- •Введение
- •Глава 1. Структура и функции системы иммунитета
- •Виды иммунитета
- •Цитокины и интерлейкины
- •Поверхностные лейкоцитарные антигены и рецепторы
- •Наоборот, активация посредством tlr-4 ведет к образованию Тх1 и продукции провоспалительных цитокинов (ил-1, 2, 12, всех типов интерферонов, фно альфа).
- •Гуморальные факторы врожденного иммунитета
- •Клетки естественного врожденного иммунитета
- •Лимфоидная система
- •Иммуноглобулины и антитела
- •Т-лимфоциты
- •Глава 2. Антигены. Динамика иммунного ответа Антигены
- •Динамика иммунного ответа
- •Глава 3. Иммунитет и инфекции
- •Противобактериальный иммунитет
- •Факторы естественного иммунитета служат первым этапом защиты, а затем они включают механизмы адаптивного (приобретенного) иммунитета.
- •Противовирусный иммунитет
- •Врожденная резистентность и иммунитет к вирусам
- •Противопаразитарный и противогрибковый иммунитет
- •Глава 4. Виды иммунопатологии
- •Существуют следующие группы вредных иммунотропных веществ:
- •Иммунодефицитные болезни
- •Вторичные иммунодефициты
- •Аллергия и аутоиммунные заболевания
- •При первом контакте с антигеном – будущим аллергеном, развивается обычная иммунная реакция.
- •Реакции, развивающиеся через 4-12 часов после контакта с аллергеном, называют отсроченными, "поздними".
- •I тип реакций. Анафилактические реакции (реагиновые, IgE- зависимые).
- •Хотя IgE- механизм развития атопических реакций считается основным, возможно участие в нем антител класса IgG, особенно IgG4 субкласса.
- •Трансплантационный иммунитет
- •Противоопухолевый иммунитет
- •Глава 5. Иммунодиагностика. Оценка иммунного статуса
- •Иммунный статус – это состояние си здорового или больного в определенный момент онтогенеза при конкретных условиях окружающей среды.
- •Уровень секреторного IgA в слюне составляет 0,03-0,4 г/л.
- •Специфические показатели иммунного статуса
- •Реакцию преципитации можно проводить в жидкой и плотной среде – (в агаре или геле).
- •Реакция преципитации в жидкой среде (кольцепреципитация).
- •Реакция преципитации в агаре.
- •Эти методы высокочувствительны. В качестве метки антигенов или антител применяют флюоресцентные красители, радиоактивные изотопы, ферменты и др. Иммунофлюоресцентные методы
- •Радиоиммунологический анализ.
- •Глава 6. Иммунотерапия и иммунопрофилактика
- •С целью иммунотерапии вакцины используют при хронических затяжных инфекциях (убитые стафилококковая, гонококковая, бруцеллёзная вакцины).
- •Серотерапия. Иммунные антисыворотки и иммуноглобулины
- •IV. Природные, синтетические, генно-инженерные препараты: Микроэлементы и витамины, особенно при их недостатке в организме, компенсируют возникшие при этом иммунодефициты.
Радиоиммунологический анализ.
Принцип радиоиммунологического анализа (РИА) основан на выявлении комплекса АГ-АТ, в котором один из иммунореагентов был мечен радиоактивным изотопом. Обычно используют изотопы йода (125I или131I). Учет реакции проводят по убыванию или по возрастанию радиоактивности (в зависимости от методики РИА) с помощью специальных счетчиков- или-излучения. Метод высокочувствителен, но постепенно вытесняется иммуноферментным анализом, учитывая небезопасность работы с радиоактивными изотопами и необходимость в сложном регистрирующем оборудовании.
Однако там, где в качестве АГ выступает низкомолекулярный гаптен (например, лекарственные препараты, стероидные и пептидные гормоны и др.) РИА используется весьма широко. Существуют его гетерогенные варианты, аналогичные ИФА, а также конкурентные варианты.
В последнем случае на твердую фазу (например, полистироловые шарики) сорбируют известные АТ в комплексе с радиоактивно меченым АГ (например, лекарственным препаратом) в известной концентрации. К этому комплексу добавляют исследуемый материал, содержащий неизвестную концентрацию изучаемого лекарственного препарата-АГ. Он вытесняет из комплекса меченый АГ пропорционально своей концентрации. Радиоактивность вытесненного АГ измеряют с помощью счетчика и определяют концентрацию неизвестного АГ.
