Руководство по иммунофармакологии / 013306

Пирогенез 203

Рис. 82. А - расположение канюли для перфузии в третьем желудочке. Б- регистрация ректальной температуры у кошки. Введение 75 нг Shigella dysenteriae в желудочек вызывает пирексию, которая снижается внутрибрюшиннымвведением парацетамола. Перфузат из третьего желудочка собран до (I) и после (II) введения Shigella, а также после введения парацетамола (III). B- сокращения полосок дна желудка крыс свидетельствуют о простагландиновой актиности перфузатов третьего желудочка [Feldberg W., Gupta К.Р-J. Phisiol., 1973, 228, 41-53].

интерлейкин-1 вызывает лихорадку в отличие от ПГЕ,. Недавно обнаружено, что салицилат натрия, препарат, подавляющий простагландинсинтетазу, уменьшает лихорадку, вызванную пирогеном или внутримозговой инъекцией ПГЕ1.

Становится ясным, что ПГЕ, не является единственным посредником между интерлей- кином-1 и лихорадочной реакцией и что некоторые нестероидные препараты могут оказывать антипиретическое действие посредством иных механизмов, дополняющих подавление синтеза простагландинов. Хотя точная роль ПГЕ1 в патогенезе лихорадки остается неясной, в настоящее время на основании экспери-

ментальных данных можно сделать заключение о том, что ПГЕ, играет по крайней мере частичную роль в развитии лихорадки при введении пирогена.

Известно, что во многих системах действие ПГЕ, опосредуется повышением внутрикле точного уровня циклического нуклеотидациклического аденозин-3',5'-монофосфата (цАМФ). Уровень цАМФ в спинномозговой жидкости возрастает во время лихорадки, индуцированной пирогеном, а также при введении пирогена в передний гипоталамус. Кроме того, подавление метаболизма цАМФ ингибитором фосфодиэстеразы, таким как теофил-лин, усиливает пирогенную реакцию на ПГЕ,

204Глава 19

ипироген. Уровни цАМФ в нейронах модулируются рядом нейропередатчиков, и в патогенезе лихорадки участвует контроль некоторых температурно-чувствительных нейронов посредством изменения внутриклеточного цАМФ, который в свою очередь регулируется стимулированной пирогеном продукцией ПГЕ1, а также рядом других передатчиков.

Одним из таких нейропередатчиков, участвующих в контроле лихорадки, является аргининвазопрессин. Интерес к взаимосвязи лихорадки и выделения аргининвазопрессина в септальной области головного мозга впервые возник при обнаружении сниженного ответа на экзогенный пироген беременных животных перед родами (или сразу же после родов). При перфузии септальной области головного мозга небеременных животных во время лихорадки, индуцированной эндотоксином, определяется подъем уровня аргининвазопрессина. Предполагается, что аргининвазопрессин играет ингибиторную роль, поскольку перфузия септальной области головного мозга аргининвазопрессином подавляет лихорадочную реакцию на эндотоксин. У новорожденных и беременных животных наблюдается пониженная реакция на эндотоксин, но она не связана с неспособностью вырабатывать интерлейкин-1 или с незрелостью механизмов, контролирующих температуру. В действительности сниженный ответ связан с выделением аргининвазопрессина. Неизвестно, почему у беременных и новорожденных животных ограничена пирек-сия; неясно также,

вкакой степени аргининвазопрессин вовлекается в физиологическую регуляцию пироксического ответа небеременных зрелых животных. Следует отметить, что аргининвазопрессин также вызывает выделение адренокортикотропного гормона, который в свою очередь стимулирует выброс кортикостероидов надпочечниками. Кортикостероиды подавляют лихорадочные реакции на эндотоксин и обладают другими противовоспалительными эффектами (см. главу 24).

