Ход работы

Оборудование и материалы: стерильные чашки Петри, колбы, пипетки, пробирки, питательная среда, спиртовка.

Микробиологическое исследование воздуха проводят следующим образом:

1. Расплавляют на водяной бане стерильную питательную среду, содержащую агар или желатину.

2. Затем сосуд со средой берут в правую руку, вынимают из него пробку, зажимают ее мизинцем и безымянным пальцами левой руки.

3. Обжигают горло сосуда в пламени горелки и, приоткрыв большим и средним пальцами левой руки крышку чашки Петри, быстро наливают в чашку расплавленную среду в таком количестве (20-39 мл), чтобы дно чашки было полностью покрыто. Крышку тотчас закрывают.

4. Чашку оставляют на горизонтальной поверхности до тех пор, пока не застынет среда.

5. Затем открывают чашку Петри и экспонируют 5 минут.

6. По истечении 5 минут закрывают.

7. На крышке чашки Петри карандашом или специальными чернилами делают надписи с указанием даты посева, фамилии студента, подгруппы.

8. Чашки переворачивают вверх дном и ставят в термостат при температуре

35-37⁰С. По количеству выросших колоний, с учетом разведения, судят о содержании микробов в воздухе.

9. Подсчет, как правило, проводят, не открывая чашек Петри. Для удобства чернилами или карандашом по стеклу отмечают просчитанную колонию точкой на наружной стороне дна чашки. При большом количестве колоний дно чашки Петри делят на секторы, подсчитывают число колоний в каждом секторе и суммируют.

10. Количество клеток в 1 мл исследуемого субстрата вычисляют по формуле, указанной выше. Результаты оформляют в лабораторный журнал.

СПИСОК РЕКОМЕНДУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1.Асонов Н.Р. Практикум по микробиологии. М.: Колос, 1975.160 с.

2.Практикум по микробиологии /Под ред. Н.С. Егорова. М.: Изд-во Моск.ун-та, 1976. 307 с.

Вопросы

для подготовки к отчетно-контрольному занятию

по материалам лабораторного практикума

1. В каких случаях предпочтительно использовать препараты "висячая капля" и "раздавленная капля"?

2. Какие основные красители используют для окраски мазков?

3. Как определить общее увеличение микроскопа?

4. С какой целью используется иммерсионное масло?

5. Перечислите основные требования, предъявляемые к организации микробиологической лаборатории.

6. Перечислите основные требования техники безопасности при работе с микроорганизмами.

7. Для чего необходимы питательные среды?

8. Чем определяется специфичность сред?

9. Что является определяющим принципом при составлении питательных сред?

10. Какие среды используются для получения аминокислот, витаминов, продуктов жизнедеятельности микроорганизмов? Отметьте их главные особенности.

11. Какие среды различают по назначению и физическому состоянию? С какой целью они используются (отметьте кратко)?

12. Какую культуру называют накопительной?

13. Отметьте главные особенности применения агар-агара, желатины и кремнекислого геля.

14. В чем принципиальное отличие автотрофных и гетеротрофных микроорганизмов?

15. Каковы основные формы бактериальной клетки? Привести примеры взаимного расположения клеток.

16. На какие 3 группы разделяются бактерии по способности образовывать споры?

17. Что означают термины "стрептококки", "стафилококки"?

18. В чем особенности энергетического обмена цианобактерий?

19. Какова роль цианобактерий в процессах почвообразования?

20. Что означает термин "колония микроорганизмов"?

21. Что понимается под морфологическими признаками микроорганизмов?

22. Перечислите основные культуральные признаки микроорганизмов.

23. В чем заключается принцип метода окраски по Граму?

24. Объясните различия в окраске по Граму между отдельными микроорганизмами?

25. Дайте краткую характеристику молочнокислых бактерий.

26. Что понимается под протеолитической активностью молочнокислых и др. бактерий?

27. Что такое гомоферментативные бактерии (в отличие от гетероферментативных)?

28. Почему молоко является лучшей питательной средой для молочнокислых бактерий?

29. Почему нежелательно появление молочной плесени в процессе сквашивания молока или соления овощей?

30. В каких условиях возможно развитие бактерий рода Clostridium?

31. Почему бактерии, осуществляющие маслянокислое брожение, часто называют ацетонобутиловым?

32. Какие вещества могут сбраживаться бактериями рода Clostridium?

33. Какой источник азота может быть использован клостридиями для биосинтезов?

34. Какой источник углерода может быть использован клостридиями для биосинтезов?

35. Чем опасны некоторые представители клостридиев для человека?

36. Какие признаки позволяют отнести актиномицеты к бактериям?

37. Почему актиномицеты раньше называли лучистыми грибками?

38. Практическое использование в биотехнологии отдельных актиномицетов.

39. Какова роль актиномицетов в процессе почвообразования?

40. Дайте краткую характеристику царства грибов.

41. Дайте характеристику класса Zygomycota на примере грибов р.Mucor.

42. Дайте характеристику класса Ascomycota на примере грибов р.Aspergillus, р.Penicillium. Продуцентами каких соединений являются представители этих родов?

43. Дайте краткую характеристику дрожжей рода Saccharomyces. Их практическая значимость.

44. В чем заключается особенности метаболизма дрожжей р.Candida?

45. Какие организмы относят к царству Protozoa? Практическое использование некоторых представителей простейших.

46. Какие организмы относят к микроводорослям. Практическое значение микроводорослей.

47. Приведите примеры целлюлозоразрушающих микроорганизмов. В чем их роль в круговороте веществ в биосфере?

48. Практическое использование целлюлозоразрушающих микроорганизмов.

49. Какой процесс называется азотфиксацией?

50. Приведите примеры микроорганизмов, способных к фиксации атмосферного азота.

51. Для чего необходим микробиологический анализ почв?

52. Основные этапы микробиологического анализа образца почвы.

53. Какой процесс называется инокуляцией?

54. Какой процесс называется пересевом микроорганизмов?

55. Какой процесс называется инкубацией микроорганизмов?

56. Какие методы количественного учета микроорганизмов используются в микробиологической практике? В чем их суть?

57. Какой показатель называют коли-индексом и коли-титром?

58. В чем суть седиментационных методов микробиологического анализа воздуха?

59. В чем суть аспирационных методов микробиологического анализа воздуха?

60. Каково значение мембранных фильтров в микробиологическом анализе воздуха?

22