5.2. Микроскопическое исследование нативных препаратов мокроты.

Принцип метода: микроскопическое исследование состоит из изучения нативных и окрашенных препаратов. Полноценность исследования мокроты целиком зависит от правильного приготовления и количества просмотренных препаратов.

Ход исследования

Мокроту, помещенную в чашку Петри, рассматривают на черном и белом фоне. Узким шпателем и иглой выбирают различные составные части мокроты (комочки гноя, слизи, крови, тканевые клочки). Необходимо также брать для исследования все частицы, отличающиеся формой, окраской, плотностью от фона мокроты. Отобранный материал помещают на предметное стекло и накрывают покровным. Количество материала, взятого для одного препарата, должно быть таково, чтобы мокрота не выходила за пределы покровного стекла. Если мокрота имеет вязкую или тягучую консистенцию, то на покровное стекло слегка надавливают, чтобы материал распределился равномерно тонким слоем.

Препараты сначала просматривают под малым увеличением (объектив 8, окуляр 7), затем под большим (объектив 40, окуляр 7) увеличением микроскопа. Просмотр под малым увеличением дает ориентировочное представление о качестве выбранного материала, о количестве тех или иных клеток и других образований, позволяет быстрее обнаружить элементы, встречающиеся в мокроте в небольшом количестве (эластические волокна, спирали Куршмана, комплексы опухолевых клеток и др.). Просмотр с большим увеличением необходим для детального исследования материала. Следует учитывать, что элементы в мокроте распределяются всегда неравномерно, поэтому необходимо тщательное исследование серии препаратов. Если при исследовании нативного препарата возникает необходимость в его окраске, то под контролем микроскопа покровное стекло снимают, перемещая в одну сторону, а предметное стекло — в другую, и отмечают стеклографом на обратной стороне препарата интересующий уча­сток. Затем препарат высушивают и окрашивают.

Элементы мокроты, которые обнаруживаются в нативном препарате, можно разделить на три основные группы: клеточные, волокнистые и кристаллические.

1.Клеточные элементы.

При большом увеличении обнаруживаются клетки плоского эпителия, которые попадают в мокроту из полости рта и не имеют диагностического значения.

Цилиндрический мерцательный эпителий – эпителий слизистой оболочки бронхов и трахеи – в виде удлиненных, цилиндрических или веретенообразных клеток с острым вытянутым концом и овальным ядром, расположенным эксцентрично ближе к базальной части клетки. На расширенном конце клетки, видны реснички, которые в свежей мокроте могут двигаться. Основное назначение цилиндрических клеток – удалять из дыхательных путей инородные частицы, принимать участие в согревании и увлажнении воздуха. Обнаруживаются в большом количестве при бронхиальной астме и остром бронхите, новообразованиях легкого.

Клетки плоского эпителия попадают в мокроту со слизистой полости рта. Единичные клетки встречаются всегда, но большое количество клеток плоского эпителия говорит о неправильном сборе материала для исследования и примеси в нем слюны.

Альвеолярные макрофаги – крупные клетки (до 20-25 мкм), имеют эксцентрично расположенное ядро, вакуолизированную цитоплазму с различными включениями. Имеют котномозговое происхождение, активно перемещаются по дыхательным путям, обладают высокой фагоцитарной активностью, имеют высокую активность метаболизма, вырабатывают большое количество гидролитических ферментов. Эти клетки распознают и фагоцитируют инородные частицы, их очень много у курильщиков. При воспалительных процессах альвеолярные макрофаги активно взаимодействуют с лимфоцитами, которые продуцируют хемокины, привлекающие в очаг воспаления нейтрофильные лейкоциты или эозинофилы. Встречаются в норме и в большом количестве при бронхитах, пневмониях и профессиональных заболеваниях легких.

Нейтрофильные лейкоциты – круглые клетки с плохо различимым ядром и однородной обильной зернистостью. Всегда содержатся в мокроте в большем или меньшем количестве. В слизистой мокроте их обычно единицы, а в гнойной – сплошь покрывают поле зрения.

Эозинофилы можно выделить в нативном препарате по желтой окраске и отчетливой крупной зернистости. Единичные, могут встречаться в нормальной мокроте, в большом количестве при бронхиальной астме, гельминтах, эхинококке легкого, при раке легкого.

Эритроциты – имеют вид дисков желтоватого цвета, меньше лейкоцита, не имеющих зернистости в цитоплазме. Единичные эритроциты могут встречаться в любой мокроте. В большом количестве обнаруживаются в кровянистой мокроте при застое, инфаркте легкого, легочном кровотечении, туберкулезе и др.

Пылевые клетки с фагоцитированными частицами пыли, угля, встречаются у людей с профессиональными заболеваниями легких.

Сидерофаги - это разновидность альвеолярных макрофагов, содержащих гемосидерин и золотисто-желтые включения. Обнаруживаются в мокроте при застойных явлениях в легком, инфаркте легкого при кровоизлияниях.

Опухолевые клетки попадают в мокроту при распаде опухоли в бронхах. Эти клетки крупные, атипичного строения с несколькими ядрами, вакуолизированной цитоплазмой.

2.Волокнистые образования.

Представлены в мокроте в основном эластическими волокнами и спиралями Куршмана.

Эластические волокна имеют вид извитых, блестящих, тонких, двухконтурных волокон, равномерной толщины, складывающихся пучками. Они появляются в мокроте при распаде легочной ткани и обнаруживаются при деструктивных процессах в легком: туберкулезе, раке, абсцессе легкого. При кавернозном туберкулезе из-за отложения жирных кислот и мыл они становятся грубыми, толстыми, с неровными контурами и бугристыми утолщениями, за что и получили название коралловидных. Обнаруживаются редко. Обызвествленные эластические волокна – грубые, толстые, палочковидные образования, обнаруживают при распаде первичного туберкулезного очага. Элементы распада первичного туберкулезного очага называют тетрадой Эрлиха, которая включает:

- обызвествленные эластические волокна;

- аморфные соли извести;

- обызвествленный казеозный детрит;

- микобактерии туберкулеза.

Спирали Куршмана представляют собой уплотненные слизистые образования в виде тяжей с центральной плотной осевой нитью, спиралевидно извитые, иногда видимые макроскопически. По периферии слизь лежит более свободно и образует так называемую мантию. Величина спиралей может быть различной. Спирали образуются в результате спазма или здавления бронхов. Они встречаются чаще всего при бронхиальной астме или раке легкого.

3.Кристаллические образования

Кристаллы Шарко-Лейдена, имеют вид блестящих бесцветных октаэдров различной величины, напоминающих стрелку магнитного компаса. Кристаллы Шарко-Лейдена образуются из белка распавшихся эозинофилов. Свежая мокрота часто их не содержит, они появляются спустя 24 часа. Часто бывают в мокроте при бронхиальной астме, а также при глистных поражениях легких.

Кристаллы гематоидина в виде игольчатых или ромбических образований золотисто-желтого или буро-желтого цвета, образуются вследствие распада гемоглобина при обширных кровоизлияниях, некрозе легочной ткани (гангрена, абсцесс легких).

Кристаллы холестерина имеют вид бесцветных табличек четырехугольной формы с обломанным углом в виде ступенек, образуются при распаде жироперерожденных клеток. Встречаются при туберкулезе, новообразованиях, абсцессе легкого, эхинококкозе.