31. Серологическая диагностика. Титр антител. Принципы изучения качественной и количественной сероконверсии.

Серологические реакции являются важным инструментом для выявления причины инфекционного заболевания. Серодиагностика — специфический анализ крови, который основан на взаимодействии антигенов и антител в сыворотке.

Антитела представляют собой белковые молекулы, образующиеся в организме человека через несколько дней после контакта с патогеном. Они являются строго специфичными для каждой инфекции и вырабатываются для уничтожения возбудителя. Распознавание этих белковых фракций позволяет быстро выявить и микроорганизм, к которому они образовались. Антигены же представляют собой чужеродные белки, содержащиеся в бактериях. Синтезированное антитело находит в крови антиген и прочно связывается с ним, не позволяя ему губительно влиять на организм.

Титр антител — предельное разведение сыворотки крови, при котором могут быть обнаружены антитела. Позволяет оценить количество и разнообразие антител в крови человека и коррелирующую с ними силу иммунного ответа организма. Для измерения титра антител используется иммуноферментный анализ (ИФА) — наиболее доступный метод диагностики.

Сероконверсия – это процесс и период, который характеризуется выработкой иммунитетом антител для борьбы с потенциальной угрозой, попавшей в организм извне. В большинстве случаев этой угрозой является вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) или вакцины, применяемые для защиты от разновидностей вирусных гепатитов. Причем в случае с ВИЧ сероконверсия является признаком инфицированная организма, а в случае вакцинации выработка антител иммунитетом служит критерием эффективности введенного препарата.

Принципы серодианостики: 1) Определение количества (титра) АТ в сыворотке крови пациента. Титр АТ соответствует максимальному разведению сыворотки пациента, в котором реакция еще положительная; 2) Титр АТ пациента сравнить с диагностическим титром; 3) Изучение изменений титра АТ в динамике ( в парных сыворотках); 4) Определение титра АТ разных классов иммуноглобулинов;

Для визуализации результатов применяют различные МЕТКИ, которые прикрепляют к АГ или АТ , а затем следят за меченным реагентом: - флюрохромная метка для РИФ (реакция иммунофлюоресценции); - ферментная метка для ИФА (иммуно-ферментный анализ); - радиоизотопная метка для РИА (радио-иммунологический метод);

32. Нормальная микробиота человека: постоянная и транзиторная, облигатная и факультативная. Механизмы формирования микробиоты. Значение нормальной микробиоты в жизнедеятельности организма человека. Микробиота и патология.

Нормальная микрофлора представляет собой совокупность множества микробиоценозов  (сообществ микроорганизмов), характеризующихся определенным составом и занимающих тот или иной биотоп (кожу и слизистые оболочки) в организме человека и животных, сообщающийся с окружающей средой. Организм человека и его микрофлора находятся в состоянии динамического равновесия (эубиоза) и являются единой экологической системой.

Разновидности микрофлоры:

1. Постоянная – микроорганизмы, постоянно присутствующие в макроорганизме: а) облигатная - у всех людей (бифидо- и лактобактерии); б) факультативная – у части людей в популяции (стафилакокки;

2. Непостоянная (транзиторная) – микробы, которые могут обнаруживаться в местах присутствия постоянной микрофлоры при определенных условиях и ограниченное время.

Механизмы формирования микробиоты. В течение развития плод человека находится в внутриутробного стерильных условиях. Впервые ребенок встречается с микроорганизма оболочками ми во время родов, соприкасаясь со слизистыми родовых путей матери. Микрофлора матери попадает на кожу, слизистые оболочки, в полость рта, а затем и в кишечник новорожденного. В процессе родов и сразу после них новорожденный ребенок контактирует с медицинским персоналом и микроорганизмами, с окружающей среды, а затем повторно с матерью во время грудного новорожденного кормления. Микробная колонизация организма осуществляется из двух источников: это родовой канал и кожа матери, и факторы окружающей среды. Так как основную роль в формировании микрофлоры новорожденного играет микрофлора матери (ее влагалища, кожи и толстого кишечника), рекомендуется проверять состояние микрофлоры будущей матери во время беременности,при выявлении дисбиоза следует проводить коррекцию микрофлоры пробиотиками. На становление микрофлоры новорожденного оказывают определенное влияние санитарное состояние помещений роддома, количество микробов в воздухе не должно превышать 1500 кOEм3 и контакты с медперсоналом.

