17. Культуральные свойства бактерий. Характеристика колоний. Методы изучения культуральных свойств бактерий. Понятие о биотипе (биоваре).

Культуральные свойства бактерий: Чистая культура – изучаемая колония, она должна быть изолирована друг от друга на питательной среде. Культуральные признаки – это внешний вид колоний, структура, форма, размер, цвет, расположение колоний.

Характеристика колоний

Форма	Правильная (круглая), Неправильная (амёбовидная, корневидная)
Поверхность	Гладкая /бугристая/морщинистая Блестящая/матовая
Размер	Диаметр в мм: - точечные (меньше 1 мм); - мелкие (1-2 мм); - средние (2-4 мм); - крупные (более 4 мм);
Расположение колонии на поверхности среды	Выпуклое/плоское/ вдавленное
Характер края колонии	Ровный/неровный (фестончатый край (крупные зубцы), бахромчатый край (с ворсиками), зазубренный и волнистый)
Цвет	Бесцветный (гиалиновый)/окрашенный (крупнозерновой или мелкозерновой)
Прозрачность	Прозрачная /непрозрачная
Консистенция	Сухая/влажная/сочная/слизистая
Изменение среды вокруг колонии	На кровяном агаре отмечается гемолиз (просветление среды). Некоторые бактерии ( Pseudomonas aerugenosa) выделяют водорастворимый пигмент, который окрашивает питательную среду.

Методы изучения культуральных свойств. 1. Просмотр невооруженным глазом или лупой 2. На столике микроскопа (смотрят величину, форму, контур, рельеф, цвет и консистенцию)

Биотип (биовар) – внутривидовая систематическая категория, разновидность штамма прокариот, которая имеет биохимические и/или физиологические признаки, отличающие её от других штаммов внутри определённого вида.

18. Стерилизация и дезинфекция. Понятие о дезинфектантах и антисептиках. Основные методы стерилизации при проведении микробиологических исследований.

Стерилизация (иногда деконтаминация) — полное уничтожение микроорганизмов (включая бактерии, грибы, вирусы и прионы) и их спор на различных изделиях, поверхностях и препаратах.

Дезинфекция – это комплекс мероприятий, направленный на уничтожение возбудителей инфекционных заболеваний и разрушение токсинов на объектах внешней среды для предотвращения попадания их на кожу, слизистые и раневую поверхность. Может проходить под действием тепла, ультрафиолета и химических средств.

Дезинфектанты – растворы, используемые для дезинфекции.

Примеры: 1-5% хлорамин, перекись водорода 6%, фенол, формальдегид. Антисептика – система мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов в ране, патологическом очаге, органах и тканях, а также в организме больного в целом, использующая механические и физические методы воздействия, активные химические вещества и биологические факторы.

Виды:

• бактериостатическое действие, когда происходит остановка развития микроорганизмов;

• бактерицидное действие, когда микроорганизмы полностью погибают;

В качестве антисептиков применяют также вещества из группы окислителей, к которым относятся: перекись водорода, калия перманганат и др. Они обладают слабым антисептическим и дезодорирующим эффектами, связанными с освобождением кислорода.

Основные методы стерилизации при проведении микробиологических исследований:

1. Механические методы стерилизации (стерилизующая фильтрация)

Стерилизующая фильтрация. Микробные клетки и споры можно рассматривать как нерастворимые образования с очень малым (1-2 мкм) размером частиц. Подобно другим включениям, они могут быть отделены от жидкости механическим путем - фильтрованием сквозь мелкопористые фильтры. Этот метод стерилизации включен в ГФ ХI для стерилизации термолабильных растворов.

2. Химические методы стерилизации

Эти методы основаны на высокой специфической (избирательной) чувствительности микроорганизмов к различным химическим веществам, что обусловливается физико-химической структурой их клеточной оболочки и протоплазмы. Механизм антимикробного действия - некоторые вещества вызывают коагуляцию протоплазмы клетки, другие - действуют как окислители, ряд веществ влияет на осмотические свойства клетки, многие химические факторы вызывают гибель микробиологической клетки благодаря разрушению ферментной системы. Основой любого варианта химической стерилизации является взаимодействие бактерицидного вещества с компонентами микробной клетки или споры.

