- •XI издания (выпуск 2)
- •1. Колориметрические методы определения белка
- •1. Определение белка с биуретовым реактивом
- •2. Микроопределение белка с реактивом Бенедикта
- •3. Определение белка по методу Лоури
- •4. Определение белка по методу Лоури
- •5. Определение белка по методу Бредфорд
- •6. Определение белка по методу Седмака
- •7. Определение белка по методу Флореса
- •II.Спектрофотометрический метод определения белка
- •III. Определение белка по содержанию общего азота
- •1. Микрометод Кьельдаля
- •2. Определение белка с реактивом Несслера
- •1. Определение ретинола ацетата
- •2. Определение содержания витамина а
- •3. Определение содержания тиамина хлорида
- •4. Определение содержания рибофлавина (витамина в2)
- •5. Определение содержания
- •6. Определение цианокобаламина (витамина в12)
- •7. Определение содержания
- •8. Определение содержания никотинамида
- •9. Определение содержания
- •10. Определение содержания рутина (витамина р)
- •11. Определение альфа - токоферола ацетата (витамина е)
- •12. Определение кальция пантотената
- •3',3",5', 5"-Тетрабром-м-крезолсульфофталеин
- •3', 3", 5", 5" -Тетрабромфенолсульфофталеин
- •3',3",5',5"-Тетрабромфенолсульфофталеина
- •1,1',1",8"-Тетраокси-(8,2',8',2"-бис-азотринафталин)
- •3,6,3',6',3",6"-Гексасульфокислоты моногидрат
- •1. Cormus ledi palustris
- •2. Cortex frangulae
- •3. Cortex quercus
- •4. Cortex viburni
- •5. Flores calendulae
- •6. Flores centaureae cyani
- •8. Flores crataegi
- •9. Flores helichrysi arenarii
- •10. Flores sambuci nigrae
- •11. Flores tanaceti
- •12. Flores tiliae
- •13. Folia belladonnae
- •14. Folia digitalis
- •15. Folia eucalypti viminalis
- •16. Folia farfarae
- •17. Folia hyoscyami
- •18. Folia menthae piperitae
- •19. Folia menyanthidis trifoliatae
- •20. Folia plantaginis majoris
- •21. Folia orthosiphonis staminei
- •22. Folia salviae
- •23. Folia sennae
- •24. Folia stramonii
- •25. Folia urticae
- •26. Folia uvae ursi
- •27. Folia vitis - idaea
- •28. Fructus alni
- •29. Fructus anethi graveolentis
- •30. Fructus anisi vulgaris
- •31. Fructus carvi
- •32. Fructus crataegi
- •33. Fructus foeniculi
- •34. Fructus juniperi
- •35. Fructus myrtilli
- •36. Fructus padi
- •37. Fructus rhamni catharticae
- •38. Fructus rozae
- •39. Fructus sorbi
- •40. Fructus viburni
- •41. Gemmae betulae
- •42. Gemmae pini
- •43. Herba adonidis vernalis
- •44. Herba artemisiae absinthii
- •45. Herba bidentis
- •46. Herba bursae pastoris
- •47. Herba chelidonii
- •48. Herba centaurii
- •49. Herba convallariae
- •50. Herba equiseti arvensis
- •51. Herba gnaphalii uliginosi
- •52. Herba hyperici
- •53. Herba millefolii
- •54. Herba leonuri
- •55. Herba origani
- •56. Herba polygoni avicularis
- •57. Herba polygoni hydropiperis
- •58. Herba polygoni persicariae
- •59. Herba thermopsidis lanceolatae
- •60. Herba serpylli
- •61. Herba thymi vulgaris
- •62. Herba violae
- •63. Inonotus obliquus
- •64. Radices althaeae
- •65. Radices araliae mandshuricae
- •66. Radices ginseng
- •67. Radicus ononidis
- •68. Radices rhei
- •69. Radices taraxaci
- •70. Rhizomata bergeniae
- •71. Rhizomata bistortae
- •72. Rhizomata calami
- •73. Rhizomata et radices inulae
- •74. Rhizomata cum radicibus polemonii
- •75. Rhizomata et radices rhodiolae roseae
- •76. Rhizomata ет radices rubiae
- •77. Rhizomata cum radicibus valerianae
- •78. Semina cucurbitae
- •79. Semina lini
- •80. Semina schisandrae
- •81. Strobili piceae abietis
- •82. Styli cum stigmatis zeae maydis
- •83. Thalli laminariae
4. Определение содержания рибофлавина (витамина в2)
Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, взбалтывают в горячей воде при подогревании на водяной бане, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл, охлаждают, доводят объем раствора водой до метки и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго разведения с таким расчетом, чтобы содержание в нем рибофлавина было около 0,0004 мг в 1 мл. В кюветы флуориметра помещают: в одну - 10 мл испытуемого раствора, в другую - 10 мл раствора рабочего стандартного образца рибофлавина и измеряют флюоресценцию при длине волны около 440 нм. Параллельно в другие кюветы помещают: в одну - 10 мл испытуемого раствора и в другую - 10 мл раствора рабочего стандартного образца рибофлавина, в каждую прибавляют по 0,1 г натрия гидрокарбоната и натрия гидросульфита, перемешивают и измеряют флюоресценцию растворов.