Клеточные методы оценки иммунитета
Реакция бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ).
Переход малых лимфоцитов в бластные формы, способные к пролиферации и дальнейшей дифференцировке называется бласттрансформацией и сопровождается морфологическими изменениями лимфоцитов. Бласты – крупные, округлой формы клетки имеют большое ядро, занимающее большую часть цитоплазмы. В ядре содержится несколько крупных базофильных ядрышек, цитоплазма бластов зернистая. Одна бластная клетка может дать клон из 16-32 и даже 64 клеток, обладающих более высокой иммунокомпетентностью, чем исходный лимфоцит. Бласттрансформация лимфоцитов может быть вызвана специфическими антигенами и неспецифическими стимуляторами (митогенами). К бактериальным митогенам относятся полисахариды грамотрицательных бактерий, туберкулин микобактерий и др.
Способностью вызывать бласттрансформацию лимфоцитов обладают отдельные продукты животного (иммуноглобулин, выделенный из гетерологичной иммунной сыворотки) и растительного (фитогемагглютинин – ФГА) происхождения.
При постановке РБТЛ кровь или выделенные из нее лейкоциты вносят в среду RPMIили Игла, затем добавляют антиген или митоген. Учет реакции после внесения митогенов проводят через 2-4 суток, а после стимуляции антигенами через 3-5 суток. Неспецифический митоген ФГА трансформирует в бласты 30-50%, а ЛПС – до 30% лимфоцитов крови человека. Под влиянием специфических антигенов в бласты трансформируются не более 5-10% малых лимфоцитов.
Результаты РБТЛ можно учитывать морфологически – прямым подсчетом бластов на окрашенных препаратах под микроскопом или радиометрическим методом, измеряя уровень включения в ДНК лимфоцитов тимидина, меченного тритием.
Реакция подавления миграции лейкоцитов (РПМЛ).
Сущность ее в том, что в присутствии антигенов лимфоциты выделяют цитокины (лимфокины), в частности, фактор, подавляющий миграцию нейтрофилов и макрофагов. К взвеси лейкоцитов добавляют антиген и заполняют ею капиллярные трубочки (контроль – без антигена или посторонний антиген). Эти капилляры помещают в камеры или лунки, заполненные питательной средой. После инкубации при 370С 18 часов измеряют зону миграции клеток из капилляров или подсчитывают их количество в лунке. Если есть иммунные клетки (т.е. организм сенсибилизирован к антигену), то миграция лейкоцитов подавляется.
Кожные пробы и другие провокационные тесты
Для определения гиперчувствительности (аллергии) к антигенам-аллергенам у людей проводят провокационные тесты.Суть их в том, что соответствующий аллерген вводят в организм перорально, ингаляционно, наносят на кожу при ее скарификации или вводят внутрикожно. Обычно, спустя 30 минут оценивают немедленные аллергические реакции (ПЧНТ), а через 24-48 час – замедленные (ПЧЗТ).
На пыльцевые, пищевые, лекарственные аллергены чаще наблюдаются немедленные кожные реакции в виде покраснения и припухлости. Замедленные реакции развиваются на бактериальные антигены. Пробу Манту ставят для выявления сенсибилизации к микобактериям туберкулеза (оценка вакцинации и инфицированности). Туберкулин РРDвводят внутрикожно и при положительной реакции через 24-48 час в месте инъекции возникает воспалительная реакция. Она указывает на наличие сенсибилизации к этому антигену. Сильная реакция, или, наоборот, ее отсутствие (анергия) может быть при туберкулезе.
Кожные пробы могут использоваться для выявления иммунодефицитов и оценки резистентности к конкретной инфекции. Большинство людей встречались в течение жизни с антигенами распространенных условно-патогенных бактерий и в норме имеют к ним сенсибилизацию. При постановке внутрикожных проб с аллергенами стафилококка, стрептококка, кишечной палочки, протея, микобактерий туберкулеза (туберкулин) и другими, реакция должна быть положительной хотя бы на один из них. Отсутствие реакции может указывать на иммунодефицит.