- •Студентів спеціальностей
- •7.091704 - Технологія бродильних виробництв та виноробства,
- •Лабораторна робота № 1 Техніка безпеки в лабораторії технічної мікробіології. Будова мікробіологічного мікроскопу. Правила роботи з імерсійним мікроскопом
- •Техніка безпеки в лабораторії технічної мікробіології.
- •2. Будова мікроскопа і техніка мікроскопування
- •3. Основні правила користування світловим мікроскопом
- •4.Спеціальні методи мікроскопії
- •Лабораторна робота № 2 Класифікація мікроорганізмів. Приготування твердих та рідких живлячих середовищ. Методи стерилізації
- •1. Класифікація мікроорганізмів.
- •2. Поживні середовища
- •2.1. Рецепти приготування поживних середовищ
- •2.3. Методи стерилізації поживних середовищ, посуду та інструментів
- •Лабораторна робота № 3 Методи приготування і забарвлення біологічних препаратів. Приготування (посів) біологічних об'єктів для вивчення морфології міцеліальних грибів і дріжджів
- •1. Прижиттєві препарати
- •2. Фіксовані забарвлені препарати
- •Лабораторна робота № 4 Морфологія міцеліальних грибів і дріжджів. Приготування біологічних об'єктів для вивчення мікрофлори повітря, води та грунту
- •1. Дослідження міцеліальних грибів
- •1.2. Вивчення морфологічних властивостей грибів.
- •2. Дослідження дріжджеподібних грибів
- •Визначення розмірів мікробної клітини
- •Проведення роботи
- •2.2. Визначення включень глікогену в клітинах дріжджів.
- •Лабораторна робота № 5 Вивчення мікрофлори повітря, води та грунту. Приготування об'єктів для вивчення спиртового і маслянокислого бродіння
- •1. Дослідження мікрофлори повітря
- •2. Дослідження мікрофлори води
- •3. Дослідження мікрофлори грунту
- •Оцінка санітарно-мікробіологічного стану грунту.
- •Лабораторна робота № 6 Спиртове і маслянокисле бродіння. Приготування об'єктів для вивчення молочнокислого бродіння
- •1. Спиртове бродіння
- •2. Маслянокисле бродіння
- •Лабораторна робота № 7 Молочнокисле бродіння. Окислення мікроорганізмами органічних сполук
- •Лабораторна робота № 8 Аналіз антимікробної дії факторів зовнішнього середовища
- •1. Температура середовища
- •1.2.. Міцеліальні гриби.
- •2. Кислотність середовища
- •2.2. Посів бактерій.
- •2.3. Вивчення результату впливу кислотності середовища на культуру дріжджів і гнильних бактерій.
- •3.ОсмотиЧний тиск
- •3.2. Вплив концентрації повареної солі на бактерії.
- •3.3. Вплив концентрації глюкози на міцеліальні гриби.
- •4.Антисептики
- •4.1. Вплив сорбінової кислоти на міцеліальні гриби (чи дріжджі).
- •4.2. Вплив фенолу на безспорові бактерії.
- •4.3. Вплив фенолу на спорові бактерії.
- •5.Антибіотики і фітонциди
- •5.1 . Бактеріальна дія антибіотиків.
- •5.2. Антимікробна дія фітонцидів.
- •Лабораторна робота № 9 Розпізнавання мікроорганізмів
- •Визначення мікроорганізмів за культуральними і морфологічними ознаками.
Лабораторна робота № 3 Методи приготування і забарвлення біологічних препаратів. Приготування (посів) біологічних об'єктів для вивчення морфології міцеліальних грибів і дріжджів
Для дослідження морфології мікроорганізмів готують спеціальні препарати, які в залежності від задач дослідження можуть містити живі або убиті клітини мікроорганізмів.
Препарат готують на предметних скельцях товщиною не більше 1,2-1,4 мм. Поверхня скла повинна бути старанно очищена і знежирена, для чого її обробляють хромовою сумішшю і ополаскують водою, обпалюють в полум’ї горілки. Для приготування препаратів живих мікроорганізмів використовують покрівні скельця товщиною 0,17 мм, якими покривають преларат. Чисті скельця зберігають у сухому стані або в знежирюючих рідинах.
Живі мікроорганізми досліджують в лабораторіях дуже обмежено. Занадто мала контрасність живих клітин робить цей метод придатним лише для вивчення морфології відносно великих мікрооїв, наприклад мікроскопічних грибів, мікроскопію живих бактерій проводять, в основному, для вивчення їх рухливості.
Основний метод вивчення морфології бактерій - мікроскопія вбитих (фіксованих) пофарбованих препаратів.
Фарбування препаратів проводять спеціальними барвниками, що значно підвищує контрасність препаратів і дозволяє вивчати не тільки форму бактеріальної клітини, а і її будову.
1. Прижиттєві препарати
Існує два основних способа приготування прижиттєвих препаратів мікроорганізмів: "висяча крапля" і "роздавлена крапля".
1.1.Препарат "висяча крапля". Невелику краплю суспензії мікробних клітин наносять на покровне скельце і обережно кладуть на нього предметне скло з лункою так, щоб крапля вільно вміщувалась у центрі заглиблення. Краї луночки заздалегідь змазують вазеліном, препарат перевертають і мікроскопують, цей метод застосовують, в основному, для вивчення рухливості мікроорганізмів.
1.2.Препарат "роздавлена крапля" не забарвлений (нативний). На предметне скло наносять краплю рідини, наприклад гнійного настою (при роботі з бактеріями - водопровідну воду, при роботі з мікроскопічними грибами - суміш рівних об’емів етилового спирту та гліцерину), вносять в неї небагато досліджуваних мікроорганізмів, розмішують і накривають покровним скельцем. Надлишок виступаючої рідини видаляють фільтрувальним папірцем. Вирощені на густому середовищі бактерії переносять у краплю рідини за допомогою бактеріологічної петлі, а мікроскопічні гриби - двох препарувальних голок. Культура, вирощена в рідкому середовищі, поміщуеться на предметне скло стерильною піпеткою без попереднього нанесення краплі рідини.
Мікроскопують препарат, як правило, сухою оптичною системою (об'єктиви 8х, 20х, 40х). Препарат дозволяє встановити форму клітин переважно крупних мікроорганізмів, їх розміри, розміщення, рухливість.
1.3.Препарат "роздавлена крапля" прижиттєво забарвлених мікроорганізмів. До краплі мікробної суспензії на предметному склі додають краплю слабкого розчину (1:1000) метиленового синього, або фуксину, добре розмішують, а потім накривають покрівним склом.
Так само рекомендується диференціювати живі і мертві клітини, наприклад при дослідженні пекарських дріжджів. Мертві клітини, як правило, забарвлюються швидше і яскравіше внаслідок підвищення проникаючої здатності клітинної оболонки після смерті мікроорганізму.