ЖКТ. Стабилизация микрофлоры кишечника ребенка не заканчивается в неонатальном периоде и продолжается весь первый год жизни, а иногда более длительный срок. Особенно ответственным и напряженным этапом развития микрофлоры является первое полугодие. Для детей первого года жизни характерны высокие популяционные уровни не только бифидобактерий, энтерококков, непатогенных эшерихий, нои бактерий, которых принято относить к условно-патогенным микроорганизмам. Это – лецитиназоположительные клостридии, коагулагопозитивные стафилококки, дрожжеподобные грибы Candida.

Микрофлора кожи. Микроорганизмы заселяют главным образом участки кожи, покрытые волосами и увлажненные потом. Обычно на коже преобладают грамположительные бактерии. Типичными обитателями кожи являются различные виды Staphylococcus, Micrococcus, Propionibacterium, Corynebacierium, Brevibacicrium, Acinetobacter. Для нормальной микрофлоры кожи характерны такие виды Staphylococcus, как Si. epidermidis, нo не упомянутый St. aureus, развитие которого здесь свидетельствует о неблагоприятных изменениях микрофлоры организма. Представители рода Corynebacterium иногда составляют до 70% всей кожной микрофлоры. Некоторые виды являются липофильными, т. е. образуют липазы, разрушающие выделения жировых желез.

Микрофлора органов дыхания. Помимо обычных негемолитических и зеленящих стрептококков, непатогенных нейссерий, стафилококков и энтеробактерий, в носоглотке можно обнаружить менингококки, пиогенные стрептококки и пневмококки. Верхние отделы дыхательных путей у новорожденных обычно стерильны и колонизируются в течении 2-3 суток. Наиболее часто из дыхательных путей клинически здоровых животных выделяется сапрофитная микрофлора: S. saprophiticus, бактерии родов Micrococcus, Bacillus, коринеформные бактерии, негемолитические стрептококки, грамотрицательные кокки. Кроме того, выделены патогенные и условно-патогенные микроорганизмы: альфа- и бета – гемолитические стрептококки, стафилококки (S. aureus, S. hycus), энтеробактерии (эшерихии, сальмонеллы, протей и др.), пастереллы, Ps. aeruginosa, и в единичных случаях, грибы рода Candida. В носовой полости обнаруживается наибольшее число сапрофитов и условно-патогенных микроорганизмов. Они представлены стрептококками, стафилококками, сарцинами, пастереллами, энтеробактериями, коринеформеными бактериями, грибами рода Candida, Ps. aeruginosa и бацилами. Трахея и бронхи заселены аналогичными группами микроорганизмов. В легких обнаружены отдельные группы кокков (бета- гамолитическими, S. aureus), микрококки, пастереллы, E. coli. При снижении иммунитета у животных (особенно молодняка) микрофлора органов дыхания проявляет бактеритворные свойства.

Мочеполовая система. Микробный биоценоз органов мочеполовой системы более скудный. Верхние отделы мочевыводящих путей обычно стерильны; в нижних отделах доминируют Staphylococcus epidermidis, негемолитические стрептококки, дифтероиды; часто выделяют грибы родов Candida, Toluropsis и Geotrichum. Основной обитатель влагалища – B. vaginale vulgare, обладающая выраженным антогонизмом к другим микробам. При физиологическом состоянии мочеполовых путей микрофлора обнаруживается только в их наружних отделах (стрептококки, молочнокислые бактерии). Матка, яичники, семенники, мочевой пузырь в норме стерильны. У здоровой самки плод в матке стерилен до момента начавшихся родов. При гинекологических заболеваниях нормальная микрофлора изменяется.

