Лабораторная диагностика вирусных гепатитов

8 нозологических форм: гепатиты A, B, C, D, E, F, G, пост-трансфузионный.

По путям передачи вирусные гепатиты делят на энтеральные, передающиеся фекально-оральным путем (к ним относятся гепатиты А, Е, F), и парентеральные включая трансплацентарный и половой пути передачи (к ним относятся гепатиты В, С, D, G, посттрансфузионный).

Наибольшее распространение гепатиты А, В и С.

I. Гепатит А (ГА). Лаб. диагностика ГА основывается на выявлении самого возбудителя (метод ИЭМ), его АГ (РИА, ИФА, ИФ) или АТ к вирусу (РИА, ИФА): Ig M появляются в сыворотке кр.и слюне уже в начале заболевания и сохраняются в течение 36 месяцев. Обнаружение Ig M к вирусу ГА свидетельствует о гепатите А и используется для диагностики заболевания, в том числе и бессимптомных случаев инф. и выявления источников инф. в очагах. Фрагментов генома (ПЦР). Для ранней диагностики заболевания, выявления источников инф, используется определение АГ вируса ГА в фекалиях больных, где он появляется за 710 дней до клинических симптомов и в первые дни заболевания.

Сравнительная характеристика вирусных гепатитов А, В, С

Признак	Гепатит А	Гепатит В	Гепатит С
Вирус (семейство)	Picornaviridae	Hepadnaviridae	Flaviviridae
Тип нуклеиновой кислоты	однонитчатая +РНК	двунитчатая ДНК с однонитчатым участком	однонитчатая +РНК
Размер вириона	2732 нм	4245 нм	3060 нм
Суперкапсид	отсутствует	Имеется	имеется
Путь заражения	фекально-оральный	парентеральный	парентеральный
Инкубационный период	в среднем 2530 дней	в среднем 6090 дней, может быть до 6 мес.	в среднем 3570 дней
Группы риска	преимущественно дети до 15 лет	дети и взрослые	дети и взрослые
Сезонность	чаще август-сентябрь	в течение всего года	в течение всего года
Переход в хроническую форму	отсутствует	имеет место	имеет место в 50 % случаев
Носительство	отсутствует	длительное	длительное
Онкогенность	отсутствует	характерна	характерна

.

Ig G выявляются с 34-й недели заболевания и сохраняются длительное время, что позволяет оценить состояние им-та населения, динамику специф. ГИО.

Вирус гепатита А можно выявить методом иммунной электронной микроскопии. В основе метода лежит смешивание суспензии вируса с антисывороткой, отделение иммунных комплексов и исследование их в электронном микроскопе.

II. Гепатит В (ГВ). В организме людей, зараженных вирусом ГВ, с разной частотой и на разных этапах могут выявляться серологические маркеры: поверхностный HВs Ag и сердцевинный HВe Ag, а также антитела к ним (anti-HВc, anti-HВe, anti-HВs). Выявление АГ и соответствующих им АТ -индикатор инф. процесса.

Наличие HВs Ag, HВе Ag и anti-HВc класса Ig M свидетельствует об остром периоде инф. В период реконвалесценции — это anti-HВc-АТ класса Ig G, которые выявляются совместно с anti-Hbs-АТ. Длительное присутствие в крови HВs-Ag, HВe-Ag и anti-HBc (IgG) АТ— неблагоприятный признак, свидетельствующий о формировании хронического процесса.

Серологические маркеры при гепатите В

Вирусная ДНК
НВe-Ag
HBs-Ag
Анти HBc IgM
Общий Анти HBc
Анти Hbe
Анти HBs
	Инкубация	Конец инкубационного периода	Острая фаза. Активная репликация			Конец фазы репликации		Фаза реконвалесценции	Иммунитет
	412 нед.	12 нед.	2 нед.3 мес.					36 мес.	годы
HBs-Ag Вирусная ДНК HBe-Ag Анти-HBc общий Анти-HBc M Анти-HBe Анти-HBs

Таблица 11

Диагностическое значение выявления серологических маркеров при разном течении гепатита В

Антигены		Антитела к HBs-Аг	Антитела к HBc-Аг		Варианты клинического течения инфекции
HВs	Hbe		Ig G	Ig M
+	+			+	Острая фаза ГВ
+	±		+		Хронический ГВ
+					Носительство вируса ГВ
		+			Наличие ГВ в прошлом
					Отсутствие ГВ в прошлом

При длительном носительстве постоянно определяется HВs Ag. Используют РПГА, РИА и ИФА. Для обнаружения HBs Ag используется РОПГА — реакция обратной пассивной гемагглютинации с обязательным положительным контролем на HВs Ag.

III. Гепатит С (ГС). Вызывается РНК-содержащим вирусом, семейство Flaviviridae, род Hepacivirus. Диаметр 55 65 нм, чувствительны к обработке хлороформом. Выделяют 11 основных генотипов и более 100 подтипов вируса.3 структурных (C, E₁, E₂) и 5 неструктурных (NS₁NS₅) белков. Диаметр капсида — 3060 нм. Гены E₁, E₂, C — вариабельны, особенно ген E₂. Два гипервариабельных белка — Е₁ и Е₂ расположены в липидном бислое. Неструктурные белки — NS₂ (протеаза), NS₃ (протеаза), NS₄ (А и В) и NS₅А (регуляторные белки), NS₅В (репликаза) играют важную роль в репликации вируса и патогенезе заболевания.

По сравнению с вирусом гепатита В вирус гепатита С имеет более короткий период полужизни (около 3-х часов) и более высокий уровень продукции (1,1×10¹² вирионов в день), а для вируса ГВ — 24 часа и 10¹¹ вирионов в день.

Гепатит С по клинико-биохим.пр-кам сходен с ГВ. У 60% инфицир. лиц заболевание переходит в хроническую форму, а у 20% через 1520 лет развивается цирроз печени, который может перейти в гепатоклеточную карциному, чему способствуют коинфекция вирусом гепатита С и В и алкоголизм. У 20% переболевших формируется хроническое носительство вируса. Механизм передачи вируса гепатита С в основном парентеральный.

Лабораторная диагностика ГС определение Ат к АГ вируса ГС методами ИФА или РИА. ПЦР применяется для индикации, идентификации, генотипирования и кол-ного определения вирусной нагрузки в плазме крови.

IV. Возбудитель гепатита дельта (гепатит D). РНК-содержащий, дефектный вирус, способный реплицироваться в организме хозяина при участии вируса-помощника, роль которого выполняет вирус ГВ. Оболочку вирусаD формирует HВs Ag. Присоединение дельта-инфекции к ГВ ведет к развитию тяжелых злокачественных форм болезни, хронических форм с ранним формированием цирроза печени.

Лаб.диагностика обнаружение маркеров вируса ГВ и дельта-вирусной инфекции — HВs Ag, anti-HВc Ig M и дельта Ag при помощи ИФА и РИА, методы молек. биологии с целью генотипирования и определения резистентности вирусов к химиотерапевтическим препаратам.