- •1.1. Определение и характеристика
- •1.2. Состав микрофлоры основных биотопов человека
- •2. Факторы патогенности анаэробных микроорганизмов
- •2.1. Роль анаэробной эндогенной микрофлоры в патологии человека
- •3. Основные формы анаэробной инфекции
- •3.1. Плевролегочная инфекция
- •3.2. Диабетическая инфекция стопы
- •3.3. Бактериемия и сепсис
- •3.4. Столбняк
- •3.5. Диарея
- •3.6. Хирургическая анаэробная инфекция ран и мягких тканей
- •3.7. Газообразующая инфекция мягких тканей
- •3.8. Клостридиальный мионекроз
- •3.9. Медленно развивающаяся некротическая раневая инфекция
- •3.10. Внутрибрюшинная инфекция
- •3.11. Характеристика экспериментальных анаэробных абсцессов
- •3.12. Псевдомембранозный колит
- •3.13. Акушсрско-гинеколошческие инфекции
- •3.14. Анаэробная инфекция у онкологических больных
- •4. Лабораторная диагностика
- •4.1. Исследуемый материал
- •4.2. Этапы исследования материала в лаборатории
- •4.3. Прямое исследование материала
- •4.4. Способы и системы для создания анаэробных условий
- •4.5. Питательные среды и культивирование
- •Т а б л и ц а 7. Среды рекомендуемые для первичного выделения анаэробных микроорганизмов
- •Т а б л и ц а 8. Селективные агенты для облигатных анаэробов
- •5. Антибактериальная терапия анаэробной инфекции
- •5.1. Характеристика основных антимикробных препаратов, используемых при лечении анаэробной инфекции
- •5.2. Комбинации бэта-лактамных препаратов и ингибиторов бэта-лактамазы
- •5.3. Клиническое значение определения чувствительности анаэробных микроорганизмов к антимикробным препаратам
- •6. Коррекция микрофлоры кишечника
- •7. Заключение
4.5. Питательные среды и культивирование
Исследование анаэробных микроорганизмов осуществляется в несколько этапов. Общая схема выделения и идентификации анаэробов представлена на рисунке 1.
Важным фактором развития анаэробной бактериологии является наличие коллекции типовых штаммов бактерий, включая референсштаммы из коллекций АТСС, CDC, VPI. Особенно это важно для контроля питательных сред, для биохимической идентификации чистых культур и оценки активности антибактериальных препаратов. Имеется широкий спектр основных сред, которые используются для приготовления специальных питательных сред для анаэробов.
Питательные среды для анаэробов должны отвечать следующим основным требованиям: 1) удовлетворять питательным потребностям; 2) обеспечивать быстрый рост микроорганизмов; 3) быть адекватно редуцированными. Первичный посев материала осуществляется на чашки с кровяным агаром или элективные среды, приведенные в таблице 7.
Все чаще выделение облигатных анаэробов из клинического материала осуществляется на средах, которые включают селективные агенты в определенной концентрации, позволяющие выделить определенные группы анаэробов (20, 23) (таблица 8).
Длительность инкубирования и частота исследования засеянных чашек зависит от исследуемого материала и состава микрофлоры (таблица 9).
Исследуемый материал Отделяемое ран, Содержимое абсцессов, Трахеобронхональный аспират и др.
Транспортировка в лабораторию: в киприце, в специальной транспортной среде (немедленное помещение материала в среду)
Микроскопия материала
Окраска по Граму |
Культивирование и выделение чистой культуры
Аэробные чашки для 35±2°Ссравнения с 18- 28 часованаэробами 5-10 % С02
Газ-Пак (Н2 + С02) 35±2°С
от 48 ч до 7 днейми
2. Кровяной агар Шедлера
35±2°С от 48 ч до 7 дней
анаэробов
от 48 ч до 2-х недель 4. Жидкая среда (тиогликолевая) |
Идентифика-ция.Чистые культуры из изолированных колонии 1.Окраска по Граму и Ожешко для выявлления спор 2.Морфология колоний 3.Связь типа колонии с кислородом 4.Предварительная дифференциация по чувствительности к антимикробным препаратам 5.Биохимические тесты
Определение чувствительности к антибиотикам 1.Метод разведения в агаре или бульоне 2.Метод бумажных дисков (диффузии) |
Рис. 1. Выделение и идентификация анаэробных микроорганизмов