Причины, ведущие к нарушениям в составе нормальных биоценозов. Причины нарушения кишечного биоценоза разнообразны. Основными из них являются болезни желудочно - кишечного тракта, неполноценные диеты, перенесенные острые кишечные инфекции, лекарства, включая антибиотики, которые нарушают иммунный статус кишки и ее моторику.

Дисбактериозы. При нарушении динамического равновесия между макроорганизмом и нормальной микрофлорой, под влиянием различных причин, происходят изменения в составе микробиоценозов и постепенно формируется синдром дисбактериоза. Дисбактериоз – это сложный патологический процесс, вызванный нарушением существующих отношений между макро- и микроорганизмами. Он включает в себя, кроме изменений в качественном и количественном составе микрофлоры, также и нарушение функций всей экологической системы.

33. Инфекционный процесс и инфекционное заболевание. Первичная, вторичная (оппортунистическая) инфекции, суперинфекция, реинфекция, рецидив. Экзогенная и эндогенная инфекции. Механизмы передачи возбудителя. Входные ворота инфекции. Механизмы генерализации инфекционного процесса. Понятие о персистенции возбудителя.

Инфекционный процесс- состояние, при котором возбудитель инфекции (патоген) присутствует/размножается в организме хозяина. Инфекционное заболевание (более узкое понятие) – состояние, когда болезнетворные микробы приводят к нарушению нормальных функций макроорганизма.

Первичная инфекция – инфекция, вызванное первичными патогенами у первично здоровых людей.

Вторичная инфекция – инфекция, развившаяся на фоне другого инфекционного заболевания.

Оппортунистическая инфекция – инфекция, вызываемая условно-патогенными вирусами или клеточными организмами у иммунокомпрометированных лиц.

Суперинфекция -  заражение новым инфекционным заболеванием в условиях незавершившегося инфекционного процесса («наслоение» одной инфекции на другую). Реинфекция - повторное заражение организма той же инфекцией после полного клинического и микробиологического выздоровления (гонорея у двух партнеров). Рецидив – возобновление симптомов инфекционной болезни после клинического, а не микробиологического выздоровления (например, незаконченный курс антибиотикотерапии приводит к возобновлению симптомов инфекционного заболевания).

Экзогенная инфекция- инфекция, вызванная возбудителем, поступившим в организм из окружающей среды. Эндогенная инфекция - инфекция, обусловленная активацией уже находящегося в организме облигатно патогенного микроба (напр., микобактерий туберкулеза) или микробами нормальными обитателями тела человека. 

Условия возникновения инфекции:

1.Патоген (количество);

2. Хозяин (восприимчивость к возбудителю);

3. Благоприятные условия среды;

Только при наличии всех трех условий возможно возникновение инфекционного заболевания. Механизмы передачи возбудителя - эволюционно выработанный способ перемещения возбудителя из одного организма в другой, обеспечивающий ему выживание как биологическому виду. Путь – конкретные элементы окружающей среды и их сочетание, которые способны обеспечить перенос возбудителя из одного организма в другой в конкретных условиях среды.

Механизмы:	Пути:
Фекально-оральный	1.Водный 2.Пищевой 3.Бытовой
Аэрогенный	1.Воздушно-капельный (пневмония , грипп) 2.Воздушно- пылевой ( туберкулез)
Контактный	1.Прямой 2.Непрямой (полотенце, гонорея)
Трансплацентарный (вертикальный (ВИЧ, гепатиты)	Вертикальный ( ВИС, гепатит В и С)
Трансмиссивный	1.Естественный - через кровососущих переносчиков ( сыпной тиф) 2.Искусственный (артифициальный) – через мед процедуры и через иглы наркоманов и татуировки

Входные ворота инфекции – место первичного внедрения возбудителя в организм хозяина. Механизмы генерализации: 1.Бактериемия – присутствие бактерии в крови; 2.Септициемия – присутствие и размножение бактерии в крови; 3.Вирусемия – присутствие вируса в крови; 4.Токсемия – присутствие бактериального токсина в крови;

Персистенция – длительное пребывание микроорганизма в организме хозяина без развития заболевания (способ выживания микроба).

