- •Студентів спеціальностей
- •7.091704 - Технологія бродильних виробництв та виноробства,
- •Лабораторна робота № 1 Техніка безпеки в лабораторії технічної мікробіології. Будова мікробіологічного мікроскопу. Правила роботи з імерсійним мікроскопом
- •Техніка безпеки в лабораторії технічної мікробіології.
- •2. Будова мікроскопа і техніка мікроскопування
- •3. Основні правила користування світловим мікроскопом
- •4.Спеціальні методи мікроскопії
- •Лабораторна робота № 2 Класифікація мікроорганізмів. Приготування твердих та рідких живлячих середовищ. Методи стерилізації
- •1. Класифікація мікроорганізмів.
- •2. Поживні середовища
- •2.1. Рецепти приготування поживних середовищ
- •2.3. Методи стерилізації поживних середовищ, посуду та інструментів
- •Лабораторна робота № 3 Методи приготування і забарвлення біологічних препаратів. Приготування (посів) біологічних об'єктів для вивчення морфології міцеліальних грибів і дріжджів
- •1. Прижиттєві препарати
- •2. Фіксовані забарвлені препарати
- •Лабораторна робота № 4 Морфологія міцеліальних грибів і дріжджів. Приготування біологічних об'єктів для вивчення мікрофлори повітря, води та грунту
- •1. Дослідження міцеліальних грибів
- •1.2. Вивчення морфологічних властивостей грибів.
- •2. Дослідження дріжджеподібних грибів
- •Визначення розмірів мікробної клітини
- •Проведення роботи
- •2.2. Визначення включень глікогену в клітинах дріжджів.
- •Лабораторна робота № 5 Вивчення мікрофлори повітря, води та грунту. Приготування об'єктів для вивчення спиртового і маслянокислого бродіння
- •1. Дослідження мікрофлори повітря
- •2. Дослідження мікрофлори води
- •3. Дослідження мікрофлори грунту
- •Оцінка санітарно-мікробіологічного стану грунту.
- •Лабораторна робота № 6 Спиртове і маслянокисле бродіння. Приготування об'єктів для вивчення молочнокислого бродіння
- •1. Спиртове бродіння
- •2. Маслянокисле бродіння
- •Лабораторна робота № 7 Молочнокисле бродіння. Окислення мікроорганізмами органічних сполук
- •Лабораторна робота № 8 Аналіз антимікробної дії факторів зовнішнього середовища
- •1. Температура середовища
- •1.2.. Міцеліальні гриби.
- •2. Кислотність середовища
- •2.2. Посів бактерій.
- •2.3. Вивчення результату впливу кислотності середовища на культуру дріжджів і гнильних бактерій.
- •3.ОсмотиЧний тиск
- •3.2. Вплив концентрації повареної солі на бактерії.
- •3.3. Вплив концентрації глюкози на міцеліальні гриби.
- •4.Антисептики
- •4.1. Вплив сорбінової кислоти на міцеліальні гриби (чи дріжджі).
- •4.2. Вплив фенолу на безспорові бактерії.
- •4.3. Вплив фенолу на спорові бактерії.
- •5.Антибіотики і фітонциди
- •5.1 . Бактеріальна дія антибіотиків.
- •5.2. Антимікробна дія фітонцидів.
- •Лабораторна робота № 9 Розпізнавання мікроорганізмів
- •Визначення мікроорганізмів за культуральними і морфологічними ознаками.
1.2.. Міцеліальні гриби.
Заздалегідь заготовлені чашки Петри з застиглим суслом-агаром надписують з боку дна – 5, 25, 40 (позначення відповідають температурі вирощування гриба) і перевертають чашки кришкою нагору. Беруть заздалегідь заготовлену пробірку з водяною суспензією спор міцеліального гриба і наносять бактеріологічною петлею краплю суспензії на поверхню сусла-агару в центрі пластинки. Засіяні чашки поміщають нагору дном для вирощування культури при відповідних температурах (5, 25 і 40°С).
Вплив температури на розвиток гриба досліджується за наступними показниками: величина діаметра колоній (виміряється смужкою міліметрового паперу з боку дна чашки) і наявність спороносіння (величина пофарбованої зони колонії).
