42. Анилин в химико-токсикологическом отношении.

Анилин – маслянистая жидкость, почти бесцветная в чистом состоянии, но быстро темнеющая на воздухе в результате окисления кислородом воздуха на свету. Анилин хорошо растворим в сероуглероде, жирах, эфире, этаноле. Нерастворим в воде.

Отравление анилином наступает при вдыхании паров анилина, всасывается даже через неповреждённую кожу. После приёма алкоголя чувствительность к анилину повышается. Анилин оказывает парализующее действие на сосудистую и нервную систему. В крови увеличивается содержание метгемоглобина. При смертельном отравлении в агональном состоянии появляются симптомы поражения ЦНС: клонические и тетанические судороги, наступает паралич дыхательного центра. Патологоанатомически: серые трупные пятна. Канальцы почек забиты метгемоглобином. Кровь не свёртывается. Дегенеративные изменения в паренхиматозных органах, главным образом, в почках.

Качественное обнаружение: часть дистиллята смешивают с насыщенным раствором бромной воды – в воде белый осадок 2, 4, 6-триброманилина.

Реакция высокочувствительная и лежит в основе количественного определения анилина. Как качественная реакция для анилина она неспецифична. Для реакции придаётся отрицательное химико-токсикологическое значение.

Взаимодействие с хлорамином и фенолом анилин и его производное образует индофенол, щелочная соль которого имеет синий цвет.

Реакция высокочувствительная и используется для определения анилина в воздухе промышленных предприятий.

Количественное определение

Анилин переводят в 2, 4, 6-триброманилин или анилин переводят в азокраситель красно-оранжевого цвета по первичной ароматической аминогруппе анилина. Определяют фотоэлектроколориметрически или спектрофотометрически со стандартным образцом или по калибровочному графику.

43. Метод изолирования подкисленным спиртом. Его достоинства и недостатки.

Изолирование этанолом, подкисленным щавелевой кислотой (метод Стаса-Отто)

В 1851 году во Франции произошло насильственное отравление Гюстава Фугни никотином. Он стал жертвой собственной сестры Лидии Фугни и ее мужа - графа Бокарме, которые совершили это преступление в погоне за наследством. Исследование внутренних органов погибшего было поручено бельгийскому химику Ж.С. Стасу, который применил для изолирования яда этанол, подкисленный щавелевой кислотой. Последующее извлечение алкалоида из водной фазы (после добавления гидроксида аммония для переведения его соли в основание) проводилось эфиром. В 1856 году братья Юлий и Роберт Ф. Отто ввели в метод Стаса еще одну операцию - очистку извлечения, исследуемого на алкалоиды путем экстрагирования примесей эфиром из кислой водной вытяжки. В дальнейшем метод изолирования подкисленным спиртом, названный по имени авторов методом Стаса-Отто претерпел серьезные изменения и стал применяться не только для алкалоидов, но и для многих других ядовитых и сильнодействующих веществ, имеющих токсикологическое значение.

Современная модификация метода состоит из этапов:

• Настаивание измельченного объекта с этиловым спиртом, подкисленным щавелевой кислотой до рН2-3 в течение суток. Спирт берется в количестве, необходимом для покрытия объекта. Спиртовое извлечение сливается, и вся операция повторяется трехкратно;

• Упаривание объединенных спиртовых извлечений при температуре 40-50°С до густого остатка, в который по каплям добавляют абсолютный этанол для коагуляции белков. Осадок отфильтровывают и всю операцию осаждения повторяют по мере необходимости до полного удаления белковых соединений;

• Упаривание фильтрата при той же температуре до густого остатка и разбавление горячей водой для удаления смолистых веществ жиров и пигментов. Осадок отфильтровывают;

• Экстрагирование веществ кислого, нейтрального и слабоосновного характера из водного фильтрата хлороформом при рН=2 (трехкратная экстракция), отделение органической фазы и концентрирование полученного извлечения упариванием (фракция А, «кислое» извлечение);

• Подщелачивание оставшегося после разделения фаз водного слоя до рН 9-10, экстрагирование веществ сильноосновного и нейтрального характера (трехкратная экстракция) хлороформом, отделение органической фазы и концентрирование упаривание (фракция Б, «щелочное» извлечение);

Изолирование «нелетучих» ядов из биологического материала подкисленным спиртом (метод Стаса-Отто) проводится по следующей схеме:

Достоинства метода заключаются в следующем:

1) Метод универсален, т. к. этанол является хорошим растворителем для многих веществ этой группы (как ионизированных так и молекулярных форм);

2) Метод предусматривает очистку извлечения от балластных веществ, в результате чего получаются чистые хлороформные извлечения, не дающие эмульсий при экстрагировании веществ из водной фазы хлороформом. Метод дает возможность изолировать до 30% барбитуратов и 20-25% алкалоидов;

К недостаткам метода следует отнести:

1) Длительность (8-10 рабочих дней) и многостадийность;

2) Большое количеств операций, связанных с осаждением белков и

фильтрованием ведет к значительным потерям искомых веществ (алкалоиды

теряются на 25-50%);

3) Сравнительная дороговизна метода ( на 1 исследование тратится до 500 мл этанола);

Все это приводит к тому, что классический метод Стаса-Отто теряет свое былое значение и постепенно заменяется более быстрыми эффективными и экономными методами извлечения подкисленной водой.

В настоящее время метод применяется главным образом для исследования гнилостно измененного биологического материала.