34. Экология как основа учения о болезнетворности микроорганизмов. Патогенные, условнопатогенные и непатогенные микроорганизмы. Понятие об оппортунистических инфекциях. Антропонозы, зоонозы, сапронозы (примеры инфекций). Понятие об инфекциях, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП). Физиологические особенности госпитальных штаммов бактерий.

Экология как основа учения о болезнетворности микроорганизмов. Микроорганизмы распространен повсюду  Они заселяют почву, воду, воздух, растения, организмы животных и людей. Выделяют свободноживущие и паразитические микроорганизмы. Всюду, где есть хоть какие - то источники энергии, углерода, азота, кислорода и водорода (кирпичиков всего живого), обязательно встречаются микроорганизмы, различающиеся по своим физиологическим потребностям и занимающих свои экологические ниши. Титаническая роль микроорганизмов в круговороте веществ в природе имеет исключительное значение для поддержания динамического равновесия биосферы.

Патогенные – возбудители, которые вызывают заболевание всегда.

Условно-патогенные – возбудители, вызывающие заболевание при определенных условиях.

Непатогенные микроорганизмы – микроорганизмы, которые никогда не вызывают заболевания у людей.

Оппортунистические инфекции – инфекция, вызываемая условно-патогенными вирусами или клеточными организмами у иммунокомпрометированных лиц.

Антропонозы – группа инфекционных и паразитарных заболеваний, возбудители которых способны паразитировать в естественных условиях только в организме человека (корь, краснуха). Зоонозы – группа инфекционных и паразитарных заболеваний, вызванных патогенном, перешедшим от определённого вида животного к человеку (естественный резервуар - это животное): чума, сибирская язва. Сапронозы – группа инфекционных заболеваний, для возбудителей которых главным естественным местом обитания являются абиотические (неживые) объекты окружающей среды (клостридиозы, ботулизм, стоблняк).

Понятие об инфекциях, связанных с оказанием медицинской помощи (ИСМП) - это любые клинически выраженные заболевания микробного происхождения, которое поражают больного в результате его поступления в больницу или обращения за медицинской помощью вне зависимости от появления симптомов заболевания у пациента во время пребывания в стационаре или после его выписки.

Физиологические особенности госпитальных штаммов бактерий - это повышенная вирулентность, связанная со специфической адаптацией (резистентностью) к используемым антибиотикам и дезинфицирующим средствам.

35. Патогенность и вирулентность бактерий. Болезнетворность как потенциальный признак. Прямая и опосредованная болезнетворности бактерий. Генетические основы болезнетворности бактерий, понятие об островах патогенности.

Патогенность — потенциальная способность того или иного вида бактерий вызывать болезнь. Вирулентность – это степень болезнетворности индивидуальных штаммов патогенного вида т.е. свойство штамма, которое проявляется в определенных условиях (при изменчивости микроорганизмов, изменении восприимчивости макроорганизма и т.д.). Вирулент­ность можно повышать, понижать, измерять, т.е. она является мерой патогенности.

Патогенность отражает болезнетворность на уровне вида.

Базисные факторы, определяющие болезнетворность: 1) Способность к адгезии и колонизации зоны первичного инфицирования; 2) Способность к инвазии; 3) Способность к токсинообразованию; 4) Способность к персистенции;

Прямая болезнетворность – прямой цитопатический эффект. Опосредованная болезнетворность – результат Т-зависимой гиперчувствительности к микробным агентам (действие микробных токсинов). Характерна для внутриэпителиальной и внутримакрофагальной инфекций, а также для пиогенных инфекций.