Химическая стерилизация:

• стерилизация растворами (веществами);

• стерилизация газами (газовая стерилизация);

• Физические методы стерилизации

3. Физические методы стерилизации

• Тепловая (термическая) стерилизация. В настоящее время монопольное положение среди возможных методов стерилизации в фармацевтическом производстве занимает тепловая стерилизация (автоклавирование, сухожаровой шкаф);

• Радиационная стерилизация. Лучистая энергия губительно действует на клетки живого организма, в том числе и на различные микроорганизмы;

• Ультразвуковая стерилизация. Прохождение ультразвука (УЗ) в жидкой среде сопровождается чередующимися сжатиями, разрежениями и большими переменными ускорениями, что приводит к разрушению целостности клеточной мембраны микроорганизмов, споровых образований и других частиц;

• Стерилизация ультрафиолетовым излучением. Из-за возможности образования ядовитых продуктов и возможности разложения биологически активных компонентов инъекционных растворов под действием УФ-излучения, метод не нашел своего применения для стерилизации препаратов для инъекций;

19. Антибиотики. Классификация по происхождению (продуцентам). Основные химические группы антибиотиков. Принцип действия антибиотиков, селективная токсичность. Химиотерапевтический индекс. Классификация антибиотиков по механизму действия. Классификация антибиотиков по спектру антимикробной активности.

Антибиотики — продукты жизнедеятельности (или их синтетические аналоги и гомологи) живых клеток (бактериальных, грибковых, растительного и животного происхождения), избирательно подавляющие функционирование других клеток — микроорганизмов, опухолевых и т.д.

По происхождению: 1. Природные:

• Из грибов (пенициллин, цефалоспорины);

• Из актиномицетов (стрептомицин, эритромицин);

• Из бактерий (грамицидин, полимиксин);

• Из растений (фитонциды);

• Из животных (лизоцим);

2. Полусинтетические (продукты модификации молекул природных антибиотиков): ампицилин, гентамицин;

3. Синтетические (аналоги природных антибиотиков): левомицетин;

По химии: 1) БЕТА – лактамные (пенициллин, цефалоспорины) 2) Гликопептиды (ванкомицин) 3) Аминогликозиды (неомицин) 4) Тетрациклин (тетрациклин) 5) Макролиды (эритромицин) 6) Линкозамины (линкомицин) 7) Полиены (нистатин) 8) Оксазолидиноны (линезолид)

Принцип действия антибиотиков:

1. Бактериостатический (снижение роста и размножения микроорганизмов);

2. Бактерицидный (действие основано на гибели микробов);

Эрлих «Принцип «волшебной» пули» - основной постулат поиска новых химиотерапевтических средств: вещество должно обладать минимальной органотропностью и максимальной паразитотропностью (убийство микроорганизма без вреда для макроорганизма).

Химиотерапевтический индекс – как терапевтически широко действует АБ. Хим. индекс = максимально переносимая доза / минимальная лечебная доза. Хим. индекс в этом случае должен быть больше 3 . Чем больше Химиотерапевтический индекс, тем эффективнее препарат.

По спектру антимикробной активности:

1. Широкого действия (цефалоспорины);

2. Узкого действия (предпочтительнее, линкомицин, клиндамицин);

Механизм действия:

1. Нарушение синтеза белка:

• Действие на 30S - субъединицу рибосомы (аминогликозиды, тетрациклины);

• Действие на 50S - субъединицу рибосомы (эритромицин);

2. Нарушение сборки пептидогликана клеточной стенки (бета-лактамы);

3. Действие на цитоплазматическую мембрану (полиены);

4. Нарушение синтеза нуклеиновых кислот (рифамицин)

• Опосредованное действие через фолиевую кислоту (стрептоциды, сульфаниламиды);