Методы лабораторной диагностики воспаления. Клетки, вовлеченные в воспалительные процессы (нейтрофилы, моноциты, макрофаги, эндотелиальные клетки). Цитокины. Аутовоспалительные заболевания.

Лабораторный синдром воспаления неспецифичен, выраженность его зависит от обширности поражения легочной ткани. Изменения со стороны периферической крови выражаются в лейкоцитозе, сдвиге лейкоцитарной формулы влево, токсической зернистости нейтрофилов, лимфопении, эозинопении, увеличении СОЭ. Лейкопения ниже 3 – 109л или лейкоцитоз выше 25 - 10 9 л является неблагоприятным прогностическим признаком.

Биохимические анализы крови не дают специфической информации, но могут свидетельствовать о поражении ряда органов или систем. Признаки воспаления характеризуются повышением содержания в крови альфа-2 и гамма-глобулинов, сиаловых кислот, серомукоида, фибрина, гаптоглобина, лактатдегидрогеназы (ЛДГ), особенно третьей фракции (ЛДГ-3), появляется в крови С-реактивный белок (СРП).

При наличии воспаления в любой части тела в циркулирующую кровь поступают белки воспаления. Для обнаружения в крови повышенного содержания этих белков используют два анализа: скорость оседания эритроцитов (СОЭ) и С-реактивный белок (СРБ). Эти два теста называют маркеры воспаления

СОЭ - неспецифический тест, потому что повышенный результат теста часто указывает на наличие воспаления, но не указывает где именно воспаление или что является причиной воспаления. СОЭ может быть ускорена при других состояниях, кроме воспаления. По этой причине СОЭ, как правило, используется в сочетании с другими тестами, с таким как С-реактивный белок. СОЭ используется для диагностики определенных конкретных воспалительных заболеваний таких как височный артериит, системный васкулит и ревматическая полимиалгия. Значительное повышение СОЭ является одним из главных результатов исследований, используемых для подтверждения диагноза васкулит. Этот тест позволяет осуществлять контроль активности болезни и реакцию на терапию височного артериита, системного васкулита, а также системной красной волчанки (СКВ)

С-реактивный белок - белок острой фазы. Синтез СРБ осуществляется в печени. Сигнал для синтеза поступает от макрофагов из очага воспаления.Синтез усиливается при острых инфекциях, воспалении, опухолевых и аутоиммунных заболеваний, заболеваниях с иммунными комплексами. При этих патологических состояниях концентрация СРБ в сыворотке крови повышается быстро, в течение нескольких часов после заражения.

СРБ определяют в образце крови. У здорового человека уровень этого белка колеблется от 0,00007 до 0,008 г/л, а при воспаления до 0,4 г/л, Содержание СРБ в сыворотке крови при воспалительных процессах увеличивается в 100 -1000 раз. При воспалении повышение содержание СРБ в плазме отмечается уже через 6-10. Короткий период полужизни белка (10 - 24 часа) позволяет использовать его для мониторинга заболеваний и эффективности терапии.

Как правило, СОЭ не меняется так быстро, как СРБ, который быстро повышается в начале воспаления и снижается при его ликвидации. На уровень СРБ не влияют многие из факторов, от которых зависит СОЭ, что определяет его как лучший маркер некоторых типов воспаления, например при диагностике пневмонии у детей или при мониторинге активности ревматоидного артрита.

Цитокины — небольшие пептидные информационные молекулы.

Цитокин выделяется на поверхность клетки А и взаимодействуют с рецептором находящейся рядом клетки В. Таким образом, от клетки А к клетке В передается сигнал, который запускает в клетке В дальнейшие реакции. Их основными продуцентами являются лимфоциты. Кроме лимфоцитов их секретируют макрофаги, гранулоциты, ретикулярные фибробласты, эндотелиальные клетки и другие типы клеток. Они регулируют межклеточные и межсистемные взаимодействия, определяют выживаемость клеток, стимуляцию или подавление их роста, дифференциацию, функциональную активность и апоптоз, а также обеспечивают согласованность действия иммунной, эндокринной и нервной систем в нормальных условиях и в ответ на патологические воздействия.

Локальная продукция провоспалительных цитокинов приводит к формированию очага острого воспаления. Основными продуцентами провоспалительных цитокинов выступают моноциты, макрофаги, лимфоциты. В их секреции способны принимать участие до 90% моноцитов крови и до 60% тканевых макрофагов. Основным индуктором их выработки выступают инфекционные агенты (например, ЛПС бактерий), а также факторы воспаления (например, сами провоспалительные цитокины). Кроме отмеченных клеток в продукции провоспалительных цитокинов участвуют практически все клетки, вовлеченные в воспалительный процесс: клетки Лангерганса кожи, фибробласты соединительной ткани, гранулоциты крови, эпителиоциты, клетки эндотелия сосудов. Все эффекты, опосредуемые цитокинами, реализуются через связывание их со специфическими собственными рецепторами, предстаавленными на многих типах клеток.