Установку проводят по раствору рабочего стандартного образца рибофлавина.
Содержание C17H2ОN4О6 (рибофлавина) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:
(А - А1) х 0,0004 х 500 х V3 х б
Х = -------------------------------- =
(В - В1) х а х V2 х 1000
(А - A1) х V3 х б
= --------------------------
(В - В1) х а х V2 х 5000
где А - показание флуориметра испытуемого раствора; А1 - то же после гашения флюоресценции; В - показание флуориметра раствора рабочего стандартного образца рибофлавина; В1 - то же после гашения флюоресценции; 500; V2 и V3 - разведения в миллилитрах; 0,0004 - содержание рибофлавина в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.
Примечание. Приготовление раствора рабочего стандартного образца рибофлавина: 0,0400 г рибофлавина, предварительно высушенного при температуре от 100 до 105 град. С в течение 2 ч, растворяют в горячей воде в мерной колбе вместимостью 1 л при подогревании на водяной бане, после охлаждения доводят объем раствора водой до метки (основной раствор). Раствор годен в течение 1 мес при хранении в банке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.
1 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки; 1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,0001 мг рибофлавина.
Раствор годен в день приготовления.
5. Определение содержания
пиридоксина гидрохлорида (витамина B6)
Точную навеску порошка растертых драже, таблеток или количество таблеток, покрытых оболочкой, растертых в порошок, указанных в соответствующих частных статьях, количественно переносят водой в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют; первые 10 мл отбрасывают. Из полученного раствора готовят раствор второго разведения с таким расчетом, чтобы содержание в нем пиридоксина гидрохлорида было около 0,01 мг в 1 мл; 5 мл полученного раствора переносят в делительную воронку вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл фосфатного буферного раствора (0,2 моль/л), 1 мл 0,1% раствора диэтил-п-фенилендиамина сульфата, перемешивают, прибавляют 10 мл этилацетата, 2 мл 1% раствора калия феррицианида и немедленно тщательно перемешивают. Дают слоям разделиться, нижний водный слой сливают в колбу и оставляют для повторного извлечения, верхний этилацетатный слой фильтруют через сухой бумажный фильтр, на который помещено около 8 г безводного натрия сульфата, в мерную колбу вместимостью 25 мл. Нижний водный слой повторно извлекают 10 мл этилацетата, фильтруют, фильтр промывают этилацетатом, присоединяют его к первому извлечению в мерной колбе и доводят объем раствора этилацетатом до метки. Измеряют оптическую плотность полученного раствора синего цвета на спектрофотометре или фотоэлектроколориметре при длине волны 600 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют этилацетат.
Параллельно проводят опыт с раствором рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида. Для этого 5 мл раствора рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида помещают в делительную воронку и далее поступают так, как описано выше.
Содержание С8Н11NО3 х НСl (пиридоксина гидрохлорида) в одном драже или одной таблетке в граммах (X) вычисляют по формуле:
D1 х 0,01 х 100 х V3 х б D1 х V3 х б
Х = -------------------------- = --------------------,
D0 х а х V2 х 1000 D0 х а х V2 х 1000
где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора; D0 - оптическая плотность раствора рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида; 0,01 - содержание пиридоксина гидрохлорида в 1 мл раствора рабочего стандартного образца в миллиграммах; 100, V2 и V3 - разведения в миллилитрах; а - навеска препарата в граммах или количество таблеток, покрытых оболочкой; б - средняя масса одного драже или одной таблетки в граммах; 1000 - пересчет в граммы.
Примечания. 1. Приготовление раствора рабочего стандартного образца пиридоксина гидрохлорида: 0,0500 г пиридоксина гидрохлорида растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250 мл и доводят объем раствора водой до метки (основной раствор). Раствор годен в течение месяца при хранении в склянке оранжевого стекла с притертой пробкой при температуре от 5 до 10 град. С.
5 мл основного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки.
1 мл раствора рабочего стандартного образца содержит 0,01 мг пиридоксина гидрохлорида.
Раствор годен в день приготовления.
2. Приготовление фосфатного буферного раствора (0,2 моль/л) рН 6,9 - 7,1:
1) 71,64 г натрия фосфата двузамещенного (Na2HPO х 12Н2О) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки;
2) 27,22 г калия фосфата однозамещенного (КН2РО4) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объем раствора водой до метки;
3) 150 мл раствора натрия фосфата двузамещенного смешивают со 100 мл раствора калия фосфата однозамещенного.
рН полученного раствора 6,9-7,1 (потенциометрически).
Раствор годен в течение 5 сут при хранении при температуре от 5 до 10 град. С.
3. Приготовление раствора сульфата диэтил - п - фенилендиамина: 0,1 г сульфата диэтил - п - фенилендиамина (ч. д. а. или ч.) растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
Раствор готовят непосредственно перед употреблением.