Практика:

1. Принцип цветных качественных реакций на аминокислоты и белки. Возможность использования в практике.

2. Удаление белков из раствора и очистка белковых растворов от примесей. Механизмы реакций. Использование в биохи­мии и медицине.

3. Методы осаждения белков, применимые для получения бел­ков и ферментов в нативном состоянии.

4. Составление произвольных тетрапептидов с заданными свой­ствами, умение назвать их, определение суммарного за­ряда и растворимости, зоны pH, в которой находится их изоэлектрическая точка.

5. Определение составных компонентов фосфопротеинов и гли­копротеинов.

6. Качественные реакции открытия витаминов А, Е, К, D₃, В₁, В₂, В₃, В₆, В₁₂. Принцип методов, ход определения, практическое значение методов.

7. Количественное определение витамина С в моче. Принцип метода, ход определения, клинико-диагностическое значение, нормальные показатели.

8. Исследование скорости ферментативной реакции на примере каталазы.

9. Практическое обнаружение влияния температуры на активность ферментов на примере амилазы слюны и дегидрогеназ дрожжей. Принцип метода и ход определения.

10. Практическое обнаружение действия инактиваторов и активаторов ферментов на примере амилазы слюны. Принцип метода и ход определения.

11. Иследование специфичности действия ферментов на примере амилазы слюны и уреазы. Принцип метода и ход определения.

12. Принцип метода и ход определения активности амилазы в сыворотке крови и моче. Нормальные величины и клинико-диагностическое значение метода.

Занятие № 10 Тема: Общие пути катаболизма: окислительное декарбоксилирование пирувата. Цикл трикарбоновых кислот. Ферменты дыхательной цепи. Окислительное фосфорилирование (семинар) Теория:

1. Пластическая (анаболизм) и энергетическая (катаболизм) функции метаболизма.

2. Стадии катаболических превращений питательных веществ в организме, связанные с высвобождением свободной энергии. Чему равно высвобождение и запасание энергии на каждом из этапов?

3. Строение и функции митохондрий.

4. Химическая формула АТФ (аденозинтрифосфорная кислота), роль АТФ? Значение циклов АТФ – АДФ и НАДФН – НАДФ⁺. Основные макроэргические соединения клетки – АТФ, 1,3‑ди-фосфо­глицерат, фосфоенолпируват, креатинфосфат, ацетилS-КоА? Что такое субстратное фосфорилирование?

5. Источники ключевых продуктов метаболизма – ацетилS-КоА и пировиноградной кислоты. Дальнейшая судьба веществ.

6. Строение мультиферментного пируватдегидрогеназного комплекса, его ферменты и коферменты. Суммарная реакция окислительного декарбоксилирования пировиноградной кислоты. Химизм пяти отдельных реакций. Регуляция процесса.

7. Реакции цикла трикарбоновых кислот (цикл Кребса, цикл лимонной кислоты). Механизм окисления ацетильной группы. Ферменты и коферменты процесса. Биологическое значение ЦТК. Роль оксалоацетата, НАДН и метаболитов ЦТК в регуляции скорости цикла. Взаимосвязь ЦТК с катаболизмом углеводов, липидов, белков.

8. Характеристика процесса окислительного фосфорилирования по плану:

• молекулярная организация и последовательность ферментных комплексов цепи переноса электронов, схема цепи дыхательных ферментов;

• перенос электронов по комплексам дыхательной цепи, роль коферментов (ФМН, FeS-белки, коэнзимQ, гемовые группы цитохромов);

• роль кислорода – конечного акцептора электронов восстановленных субстратов биологического окисления;

• выкачивание протонов из матрикса митохондрий – участки трансмембранного переноса (участки сопряжения окисления и фосфорилирования), формирование электрохимичес-кого градиента;

• строение АТФ-синтазы, роль электрохимического градиента в ее работе.

9. Коэффициент фосфорилирования Р/О. Его величина для НАДН и ФАДН₂. Расчет количества АТФ, полученной при окис-лении некоторых субстратов (аланин, аспарагиновая и глутаминовая кислоты).

10. Комплексы ферментов дыхательной цепи, на которые могут действовать ингибиторы. Как ингибируется процесс окислительного фосфорилирования?

11. Разобщение окисления и фосфорилирования. Механизм этого явления. Вещества, вызывающие разобщение.

12. Бурая жировая ткань: ее функция, локализация. Функция белка термогенина. Его роль в термогенезе.

13. Причины гипоэнергетических состояний.

14. Регуляция окислительного фосфорилирования. Дыхательный контроль. Роль соотношения АТФ и АДФ в регуляции работы дыхательной цепи.

15. Примеры применения нуклеотидов (АТФ, АДФ, АМФ, ФМН) в качестве лекарственных препаратов.