§ 4.5. Определение массовой доли редуцирующих сахаров и сахарозы в натуральном меде

Принцип метода. Сущность метода заключается в определении оптической плотности раствора феррицианида после того, как он прореагирует с редуцирующими сахарами меда. Метод испытания включает определение сахаров меда до и после инверсии.

Цель: овладеть методикой определения массовой доли редуцирующих сахаров и сахарозы в натуральном меде и определить качество меда по данному показателю.

Задачи:

1. Определить массовую долю редуцирующих сахаров до инверсии в предложенном образце меда;

2. Определить массовую долю общего сахара после инверсии;

3. Сравнить полученные результаты с действующим ГОСТом.

Реактивы и растворы:

1. Калий железосинеродистый, х.ч.;

2. Натрия или калия гидроокись, х.ч. (25%-ный раствор);

3. Сахароза, х.ч.;

4. Кислота соляная, конц.;

5. Метиловый оранжевый (0,2%-ный раствор).

Порядок работы:

1.Приготовление стандартного раствора инвертного сахара. 0,381 г предварительно высушенных в эксикаторе в течение 3 суток сахарозы или сахара рафинада, взвешенных с погрешностью не более 0,001г, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 см³ с таким расчетом, чтобы общее количество раствора было не более 100 см³, прибавляют 5 см³ концентрированной соляной кислоты, помещают в колбу термометр и ставят в нагретую до 80–82ºС водяную баню. Содержимое колбы нагревают до 67–70ºС и выдерживают колбу при этой температуре точно 5 мин. Затем колбу с содержимым немедленно охлаждают до 20ºС, добавляют 1 каплю раствора метилового оранжевого, нейтрализуют раствором калия или натрия гидроокиси массовой доли 25%, доводят содержимое колбы дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают.

Полученный раствор содержит 0,4г инвертного сахара в 200 см³ или 2 мг сахара в 1 см³.

2.Колорометрирование стандартного раствора и построение градуировочного графика. В сухие конические колбы вместимостью по 100 см³ отмеривают пипетками следующие объемы растворов:

	V (25% р-ра NaOH), см^3	V (феррицианида), см^3	V (стандартного раствора инвертного сахара), мл	V (H2O), мл
1	5 см^3	20 см^3	5,5 мл	4,5 мл
2			6,0 мл	4,0 мл
3			6,5 мл	3,5 мл
4			7,0 мл	3,0 мл
5			7,5 мл	2,5 мл
6			8,0 мл	2,0 мл
7			8,5 мл	1,5 мл

Объем жидкости в каждой колбе должен быть 35 см³.

Содержимое колб нагревают до кипения и кипятят ровно 1 мин, немедленно охлаждают и измеряют оптическую плотность на фотоколориметре против воды со светофильтром, имеющим максимум светопропускания при  = 440 нм, используя кювету с толщиной слоя раствора 1 см.

Оптическую плотность определяют в каждом растворе не менее 3 раз и из полученных данных вычисляют среднее арифметическое значение каждого результата.

Результаты определений наносят на миллиметровую бумагу, откладывая на оси ординат значения оптической плотности, а на оси абсцисс соответствующие этим значениям количества инвертного сахара (11, 12, 13, 14, 15, 16 и 17 мг), после чего строят градуировочный график, который используется для определения содержания редуцирующих сахаров и общего сахара после инверсии.

3. Определение массовой доли редуцирующих сахаров до инверсии. Навеску меда массой 2 г, взвешенную с погрешностью не более 0,001 г, растворяют в колбе вместимостью 100 см³, 10 см³ этого раствора переносят в чистую колбу вместимостью 100 см³ и доводят до метки (получают рабочий раствор меда).

В коническую колбу вместимостью 100 см³ вносят 20 см³ раствора феррицианида, 5 см³ 25%-ного раствора гидроокиси калия или натрия и 10 см³ рабочего раствора меда, нагревают до кипения и кипятят ровно 1 мин, быстро охлаждают и определяют оптическую плотность на фотоколориметре. Так как при значениях оптической плотности в интервалах 0,15–0,80 получают наиболее точные результаты, то в случае получения других значений оптической плотности определение повторяют, соответственно изменив количество добавляемого к феррицианиду испытуемого раствора.

По градуировочному графику находят содержание редуцирующих сахаров (в 10 мл расбочего раствора меда), рассчитывают процентное содержание редуцирующих сахаров в меде (Х₁).

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами 2 параллельных определений не должны превышать 0,5%.

4.Определение массовой доли общего сахара после инверсии. В колбу вместимостью 200 см³ отмеривают пипеткой 20 см³ раствора навески меда (2 г в 100 см³ раствора), добавляют 80 см³ дистиллированной воды и 5 см³ концентрированной соляной кислоты, инверсию проводят как указано в пункте 1.

Определение содержания общего сахара после инверсии проводят также, как и определение содержания редуцирующего сахара до инверсии.

По градуировочному графику находят содержание редуцирующих сахаров после инверсии (в 20 мл раствора меда), рассчитывают процентное содержание (Х₂).

За окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов параллельных определений. Допускаемые расхождения между результатами 2 параллельных определений не должны превышать 0,5%.

5.Обработка результатов. По разнице между содержанием редуцирующих сахаров после и до инверсии, определенным по п.4 и п.3 соответственно, вычисляют массовую долю сахарозы в меде (Х₃):

X₃ = X₂ – X₁,

где	X2 –	массовая доля общих сахаров после инверсии;
	X1 –	массовая доля сахаров до инверсии.

Массовую долю редуцирующих сахаров или сахарозы в процентах пересчитывают на безводное вещество умножением массовой доли редуцирующих сахаров (сахарозы) на коэффициент :

 = 100/(100 – W),

где

W –

массовая доля воды в меде.

Сравнить полученные результаты с требованиями, предъявляемыми к меду согласно ГОСТ, и сделать вывод о качестве анализируемых образцов меда.