- •По клинической лабораторной диагностике
- •По клинической лабораторной диагностике
- •Раздел 1. Организация лабораторной службы. Тема: Организационная структура клинико-диагностической лаборатории.
- •5.1.Организация лабораторной службы.
- •5.2. Приказы и постановления мз рб и нормативных документов, регулирующих деятельность клинической лабораторной службы.
- •Раздел 2. Общеклинические лабораторные исследования. Тема: Исследование физических и химических свойств мочи, микроскопия мочевого осадка.
- •5.1. Исследование физических свойств мочи.
- •5.2. Определение белка в моче
- •5.3. Определение глюкозы в моче.
- •5.4. Определение кетоновых тел в моче.
- •5.5.Определение билирубина в моче(проба Розина).
- •5.6. Качественное определение уробилиновых тел (реакция Флоранса).
- •5.7. Микроскопическое исследование мочи
- •Тема: Исследование мокроты, цереброспинальной жидкости, транссудатов и экссудатов.
- •5.1. Физические свойства мокроты.
- •5.2. Микроскопическое исследование нативных препаратов мокроты.
- •5.3. Исследование окрашенных препаратов мокроты.
- •5.4.Определение физических свойств ликвора
- •5.5.Определение химических свойств ликвора
- •6. Исследование транссудатов и экссудатов
- •Раздел 3. Лабораторные исследования периферической крови. Тема: Общий клинический анализ крови.
- •5.1.Определение концентрации гемоглобина гемиглобинцианидным методом.
- •5.2. Подсчет количества эритроцитов периферической крови.
- •5.3. Определение цветового показателя.
- •5.4. Определение количества лейкоцитов.
- •Тема: Костно-мозговое кроветворение. Морфология клеток крови.
- •5.1. Микроскопическое исследование клеток периферической крови.
- •Раздел 4. Лабораторные исследования системы иммунитета. Тема: Иммунологические лабораторные исследования.
- •5.1. Подготовка биологического материала для иммунологического исследования.
- •Определение количества т-лимфоцитов в реакции розеткообразования с эритроцитами барана (е-рок)
- •5.3. Определение количества в-лимфоцитов методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами мыши.
- •5.4.Оценка фагоцитарной активности нейтрофилов по поглощению зимозана.
- •5.5. Определение базальной и стимулированной метаболической активности нейтрофилов в реакции восстановления нитросинего тетразолия (нст-тест ).
- •Раздел 5. Лабораторные исследования системы гемостаза. Тема: Исследование первичного гемостаза.
- •5.1. Определение длительности кровотечения по Дюке.
- •5.2. Подсчет количества тромбоцитов.
- •Тема: Лабораторная оценка коагуляционного гемостаза.
- •5.1. Определение времени свертывания крови по Ли-Уайту.
- •5.2. Определение ачтв (активированного частичного тромбопластинового времени), кефалин-каолинового времени плазмы.
- •5.3. Протромбиновое время (пв), протромбиновый индекс (пи), протромбиновое отношение (по), международное нормализованное отношение (мно).
- •5.4. Тромбиновое время.
- •5.5. Определение концентрации фибриногена а в плазме.
- •5.6. Определение фибриногена в.
- •5.7. Этаноловый тест.
- •Раздел 6. Биохимические исследования сыворотки крови.
- •5.1. Определение общего белка в сыворотке (плазме) крови биуретовым методом (Кингслея—Вейксельбаума)
- •5.2.Определение содержания альбумина в сыворотке (плазме) крови по реакции с бромкрезоловым зеленым
- •5.3. Определение мочевины в сыворотке крови и моче ферментативным методом
- •5.4. Определение креатинина в сыворотке крови и моче по цветной реакции Яффе (метод Поппера и соавт.)
- •5.5. Кинетический вариант определения креатинина
- •5.1. Колориметрический динитрофенилгидразиновый метод исследования активности аминотрансфераз в сыворотке крови (по Райтману, Френкелю)
- •5.2. Кинетический метод определения активности АсАт
- •5.3. Кинетический метод определения активности АлАт
- •5.4. Определение активности щелочной фосфатазы
- •5.5.Определение активности а-амилазы методом Каравея (микрометод).
- •Тема: Лабораторные исследования углеводного обмена и липидов.
- •5.1. Определение общих липидов в сыворотке крови по цветной реакции с сульфофосфованилиновым реактивом.
- •5.2. Определение общего холестерина сыворотки крови, основанный на реакции Либермана—Бурхардта (метод Илька).
- •5.3. Определение уровня холестерина липопротеинов высокой плотности (α-холестерина).
- •5.4. Определение уровня триглицеридов.
- •5.5.Определение содержания глюкозы ферментативным методом
- •5.1. Определение содержания билирубина колориметрическим диазометодом Йендрашика—Клеггорна—Грофа
- •Раздел 7. Аналитическая надежность и контроль качества клинических лабораторных исследований. Тема: Внутрилабораторный контроль качества.
- •5.1. Внутрилабораторный контроль качества воспроизводимости результатов.
- •Тема: Коллоквиум. Составление аналитического лабораторного заключения.