Значение лихорадки

Многие исследования вносят значительный вклад в получение новой ценной информации о процессах, в результате которых иммунные и неиммунные защитные механизмы вызывают лихорадку. Пирексия является филогенетически примитивной реакцией. Рыбы, амфибии, рептилии, птицы и млекопитающие обладают

фебрильной реактивностью в отношении бактериальной инвазии. Так, экзотермы и эндотермы развивают фебрильные реакции, и их индукция в обеих группах также вызывает образование эндогенного пирогена. Остается неясным, какое значение имеет лихорадка для выживания.

Говоря в общем, лихорадка является либо эпифеноменом активации защиты организма, либо играет специфическую роль в усилении этой защиты. Если справедливо последнее, то лихорадка может выполнять две полезные функции: 1) оказывать необходимое влияние на рост, пролиферацию или токсичность микроорганизмов; 2) повышать эффективность механизмов защиты организма.

Результаты, полученные in vitro, показывают, что температура, достигаемая при лихорадке, может быть летальной для ряда патогенных организмов. Некоторые пневмококки, гонококки и спирохеты разрушаются при температуре от 40 до 41 °С. В других исследованиях обнаружено, что температура в диапазоне 37-41 °С нарушает метаболическую активность некоторых микроорганизмов, подавляя их рост.

Например, у Salmonella typhimurium при повышенной температуре снижается способность к синтезу сидерофоры (транспортные белки железа). Таким образом, лихорадка может нарушать рост или реально истреблять некоторые патогены. Однако необходимо отметить, что другие патогены, особенно вирусы, более вирулентны при температурах, достигаемых при лихорадке.

Доказательства стимуляции защитных сил организма при повышении температуры могут быть суммированы следующим образом: 1) увеличивается продукция интерферонов; 2) возрастает трансформация лимфоцитов; 3) повышается лизосомный аутолиз опухолевых клеток; 4) усиливаются функции нейтрофилов, способность к локомоции (рис. 83) и фагоцитоз, а также внутриклеточная гибель. Опять-таки следует отметить, что представленные экспериментальные данные в каждом из этих случаев не всегда согласуются между собой и, кроме того, основаны на исследованиях in vitro. Отражают ли эти эксперименты in vitro способность организма к выживанию при атаке патогенов в условиях повышенной температуры?

У эктотермов получены некоторые противоречивые данные. Контроль температуры всего тела в эксперименте у них осложняется в меньшей степени, чем у эндотермов, которые

Пирогенез 205

Рис. 83. Изменение скорости движения нейтрофильных лейкоцитов человека в зависимости от температуры

[NahasG.G., Tannieres M. L., Lennon J. F- Proc. Soc. Exp. Biol. Med., I971, 138, 350-352].

обладают рядом гомеостатических механизмов, регулирующих температуру тела с нижним пределом. На рис. 84 показано, что понижение температуры тела у рыб драматически уменьшает выживаемость при инфекции, вы-

званной Aeromonas Hydrophila. Сходные ре-

зультаты получены у игуан. У млекопитающих результаты экспериментально вызванной гипер- или гипотермии с целью оценки выживае-

мости при инфекциях весьма противоречивы: в одних исследованиях отмечается снижение выживаемости при уменьшении температуры, в других при увеличении. Отчасти это может объясняться тем, что физиологическое функционирование млекопитающих настроено на работу в нижних температурных пределах, а оценка выживаемости представляет собой достаточно грубый метод определения влияния

Рис. 84. Выживаемость золотых рыбок,

инфицированныхAeromonas hydrophila и

содержавшихсяпритемпературе25,5; 28 и 30,5 °С. Десятирыбкамбылаобеспечена поведенческая терморегуляция ивыбор среднейтемпературытела32,7 °С.

Количество рыбок в каждой группе указановскобках[Covert J. В., Reynolds W. W.-Nature, 1977, 267, 43-45].

206 Глава 19

изменений температуры тела на способность осуществлять защиту от инвазии патогена.

