Работа студента на практическом занятии.

1. Определение чувствительности бактерий (Е. coli (грамотрицательные палочки) aureus (грамположительные кокки)) к антибиотикам:

а) aureus штамм 209Р - музейный штамм, выделенный еще до получения антибиотиков

б) современный штамм aureus, свежевыделенный из гноя больного.

Цель опыта: определить чувствительность бактерий к антибиотикам, указать: природную устойчивость и приобретенную устойчивость.

2. Посев с кожи рук для изучения нормальной микрофлоры. Стерильный ватный тампон смочите в физиологическом растворе, протрите влажным тампоном кожу внутренней поверхности предплечья, затем произведите посев на чашку МПА.

Занятие 18

Антибиотики (окончание). Нормальная микрофлора организма человека.

Цель самоподготовки.

После самостоятельного изучения темы студент должен знать состав нормальной микрофлоры организма человека, причины его нарушения и способы восстановления.

Исходный уровень знаний.

Для усвоения материала темы необходимо знать способы определения ферментативной активности микробов и учёта результатов.

Цель занятия.

1. Усвоить состав нормальной микрофлоры организма человека и методы его оценки.

2. Усвоить методы коррекции дисбактериоза.

План изучения темы.

1. Микрофлора организма здорового человека, значение её в физиологических условиях и в патологии.

2. Дисбактериоз. Биологические препараты для предупреждения устранения дисбактериоза.

После изучения темы студент должен уметь.

1. Освоить основные микробиологические методы изучения микрофлоры организма человека.

2. Проводить оценку качественного и количественного состава микрофлоры кожи, рото-носоглотки.

Контрольные вопросы.

Определите понятия: нормальная микрофлора организма человека; постоянная микрофлора; транзиторные микроорганизмы; потенциально опасные микроорганизмы. Назовите органы и ткани, свободные от постоянной микрофлоры. Какие микробы относятся к постоянной микрофлоре кожи и какое значение имеют транзиторные микробы? Характеристика микрофлоры различных областей организма: желудочно-кишечного тракта, органов дыхания, мочеполовых органов, глаз, наружного уха. Как изменяется микрофлора ребёнка после рождения и в течение первого года жизни? Значение нормальной микрофлоры - положительное и отрицательное. Что такое дисбактериоз, в чём он выражается, причины его возникновения и способы предупреждения и устранения. Назовите препараты, применяемые для устранения дисбактериоза, что они содержат, как применяются, что с ними происходит в организме человека. Какие препараты рекомендуется применять для детей до 6-месячного возраста и для взрослых? Какие препараты применяются при нарушении анаэробной микрофлоры и аэробной? Какие препараты можно применять одновременно с антибиотиками? Что такое бифидогенные препараты, приведите примеры.

Задания для выполнения в процессе самоподготовки.

Напишите названия препаратов, применяемых для устранения дисбактериоза, их состав, применение.

Работа студента на практическом занятии.

1. Проведите учёт опыта по определению чувствительности бактерий к антибиотикам. Запишите результаты посевов всех 3 культур бактерий. Сделайте выводы, укажите, в каких случаях наблюдается чувствительность бактерий к антибиотику, в каких - устойчивость (природная или приобретённая).

2. Посмотрите посевы с кожи рук. Приготовьте препараты - мазки из разных колоний, окрасьте по Граму, микроскопируйте, зарисуйте.

3. Приготовьте мазок из зубного налёта: на предметное стекло нанести бактериологической петлей каплю физиологического раствора. Стерильной заостренной деревянной палочкой возьмите у себя зубной налёт, внесите в каплю. Приготовленный мазок после высушивания и фиксации окрасьте по Граму, микроскопируйте, зарисуйте.

4. По результатам изучения нормальной микрофлоры сделайте выводы:

а) имеются ли в организме здорового человека различные виды микробов, в том числе сходные по морфологии с патогенными, и как их можно дифференцировать;

б) какое значение имеет наличие собственной микрофлоры аптечных работников при приготовлении лекарств и при проведении контроля лекарственных средств.

5. Изучите препараты, применяемые для предупреждения и устранения дисбактериоза.

Занятие 19

Бактериофагия.

Цель самоподготовки.

После самостоятельного изучения темы студент должен знать природу и свойства бактериофагов, методы их получения, титрования; использование в медицинской практике.

Исходный уровень знаний.

Для усвоения материала темы необходимо знать морфологию и физиологию вирусов.

Цель занятия.

1. Усвоить особенности строения бактериофагов. Освоить методы получения и титрования бактериофагов. Ознакомиться с практическим использованием бактериофагов в медицине и микробиологии.

План изучения темы.

1. История открытия и изучения бактериофагов.

2. Природа бактериофагов, структура, основные свойства, специфичность.

3. Взаимодействие бактериофагов с бактериальными клетками.

4. Выделение и титрование бактериофагов, практическое применение и условия хранения.

После изучения темы студент должен уметь.

1. Установить феномен бактериофагии на плотных и жидких питательных средах, оценить полученные результаты.

2. Подобрать бактериофаг для профилактики и терапии инфекционных заболеваний.

Дополнительная литература.

1. Бойцов, А.Г. Бактериофаги / А.Г. Бойцов, В.П. Иванов, О.Н. Ластовка. – СПб.: Медицина, 2006.

2. Быков, А.С. Атлас по медицинской микробиологии и иммунологии / А.С. Быков, А.А. Воробьев, В.В. Зверев. - М.: МИА, 2007.

3. Медицинская микробиология: учеб. пособие / под ред. А.М. Королюка, В.Б. Сбойчакова. – СПб., 1999.

4. Павлович, С.А. Медицинская микробиология / С.А. Павлович. – Минск: Вышэйшая школа, 1999.

5. Павлович, С.А. Основы вирусологии / С.А. Павлович. – Минск: Вышэйшая школа, 2001.

Дополнительный материал к занятию.

Количественные методы или методы титрования бактериофагов.

Титрование бактериофагов проводится с использованием культур чувствительных бактерий в жидких и плотных питательных средах.

Метод титрования бактериофага по Аппельману

(на жидкой питательной среде).

Готовят десятикратные разведения исследуемого бактериофага в питательном бульоне. Для этого в ряд пробирок разливают по 4,5 мл бульона. В 1-ю пробирку добавляют 0,5 мл исследуемого фага. Тщательно перемешивают и переносят в последующие пробирки (из пробирки в пробирку) по 0,5 мл соответствующего разведения фага с уменьшением его концентрации в десять раз. Получают разведения от 10^-1 до 10^-9 степени. Затем в пробирки вносят по 1 капле суточной культуры соответствующих бактерий. После инкубации в течение суток определяют титр фага. За титр бактериофага принимают то его максимальное разведение, при котором наблюдается полный лизис культуры (просветление среды).