48. Оценка фагоцитоза, в- и т-систем иммунитета, активности антителобразующих клеток.

Оценка активности фагоцитоза

ФЧ – фагоцитарное число (фагоцитарная активность) – это % профагоцитировавших клеток на 100 нейтрофилов

ФИ – фагоцитарный индекс – это среднее число бактерий в одном фагоците

Опсоно-фагоцитарный индекс – это соотношение фагоцитарного индекса иммунной сыворотки к фагоцитарному индексу нормальной сыворотки

Оценка миграционной активности фагоцитов

• Реакция направленного хемотаксиса

• РТМЛ (реакция торможения миграции лейкоцитов)

Оценка завершенности фагоцитоза

• Подращивание бактериально-лейкоцитарной смеси

• НСТ-тест (наличие активных форм кислорода) – взвесь нейтрофилов смешивают с нитросиним тетразолием и подсчитывают затем, после кратковременной инкубации, нейтрофилы с синими гранулами – доля нейтрофилов с синими гранулами служит показателем завершенности фагоцитоза

Комплекс тестов, с помощью которых диагностируются наиболее частые нарушения в иммунной системе:

оценка фагоцитоза:

• определение абсолютного числа нейтрофилов и моноцитов;

• определение интенсивности поглощения микробов фагоцитами;

• определение способности фагоцитов убивать микробы;

• определение интенсивности хемотаксиса фагоцитов и экспрессии молекул адгезии (CDlla, CDllb, CDllc, CD18) на по­верхностной мембране нейтрофилов;

оценка В-системы иммунитета:

• определение иммуноглобулинов G, А, М и Е в сыворотке крови;

• процентного и абсолютного количества В-лимфоцитов (CD 19, CD20) в периферической крови.

Их определение — главный метод диагностики всех форм иммунодефицитов, связанных с биосинтезом антител, которые проявляются прежде всего в виде длительно протекающих, рецидивирующих инфекций рес­пираторного тракта, хронических синуситов, отитов и др. В зависимости от формы иммунодефицита у таких больных могут наблюдаться диарея, лямблиоз, кожные поражения, злокачественные новообразования. Дефицит IgA часто ассоциируется с аутоиммунными и аллергическими заболеваниями. В последнем случае нередко повышен уровень IgE.

При оценке В-системы иммунитета рекомендовано определение как числа В-лимфоцитов, так и уровня иммуноглобулинов, что позволяет исследовать В-систему иммунитета как с количественной, так и с функциональной стороны.

Определение количества иммуноглобулинов позволяет судить не только о нормальном функционировании В-, но и косвенно о Т-системе иммунитета. Повышенный уровень IgE может свидетельствовать об усилении синтеза интерлейкина-4 и, следовательно, об усилении функции Т-хелперов.

Оценка количества иммуноглобулинов включает определение:

—субклассов иммуноглобулинов, особенно IgG;

—секреторного IgA;

—соотношения каппа- и лямбда-цепей;

—специфических антител к белковым и полисаха-ридным антигенам;

—способности лимфоцитов давать пролиферативный ответ на В-(стафилококк, липополисахарид) и Т-, В-(митоген лаконоса) митогены.

Определение содержания субклассов IgG представляет диагностическую ценность, так как при нормальном уровне IgG могут быть дефициты по субклассам иммуноглобулинов.

Важное функциональное свойство иммуноглобулинов — опсонизирующая активность. Выполнение нейтрофилом этой функции зависит от опсонизирующей активности сыворотки крови, где иммуноглобулинам и комплементу принадлежит ведущая роль.

Оценка Т-системы иммунитета:

тесты 1-го уровня для оценки T-системы

• определение общего числа лимфоцитов;

• определение процентного и абсолютного числа зрелых Т-лимфоцитов (CD3) и двух основных их субпопуляций: хелперов/индукторов (CD4) и киллеров/супрессоров (CD8);

• определение пролиферативного ответа на основные Т-митогены: фитогемагглютинин и конканавалин А.

тесты 2-го уровня для оценки T-системы

• продукции цитокинов (интерлейкинов (ИЛ): ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-5, ИЛ-6, гамма-интерферона, фактора некроза опухоли (ФИО) и др.);

• активационных молекул на поверхностной мембране Т-лимфоцитов (CD25, HLA-DR);

• молекул адгезии (CDlla, CD18);

• пролиферативного ответа на специфические антигены, чаще всего на дифтерийный и столбнячный анатоксины;

• кожные тесты с рядом микробных антигенов.

Определение количества Т-клеток и их двух основных субпопуляций — один из главных методов оценки Т-системы иммунитета и соответственно иммунодиагностики всех форм иммунодефицитов.

Определение содержания Т-лимфоцитов (CD3) и их субпопуляций (CD4, CD8) важно не только для диагностики врожденных Т-клеточных дефицитов и ВИЧ-инфекции, но и для оценки иммунной системы при ауто­иммунных заболеваниях.

Определение продукции цитокинов лимфоцитами и макрофагами должно стать главным методическим приемом в иммунодиагностике заболеваний, связанных с нарушением иммунной системы. Большое значение для иммунодиагностики имеет изучение экспрессии активационных молекул и молекул адгезии на поверхности Т-лимфоцитов, что дает ценную информацию о степени активации Т-клеток. Существенную информацию о состоянии иммунной системы может дать углубленное изучение антигенраспознающего Т-клеточного рецептора.