Занятие № 4 количественный учет микрофлоры воздуха и воды определение микробного числа

Цель: Провести количественный учет микроорганизмов воздуха и воды.

Задачи

1. Изучить методы количественного учета микрофлоры воздуха и воды.

2. Провести микробиологический анализ воздуха и санитарно-бактериологическое исследование воды.

Материалы и оборудование. Чашки Петри со стерильным МПА, стерильные пипетки на 1 мл, водяная баня, электроплитка, термометр, вода водопроводная, вода из водоема, спиртовка, спички.

Основные понятия. Общее микробное число воды, общее микробное число воздуха, коли-индекс, коли-титр, санитарно-показательные микроорганизмы, автохтонная микрофлора, аллохтонная микрофлора, зоны сапробности.

Ход работы

Задание № 1. Заложить опыт по определению ОМЧ (общее микробное число) воздуха.

Для заражения чашки Петри открывают в исследуемом помещении или на улице на 5 мин. Крышку чашки Петри снимают и, не переворачивая, ставят рядом. На крышке чашки Петри указывают вариант опыта, дату посева. Зараженные чашки Петри помещают в термостат при температуре 25-28°С.

Через 2-3 суток подсчитывают число колоний микроорганизмов, развившихся на агаровой пластинке чашки Петри. При этом учитывают следующее: по приблизительным подсчетам (Омелянский) на площади в 100 см² в течение 5 минут оседает столько микроорганизмов и спор, сколько их содержится в 10 л воздуха. Допускаем, что каждая колония возникла из одной клетки или споры. Этот метод дает лишь приблизительные данные, но относительное число микроорганизмов в воздухе разных помещений он позволяет обнаруживать довольно точно. Заполняют таблицу № 4, делают выводы.

Например: в чашке Петри обнаружено 5 колоний, радиус чашки 2 см. Площадь составляет S=πr²=3.14*4=12.5. Тогда в 10 л содержится

Таблица № 4. Общее микробное число (ОМЧ) воздуха помещений.

Исследуемое помещение	Время экспозиции	Число КОЕ (колониеобразующих едениц) бактерий		ОМЧ, к-во/м^3
		На чашку Петри	100 см^2поверхности агаровой пластинки
Аудитория
Коридор
Улица

Колонии микроорганизмов, выделенные из воздуха на пластинках МПА, могут быть использованы для работы по идентификации вида. Наиболее часто из воздуха выделяются колонии микрококков, сарцин, некоторых бацилл и бактерий.

Задание № 2. Заложить опыт по определению ОМЧ воды.

Для исследования в стерильные колбы берут водопроводную воду. Из колбы берут стерильной пипеткой 1 мл воды и вносят в чашку Петри с расправленной средой (МПА) (температура ее не должна быть выше 45°С). Чашку закрывают и, осторожно наклоняя, перемешивают питательную среду, дают пластинке застыть, помещают в термостат. Через 3-5 суток развившиеся в чашках Петри колонии подсчитывают и определяют количество бактерий в 1 мл воды.

После подсчета колоний производится определение микробного числа воды – количества микроорганизмов на 1 мл исследуемой воды, учитывая разведение, если оно производилось.

Данные оформляют в виде таблицы № 5, делают выводы.

Таблица № 5. Общее микробное число (ОМЧ) питьевой воды

Источник	Количество микроорганизмов в исследуемом объеме воды	ОМЧ, к-во/мл
Водопроводная вода

Контрольные вопросы

1. Особенности микрофлоры воздуха. Распространение микроорганизмов в воздухе.

2. Нормы санитарного состояния воздуха помещений.

3. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха.

4. Микрофлора питьевой воды.

5. Микрофлора природных вод. Распределение микроорганизмов в воде.

6. Санитарные показатели питьевой воды. Общее микробное число воды. Коли-индекс, коли-титр воды.

7. Загрязнение и самоочищение водоемов. Роль микроорганизмов в процессах самоочищения водоемов.

8. Биологическая очистка питьевых и сточных вод.

9. Санитарно-бактериологическое исследование воды. Определение ОМЧ, коли-индекса, коли-титра.

10. Санитарно-показательные микроорганизмы воздуха, воды, почвы.

11. Требования, предъявляемые к санитарно-показательным микроорганизмам.

12. Микрофлора пищевых продуктов (кисло-молочных, рыбы, мяса, колбасных изделий, консервов).

13. Характеристика групп микроорганизмов, используемых при оценке безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов.

14. Санитарно-бактериологические нормативы для различных пищевых продуктов.

15. Методы санитарно-бактериологического исследования пищевых продуктов.

16. Почва как среда обитания микроорганизмов.

17. Экологические факторы распространения микроорганизмов почвы.

18. Взаимоотношения между микроорганизмами почвы.

19. Участие микрофлоры почвы в процессах минерализации органических веществ и образовании гумуса.

20. Санитарно-бактериологическое исследование почвы.