2. Кислотність середовища
Більшість мікроорганізмів, що викликають псування харчових продуктів, розвивається в нейтральному (рН 7,0), слаболужному (рН 7,2-7,3) чи слабокислому (рН ,8-6,9) середовищі. Значні відхилення концентрації водневих і гідроксильних іонів від видових потреб до реакції середовища впливають на розвиток мікробів. Змінюючи кислотність середовища, можна придушувати чи стимулювати ріст і розвиток мікробів, змінювати спрямованість біохімічних процесів, що має велике практичне значення. Так, кисле середовище впливає на гнильні бактерії, тому деякі види харчових продуктів зберігають у маринованому і квашеному виді.
Ознакою впливу кислотності середовища на розмноження бактерій і дріжджів є зниження інтенсивності росту культури на рідкому середовищі.
Матеріали та обладнання: 1) мікроскопи; 2) предметні та накривні скельця; 3) спиртівки; 4) чашки Петрі; 5) бактеріологічні петлі; 6) солодове сусло та МПБ; 7) культури дріжджів та бактерій; 8)термостат; 9) пробірки; 10) фуксин.
Проведення роботи.
2.1. Посів дріжджів.
Готують ряд з чотирьох пробірок з однаковим обсягом стерильного солодового сусла з рН 3, 5, 7, 9. У кожну пробірку вносять піпеткою однакову кількість суспензії дріжджів. Пробірки ставлять у термостат для вирощування при 30°С.
2.2. Посів бактерій.
Готують ряд пробірок, що містять стерильний МПБ зі значеннями рН 3, 5, 7, 9. У кожну пробірку, суворо дотримуючись правила стерильності, вносять бактеріологічною петлею наважки гнильних бактерій, поміщають у термостат для вирощування при 370С.
2.3. Вивчення результату впливу кислотності середовища на культуру дріжджів і гнильних бактерій.
Переглядають пробірки з посівами і струшують вміст для рівномірного розподілу вирослої культури. Інтенсивність росту оцінюють за ступенем мутності середовища і позначають умовно (кількістю хрестів). Для контролю досліду готують фіксованим, пофарбованим фуксином препарати з вмісту пробірок, у яких відзначений ріст культури; мікроскопують і замальовують.
3.ОсмотиЧний тиск
При високій концентрації розчинених у середовищі речовин і, отже, високому осмотичному тиску, у більшості мікроорганізмів настає плазмоліз клітини — протоплазма виділяє воду й ущільнюється; і цим загальмовуються процеси обміну речовин і клітина переходить у стан анабіозу. Явище плазмолізу покладене в основу консервування деяких харчових продуктів повареною сіллю і цукром. Варто пам'ятати, що деякі види мікроорганізмів здатні легко переносити високі концентрації розчинів і навіть мають потребу в них. Такі мікроорганізми звуться осмофілами. Деякі з них є збудниками псування харчових продуктів, консервованих сіллю і цукром, а також збудниками харчових захворювань мікробної природи.
Ознака несприятливого впливу на життєдіяльність мікробів підвищеного осмотичного тиску середовища — зниження інтенсивності росту бактерій, що виражається в зменшенні помутніння середовища, а в грибів — у зменшенні грибниці і спороносіння.
Матеріали та обладнання: 1) мікроскопи; 2) предметні та накривні скельця; 3) спиртівки; 4) чашки Петрі; 5) бактеріологічні петлі; 6) МПБ; 7) культури грибів, дріжджів та бактерій; 8)термостат; 9)поварена сіль; 10) фуксин; 11) глюкоза.
Проведення роботи
3.1. Плазмоліз у дріжджових клітинах.
Пекарські дріжджі розводять у дистильованій воді до незначної мутності суспензії. Краплю суспензії поміщають на предметне скло і вносять у неї кілька кристаликів повареної солі. Через кілька хвилин проводять мікроскопію при максимальному збільшенні. У разі плазмоліза протоплазма клітинах відокремлюється від оболонки і зморщується. Мікроскопічну картину варто замалювати в альбомі.