- •Общая микробиология
- •Частная микробиология
- •Общая и частная вирусология
- •Другие инфекции
- •Общая микробиология микроскопический (бактериоскопический) метод исследования
- •Противомикробные мероприятия.
- •Стерилизация
- •Дезинфекция
- •Антисептика
- •Асептика
- •Классификация питательных сред
- •Культуральный метод исследования
- •I. Забор материала для исследования
- •II. Выделение чистой культуры включает 3 или 4 этапа
- •III. Заключение
- •Методы выделения чистых культур микроорганизмов
- •Метод заражения чувствительных лабораторных животных (биологический).
- •Методы, основанные на избирательной чувствительности микроорганизмов к воздействию внешних факторов.
- •(См. Файл «схема индентификации) определение биохимических свойств микробов
- •Ферменты-токсины
- •Оксидо-редуктазы
- •Биологический (экспериментальный) метод исследования
- •Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам
- •Метод серийного разведения антибиотик в бульоне
- •Метод серийных разведений в плотной питательной среде.
- •Ускоренные методы
- •Методы генетического анализа микроорганизмов
- •Методы изучения нормальной микрофлоры
- •Культуральный (бактериологический) метод.
- •Общие принципы диагностики острых кишечных инфекций, вызванных микробами семейства энтеробактерий
- •Диагностика брюшного тифа, паратифов а и в сальмонеллезов.
- •Лабораторная диагностика кишечного иерсиниоза
- •Пищевые отравления бактериальной природы методы диагностики
- •Оценка результатов
- •Лабораторная диагностика газовой гангрены
- •Бактериологический метод исследования.
- •Лабораторная диагностика ботулизма
- •Диагностика столбняка
- •Лабораторная диагностика холеры
- •Кампилобактерии. Кампилобактериозы. Методы диагностики.
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Лабораторная диагностика хламидиозов
- •Лабораторная диагностика
- •Микоплазмы. Микоплазмозы
- •Общая и частная вирусология методы культивирования вирусов
- •Выделение вирусов и методы их индикации
- •Принципы диагностики вирусных инфекций
- •Лабораторная диагностика вирусных гепатитов
- •Лабораторная диагностика спида
- •III. Исследования иммунного статуса направлены на выявление:
- •Патогенные грибы. Классификация грибов. Методы диагностики микозов.
- •Возбудители мадуромикоза
- •Возбудитель пневмоцистоза
- •Возбудитель донованоза
- •Возбудитель язвы бурули
- •Возбудитель мелиоидоза
Метод заражения чувствительных лабораторных животных (биологический).
Основан на избирательной чувствительности организма животного к микробам различных видов, что выражается в быстрой скорости размножения определенного вида при попадании его в кровь и внутренние органы, откуда его и выделяют. В то же время другие виды микробов погибают под действием защитных факторов организма. Таким образом выделяют, например, чистую культуру пневмококков из организма белой мыши, палочки туляремии из организма морской свинки.
Методы, основанные на избирательной чувствительности микроорганизмов к воздействию внешних факторов.
а) Температуры: спорообразующие микробы выживают при нагревании смеси микробов, в то время, как неспорообразующие - гибнут.
б) Кислот: при обработке смесей кислотоустойчивых и неустойчивых к кислотам микробов, последние гибнут, а кислотоустойчивые остаются, как правило, в чистой культуре. Так выделяют возбудителя туберкулеза.
в) Антибиотиков: основан на избирательной чувствительности определенных видов микробов к отдельным антибиотикам. При посеве смеси микробов на среду с добавлением антибиотика, вырастают нечувствительные к нему микробы.
г) Анаэробных условий: дает возможность отделить группу анаэробных микроорганизмов от облигатных аэробов.
СХЕМА ИНДЕНТИФИКАЦИИ МИКРОРГАНИЗМОВ ПО ПРИЗНАКАМ |
(ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИДА) |
(См. Файл «схема индентификации) определение биохимических свойств микробов
Этот метод предусматривает изучение ферментативной деградации различных субстратов (углеводородов, аминокислот и белков, мочевины, перекиси водорода и др.) с образованием промежуточных и конечных продуктов.
КАРБОГИДРАЗЫ - ферменты, разлагающие углеводы. Определяя карбогидразы, выявляют т.н. сахаролитические свойства микробов. С этой целью используют следующие среды:
а) Среды Гисса (жидкие и полужидкие с индикаторами). В качестве последних используют реактив Андреде, бромтимоловый синий или ВР. О ферментативной активности бактерий судят по изменению цвета среды и образованию газа.
б) Дифференциально-диагностические среды с лактозой (Эндо, Левина, Плоскирева и др.).
в) Полиуглеводные среды (типа Олькеницкого, Клиглера и др.).
ПРОТЕАЗЫ - ферменты, разлагающие белки.
а) Исследуемая культура может расщеплять белки субстрата с образованием пептона, альбумоз, аминокислот. Этот процесс идет за счет ферментов-протеиназ и пептидаз. Для выявления указанных ферментов исследуемую культуру засевают на ряд сред: свернутая сыворотка, столбик желатина (разжижение в положительных случаях), молочный агар в чашке Петри (в положительных случаях вокруг колоний появляются зоны помутнения).
б) Расщепление аминокислот микробами может идти путем декарбоксилирования, либо путем дезаминирования. В первом случае из той или иной аминокислоты образуются амины, которые выявляются либо методом элекрофореза, либо по подщелачиванию среды. О наличии дезаминаз у микроба судят по образованию аммиака в среде, как результат процесса дезаминирования аминокислоты.
в) Расщепление аминокислоты триптафана за счет действия фермента триптафаназы сопровождается образованием индола. Последний выявляется с помощью бумажки, смоченной щавелевой кислотой и укрепленной под пробкой над питательной средой. В положительных случаях бумажка краснеет.
г) Для выявления ферментов расщепления серосодержащих аминокислот (цистин, цистеин) ставят пробы на H 42 0S, как продукт расщепления этих аминокислот десульфуразами. Наличие H 42 0S выявляется и в среде Олькеницкого.
д) Для выявления уреазы - фермента, расщепляющего мочевину - в питательную среду нейтральной рН добавляют мочевину и индикатор. В положительных случаях среда изменяет цвет за счет сдвига рН в щелочную сторону в связи с образованием аммиака.
ЛИПАЗЫ - ферменты разложения липидов и липоидов. Чаще всего определяют лецитиназу посевом на желточный агар. Лецитиназа расщепляет лецитин на фосфохолин и диглицерид в этих случаях при росте колоний вокруг них появляются опалесцирующие зоны, отражающие лецитиназную активность.