть изменен) вносят в коническую колбу объемом 50 мл, добавляют 10–15 мл 2%-ного раствора соляной кислоты, тщательно перемешивают и титруют раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия до слабо-розового окрашивания. Титрование проводят 2–3 раза, полученные данные усредняют.

В случае, если исследуемый сок содержит мякоть, мешающую фиксированию окраски раствора, сок, разбавленный раствором соляной кислоты, следует отфильтровать.

2.2.Обработка полученных результатов. Массу АК (г) в объеме сока (10 мл), взятого для титрования, рассчитывают по формуле:

,

где	V ДХФИФ –	объем раствора 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия, пошедший на титрование пробы сока;
	N ДХФИФ –	нормальность рабочего раствора 2,6-дихлорфено-линдофенолята натрия, рассчитанная в п.1.3;
	88 –	масса эквивалента аскорбиновой кислоты.

Содержание АК (Х) в исследуемом соке (мг/100мл) рассчитывают по формуле:

,

где	Vсока –	объем пробы сока, взятый на титрование;
	МАК –	масса АК в пробе сока, взятого на титрование.

Определение АК в сиропах и отварах проводят аналогично определению АК в соках. Объем исследуемого продукта, отбираемый для единичного титрования, определяется содержанием АК в данном продукте.