- •Общие положения
- •Меры предосторожности при оказании медицинской помощи, обслуживании больных, работе с биоматериалом.
- •Мероприятия при ранениях, контактах с кровью, другими биологическими материалами пациентов.
- •Регистрация аварий и наблюдение за пострадавшими
- •Кирпиченок Людмила Николаевна,Скребло Елена Иосифовна, Шилин Владимир Евгеньевич, Тихон Татьяна Владимировна
- •Практикум по клинической лабораторной
- •Диагностике
- •Учебно-методическое пособие
5.4. Определение кетоновых тел в моче.
Принцип метода: кетоновые тела в щелочной среде образуют соединение с нитропруссидом натрия, имеющее красную или фиолетовую окраску. При этом надо учитывать, что некоторые нормальные составные части мочи, в частности креатинин, также реагируют с нитропруссидом натрия. Чтобы отличить окраску, зависящую от кетоновых тел, от окраски, которую дает креатинин, используют химически чистую ледяную уксусную кислоту. Уксусная кислота разрушает окраску, обусловленную креатинином, но сохраняет и даже усиливает окраску, зависящую от кетоновых тел.
Кетоновые тела (ацетон, β-оксимасляная и ацетоуксусная кислоты) определяют по назначению врача у больных сахарным диабетом, при тиреотоксикозе, при субарахноидальных кровоизлияниях, при токсической диспепсии, дизентерии, при длительном голодании.
Реактив:
1 г нитропруссида натрия, 20 г сульфата аммония и 20 г безводного карбоната натрия помещают в ступку и тщательно растирают до получения мелкого однородного порошка; реактив стоек до 10 лет при хранении в тщательно закрытой стеклянной темной посуде.
Ход определения:
На предметное стекло, помещенное на белый лист бумаги, наносят щепотку реактива Лестраде, к которому добавляют 2—3 капли исследуемой мочи. При наличии кетоновых тел наиболее интенсивное окрашивание наступает в течение 1—3 мин. В зависимости от степени окраски проба бывает:
а) слабоположительной (+) — слабо-розовое окрашивание, появляющееся через 2—3 мин;
б) положительной (++) — отчетливая фиолетовая окраска, появляющаяся через 1—2 мин;
в) резко положительной (+++) — фиолетовая (вишневая) окраска, которая появляется сразу же после нанесения мочи и через 1—2 мин становится более интенсивной;
г) отрицательной (-) — цвет смеси не изменяется.
Исследование также может быть выполнено с помощью готового набора реактивов для экспресс-определения кетоновых тел в моче. Исследование проводят следующим образом: таблетку (содержит в своем составе нитропруссид натрия, сернокислый аммоний и безводный карбонат натрия) располагают на кусочке белой фильтровальной бумаги, находящейся на предметном стекле. Поверхность таблетки увлажняют 2—3 каплями исследуемой мочи, через 1—3 мин сравнивают окраску таблетированного реактива с цветной шкалой, приложенной к набору.
Таблетируемым реактивом можно пользоваться только в пределах указанного на этикетке срока годности.
Кетоновые тела можно определять при помощи диагностических полосок. В бланке анализа обычно отмечают: «Кетоновые тела обнаружены» или «Кетоновые тела не обнаружены».
Клиническое значение.
Наиболее частая причина кетонурии – декомпенсация сахарного диабета. У больных сахарным диабетом мониторинг кетонурии используется для контроля правильности подбора пищевого режима. Кроме сахарного диабета причиной кетонурии могут быть: длительное голодание, тяжелая лихорадка, алкогольная интоксикация.
5.5.Определение билирубина в моче(проба Розина).
Определение билирубина в моче производят по назначению врача. Лаборант обязан определить билирубин и без назначения врача, если моча имеет зеленовато-желтый, желтый, желтушный цвет и при окрашивании пены в желтый цвет при взбалтывании мочи.
Принцип метода: билирубин под влиянием окислителя превращается в изумрудно-зеленый биливердин.
Реактив:
Спиртовой раствор йода (10 г/л): 1 г кристаллического йода растворяют в цилиндре вместимостью 100 мл в 20—30 мл 96° спирта-ректификата, а затем доливают спиртом до метки.
Ход исследования:
В химическую пробирку наливают 4—5 мл исследуемой мочи и осторожно наслаивают на нее спиртовой раствор йода (если моча имеет низкую относительную плотность, то следует наслаивать ее на спиртовой раствор йода). При наличии билирубина на границе между жидкостями образуется зеленое кольцо (при приеме антипирина, а также при содержании в моче кровяного пигмента проба оказывается положительной). У здорового человека эта проба отрицательна.
Клиническое значение.
В норме билирубин в моче отсутствует. Определение билирубина в моче используют как экспресс-метод для дифференциальной диагностики желтух. Билирубинурию наблюдают главным образом при поражении паренхимы печени (паренхиматозные желтухи) и нарушении оттока желчи (обтурационные желтухи). Для гемолитической желтухи билирубинурия нехарактерна, так как непрямой билирубин не проходит через почечный фильтр.