Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
современная генетика т2.doc
Скачиваний:
190
Добавлен:
21.02.2016
Размер:
9.54 Mб
Скачать

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

Рис. 15.16. Последовательности ДНК, РНК и белков внутри и вокруг операторной области OR фага λ. Отмечены три участка связывания репрессора. Показаны точки инициации транскрипции генов cro и cI. Звездочками помечены шесть оснований на участке OR. которые в структуре транскрипта гена cI, вероятно, используются для прочного связывания с рибосомой. (По Ptashne M. et al, 1980. Cell. 19, 1.)

Айала ф., Кайгер Дж. Современная генетика: в 3-х т. Т. 2. Пер. С англ.: – м.: Мир, 1988. – 368 с.

15. Регуляция экспрессии генов у прокариот 191

Рис. 15.17. Специфичность связывания репрессора cl фага λ с последовательностями OR1, 0R2 и OR3, оцениваемая с помощью «футпринтинга» (см. Дополнение 14.2). Расщепление ДНКазой I рестрикционных фрагментов, содержащих область 0R и меченых 32Р. Расщепление проводили в присутствии возрастающих концентраций репрессора. Концентрация репрессора дана в единицах молярности (нМ) в расчете на 1 субъединицу репрессора. (Courtesy of A. D. Johnson, B.J. Meyer, M. Ptashne, Biological Laboratories, Harvard University.)

значения концентрации cI, при которых каждый из трех центров связывания белка защищается от действия ДНКазы I. Как показано на рис. 1 5.17, при низких концентрациях cI приблизительно в равной степени защищаются участки OR1 и OR2. Для защиты участка 0R3 необходима значительно более высокая концентрация белка cI. В таблице 15.3 приведены относительные значения концентрации cI, при которых для каждого из участков связывания наблюдается защита половины операторов от действия ДНКазы.

Аналогичные опыты были поставлены с очищенным N-концевым доменом cI, полученным с помощью ограниченного протеолиза. Обратите внимание на данные, представленные в таблице 15.3, которые свидетельствуют о том, что для изолированного N-концевого домена в отличие от нативного белка наблюдается сильное сродство к участку OR1 и приблизительно одинаковое, более слабое сродство к обоим участкам OR2 и OR3. Наблюдаемые различия в поведении белка по отношению к участку OR2 указывают на возмож-

Таблица 15.2. Свойства белков, продуктов генов cI и его фага λ

Белок

cI

Cro

Величина субъединицы

236 аминокислот

66 аминокислот

Активная форма

Димер

Димер

Относительное сродство к центрам связывания

Кооперативное связывание димеров

Есть

Нет

Негативная регуляция на:

pr и prm

prm

Позитивная регуляция на:

prm