3.1. Подсчет клеток в счетных камерах

Этот метод рекомендуется использовать для подсчета крупных объектов: дрожжей, одноклеточных водорослей, конидий грибов и некоторых относительно крупных бактерий. Обычно используют камеру Горяева-Тома.

3.2. Подсчет клеток в капиллярах Перфильева

Метод рекомендуется использовать для определения общего количества микроорганизмов в различных естественных субстратах таких, как почва или природные воды.

3. Подсчет клеток на фиксированных окрашенных мазках

(метод Виноградского – Брида).

Метод широко используется для определения численности микроорганизмов в различных естественных субстратах: почве, загрязненных водах, молоке, в оптически непрозрачных питательных средах, содержащих нерастворимые в воде компоненты. Преимущество метода заключается также в том, что фиксированные окрашенные препараты хорошо сохраняются, поэтому подсчет можно проводить в удобное для исследователя время.

3.4. Подсчет клеток на мембранных фильтрах

Этот метод рекомендуется использовать для оценки численности микроорганизмов в субстратах с низкой плотностью клеток. Как правило, его применяют для определения количества микроорганизмов в водах как пресных, так и солевых водоемов, при санитарно-микробиологических анализах воды, плодово-ягодных соках и т.п. Метод основан на концентрировании клеток на поверхности фильтра в результате фильтрации определенного объема исследуемой пробы с последующим окрашиванием клеток и их подсчетом.

5. Определение количества клеток высевом на плотные

питательные среды (чашечный метод Коха)

Метод широко применяется для определения численности жизнеспособных клеток в различных естественных субстратах и в лабораторных питательных средах. Сущность его заключается в высеве определенного объема исследуемой суспензии микроорганизмов на плотную среду в чашки Петри и подсчете выросших после инкубации колоний. Принято считать, что каждая колония – потомство одной клетки.

Этот метод включает три этапа: приготовление разведений, посев на плотную среду в чашки Петри и подсчет выросших колоний.

6. Определение количества клеток высевом в жидкие среды

(метод предельных разведений)

Метод применяется для подсчета микроорганизмов, которые плохо или совсем не развиваются на плотных питательных средах. Этим же методом пользуются при определении численности бактерий, относящихся к той или иной физиологической группе. Определение количества микроорганизмов методом предельных разведений включает приготовление разведений, посев в жидкую среду, регистрацию наличия или отсутствия роста инкубации и расчет наиболее вероятного числа клеток в единице объема исходного субстрата.

4. Микробиологические методы исследования воды

Водные экосистемы являются средой обитания микроорганизмов. Первичными продуцентами служат одноклеточные водоросли. В пищевую цепь входят бактерии и простейшие. Микрофлора воды чаще всего отражает микробный пейзаж почвы около водоема, постоянно меняется и обновляется, что связано с попаданием различных бактерий с ливневыми, сточными, талыми водами, с пылью, из организма живущих в водоеме рыб, гниющих растений. Микрофлора в пресных и соленых водоемах различна.

В пресных водоемах (озерах, реках) обнаруживаются кокки (Micrococcus roseus и др.) и палочковидные бактерии (Pseudomonas fluorescens). Анаэробов в воде мало, в основном они размножаются в иле на дне водоемов, участвуя в биохимических процессах очищения. Сапрофитные микроорганизмы выполняют роль мусорщиков, расщепляя органические отходы, делая их пригодными для метаболических процессов других живых существ.

Микрофлора морей и океанов не так богата и представлена галофильными (солелюбивыми) микроорганизмами.

Вода артезианских скважин почти не содержит микроорганизмов, что объясняется фильтрующей способностью почвы.

С ливневыми, талыми и сточными водами в реки и озера попадают микроорганизмы – представители нормальной флоры кишечника человека и животных, например, кишечная палочка, энтерококки, различные клостридии. Вместе с ними могут попасть и патогенные микроорганизмы (брюшно-тифозные, дизентерийные бактерии, холерные вибрионы, вирусы полиомиелита, гепатита), которые сохраняются от нескольких дней до недель. Именно поэтому водный путь передачи является одним из возможных способов распространения кишечных инфекций.