Методы изучения нормальной микрофлоры

Для изучения нормальной микрофлоры применяются 2 метода: бактериоскопический и бактериологический.

Бактериоскопический метод имеет большое самостоятельное значение для тех биотопов организма человека, в которых обитает большое количество различных видов микроорганизмов (полость рта, кишечник, вагина). Он позволяет получить общее представление о составе микрофлоры (преобладание грам/+ или грам/- бактерий той или иной формы - кокки, диплококки, стрептококки, палочки, бациллы, стрептобациллы, фузиформные бактерии, наличие грибов и т.д.), а также выявить те микроорганизмы, которые не удается культивировать на питательных средах.

Бактериологический метод  для биотопов с широким спектром микроорганизмов (полость рта, кишечник, вагина) нужно выполнять с учетом данных бактериоскопии.

Основные принципы бактериологического исследования:

0. использование качественной (видовой состав) и количественной (количественное соотношение разных видов) оценки микрофлоры;

1. первичный посев материала без предварительного обогащения, так как обогащение нарушает количественные соотношения видов;

2. использование большого набора различных питательных сред, подбор условий культивирования (аэробные, анаэробные, атмосфера СО 42 и т.д.).

Методы взятия материала для исследования:

1. Получение естественных экскретов (слюна, моча и т.д.);

2. Метод реплик: а) отпечатки на поверхности агаровой среды, б) отпечатки марлево-агаровыми пластинами;

3. Метод смывов увлажненным тампоном;

4. Аспирационный метод (из межзубных пространств, гингивальных карманов, из верхних и средних отделов дыхательных путей, аспирация на фильтры);

5. Введение зондов в кишечник;

6. Метод аппликаций - снятие микроорганизмов с помощью бумажных или тканевых пластинок определенной площади.

Ч А С Т Н А Я М И К Р О Б И О Л О Г И Я

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПНЕВМОКОККОВЫХ ИНФЕКЦИЙ.

Пневмококк - грамположительный ланцетовидный диплококк, имеет полисахаридную капсулу. Культивируется на средах с белком при рН 7,6 (5% кровяной агар), образует мелкие (средние) уплощенные колонии с гемолизом. Лучше растет при насыщении воздуха СО 42 0. По типу К-антигена имеет 83 варианта. Чувствителен к химическим и физическим факторам (в частности, к солям желчи (лизис), оптохину, NaCl). К факторам патогенности пневмококка относят капсулу, гиалуронидазу, нейраминидазу, экзопротеазу Ig A, О-пневмолизин, лейкоцидин, лизоцим. Патогенен для белых мышей. Пневмококк вызывает острые и хронические заболевания дыхательного тракта (гайморит, бронхит, пневмония), менингит, сепсис, гнойно-воспалительные заболевания, ползучую язву роговицы.

Материал для диагностического исследования берут в зависимости от формы пневмококковой инфекции: например, при пневмонии - мокроту, при сепсисе - кровь, при гнойном заболевании - гной, при отите отделяемое их слухового прохода и т.д. Материал важно забрать до начала этиотропного лечения. Для обнаружения антител исследуют сыворотку крови.

С целью лабораторной диагностики применяют следующие методы:

I. Экспресс-методы (обнаружение возбудителя в исходном материале).

1. Микроскопическое исследование - мазок из патологического материала с окраской по Граму. Обнаружение грамположительных капсульных диплококков;

2. Определение антигена капсулы в реакции «Набухание капсулы» (по Нейфельду - феномен увеличения размеров капсулы в присутствии поливалентной противокапсульной сыворотки). Последняя наносится на мазок исследуемого материала; учет с помощью фазово-контрастного микроскопа;

3. Обнаружение антигена в сыворотке или ликворе (РСК, латекс-агглютинация, встречный иммуноэлектрофорез).

Экспресс-методы чаще являются ориентировочными, так как:

а) не всегда обнаружение пневмококка свидетельствует о его этиологической роли (часто носительство);

б) возбудитель не обнаруживается с началом этиотропного лечения.