Все цитокины, а их в настоящее время известно более 30, по структурным особенностям и биологическому действию делятся на несколько самостоятельных групп:

• провоспалительные, обеспечивающие мобилизацию воспалительного ответа (интерлейкины 1,2,6,8, ФНОα, интерферон γ);

• противовоспалительные, ограничивающие развитие воспаления (интерлейкины 4,10, TGFβ);

• регуляторы клеточного и гуморального иммунитета — (естественного или специфического), обладающие собственными эффекторными функциями (противовирусными, цитотоксическими).

Цитокины — антигеннеспецифические факторы, поэтому специфическая диагностика инфекционных, аутоиммунных и аллергических заболеваний с помощью определения уровня цитокинов невозможна. Но определение их концентрации в крови даёт информацию о функциональной активности различных типов иммунокомпетентных клеток; о тяжести воспалительного процесса, его переходе на системный уровень и о прогнозе заболевания.

Интерлейкин-1 «ранний» провоспалительный цитокин.Один из главных медиаторов естественного иммунитета.Семейство ИЛ-1 включает 10 представителей, основными из которых являются ИЛ-1-альфа (преимущественно мембранассоциированная форма), ИЛ-1-бета (растворимая форма), ИЛ-18, а также ИЛ-1ра –растворимые антагонисты ИЛ-1, способные соединяться с рецептором для ИЛ-1 без его активации.Таким образом ИЛ-1ра блокируют функции ИЛ-1 и оказывают антивоспалительныйэффект.Стимулятором образования ИЛ-1ра является ИЛ-6 и др факторы.

Аутовоспалительные болезни - гетерогенная группа редких генетически детермнированных состояний, характеризующихся непровоцируемыми приступами воспаления и манифестирующиеся лихорадкой и клинической симптоматикой, напоминающей ревматическую при отсутствии аутоиммунных или инфекционных причин. (периодическая болезнь, Синдром Макла — Уэльса - первые симптомы появляются после переохлаждения и переутомления через 1,5 — 2 часа.В основном симптомы идут в такой последовательности:

Периодическая уртикарная сыпь, Жар (лихорадка), Отёк суставов, Конъюнктивит, Лейкоцитоз, Потеря слуха (из-за атрофии слухового нерва), Амилоидоз почек)

Основные черты патогенеза аутовоспалительных синдромов:

•Причина (для большинства синдромов) -наличие одного мутантного гена,

•Наличие генов –«модификаторов» течения заболевания , мутации которых меняют течение заболевания (утяжеляют или ослабляют),

•Основное звено патогенеза –гиперактивация естественного (антигеннеспецифического) иммунитета,

•Основной медиатор воспаления -ИЛ-1β.

Общие клинико-лабораторные признаки проявлений аутовоспалительных синдромов :

Клинические:

• рецидивирующие периодические атаки лихорадки,

• сыпи разнообразного характера,

• воспаление серозных оболочек,

• мышечно-артикулярная симптоматика,

• высокий риск развития амилоидоза (FMF,TRAPS,КАПС),

Лабораторные:

• Значительное повышение острофазовых маркеров:

• СОЭ,

• Лейкоцитоз,

• СРБ,

• Сывороточный амилоид А (SAА)

Методы оценки фильтрационной функции почек. ХБП, Клиническое значение креатинина в крови.

Наиболее часто для выявления дисфункции почек (функциональной способности клубочков и канальцев), а также в целях дифференциальной диагностики нефропатий используют креатинин и мочевину. Повышение концентрации в крови креатинина и мочевины.

Методики определения клубочковой фильтрации:

Основными способами изучения функции клубочков являются проба Реберга-Тареева, определение скорости клубочковой фильтрации по формуле Кокрофта-Голда. Данные методики основаны на изменении уровня эндогенного креатинина и вычислении его клиренса. На основании его изменения в плазме крови и моче делается определенный вывод относительно функции почек.

Норма креатинина в крови:

Женщины: 44.0-80.0 мкмоль/л;

Мужчины: 74,0—110,0 мкмоль/л;

Суточное выведение креатинина с мочой:

у мужчин: 8,8—17,7 ммоль (1,0—2,0 г)

у женщин: 7,1—15,9 ммоль (0,8—1,8 г)

Проба Реберга-Тареева:

Для исследования используют сыворотку крови и мочу. Обязательно следует учитывать время сбора анализов, так как от этого зависит точность исследования. Существует несколько вариантов указанной пробы. Наиболее распространенной методикой является следующая: мочу собирают на протяжении нескольких часов (обычно двухчасовые порции). В каждой из них определяется клиренс креатинина и минутный диурез (количество мочи, образующейся за минуту). Расчет скорости клубочковой фильтрации проводится на основании этих двух показателей.

Несколько реже проводится определение клиренса креатинина в суточной порции мочи или исследование двух 6-часовых проб.

Параллельно, каким бы методом ни проводилась проба, утром натощак забирается кровь из вены для оценки концентрации креатинина.

Метод подсчёта: СКФ = (up х Vn) / (СрхТ), где Vn -объём мочи за данное время; Ср - концентрация креатинина в плазме(сыворотке); up - концентрация креатинина в моче; Т - время сбора мочи в минутах.