Попытки вмешательства в лихорадку у рептилий с помощью антипиретических препаратов и оценка их последствий также дают противоречивые результаты. Пустынные игуаны, зараженные A. hydrophila, выживают меньше, если лихорадка снимается салицилатом натрия; если же лихорадка развивается при использовании салицилата натрия и повышении температуры окружающей среды, то уменьшения выживаемости не наблюдается. Попытки же воспроизведения сходных экспериментов на млекопитающих не дали однозначных результатов.

Изучение корреляции между выраженностью лихорадки и выживаемостью показывает, что лихорадка представляет защиту от последствий инфекции, но, как и при всех корреляциях, причинно-следственные связи не установлены.

Заключение

Лихорадка является перенастройкой нормальных терморегуляторных центров, локализующихся преимущественно в преоптической области переднего гипоталамуса, на более высокую температуру. Гомеостатические механизмы температурного контроля при лихорадке

продолжают функционировать, но в направлении восстановления именно этой высокой температуры.

Ряд иммунных и неиммунных реакций организма на инвазию чужеродными организмами или клетками приводит к образованию интерлейкина-1, эндогенного пирогена, который вызывает перенастройку терморегуляторных центров (возможно, опосредованно-через ПГЕ1 и цАМФ). Аргининвазопрессин может контролировать выраженность проявлений лихорадки в ответ на пироген. Существуют ограниченные свидетельства того, что лихорадка помогает защитным силам организма контролировать инвазию патогена.

20 Лейкоцитоз

М.М. Дейл (М.М. Dale)

Лейкоцитозэто увеличение количества лейкоцитов в крови выше 107 мл, что является одним из общих проявлений некоторых типов инфекций и воспаления. В большинстве случаев такое увеличение связано с нейтрофильными гранулоцитами; реже наблюдается рост числа лимфоцитов; необычным является лейкоцитоз с вовлечением других клеток белой крови. Повышение количества нейтрофильных лейкоцитов, называемое также нейтрофилией, будет рассмотрено в данной главе.

Образование нейтрофилов

Нейтрофильные гранулоциты образуются в костном мозге из полипотентной стволовой клетки, обеспечивающей рост всех клеток крови и отвечающей за гемопоэз в течение всей жизни. Каждую минуту в организме человека образуется около 120 млн гранулоцитов, а также 150 млн эритроцитов и других клеток крови. Стволовые клетки, отвечающие за столь высокую продуктивность, происходят из относительно небольшого количества полипотентных стволовых клеток, закладываемых во время эмбриогенеза. Родоначальные стволовые клетки способны к самообновлению, так что популяция полипотентных клеток поддерживается на протяжении всей жизни. Эти клетки встречаются в костном мозге с частотой примерно 1 : 1000 и определяются по способности к формированию колоний в селезенках облученных мышей и крыс. Их обозначают как колониеобразующие единицы селезенки (или КОЕ-с). Помимо самообновления, стволовые клетки при дифференциации образуют особые прогениторные клетки, которые необратимо коммитированы в направлении развития како- го-либо из шести типов клеток крови.

Совершенно очевидно, что между дифференциацией и самообновлением поддерживается строгий баланс. Прогениторные клетки распознаются по их способности образовывать колонии соответствующих линий в полужидком агаре в присутствии особых «ростовых

факторов», или «колониестимулирующих факторов» (КСФ). Современные методы позволяют культивировать одиночную стволовую клетку, которая затем может развиваться, давая клоны потомков специфической гемопоэтиче-ской линии. Возможно, что развитие любого типа клеток крови (нейтрофилов, моноцитов, эритроцитов, тромбоцитов и т.д.) контролируется рядом ростовых факторов, действующих последовательно и ограниченных как по своему биологическому эффекту, так и по типу клетокмишеней, на которые они влияют. Колониестимулирующие факторы исследованы главным образом in vitro, и их точное отношение к событиям in vivo неясно. Тем не менее недавно показано, что длительная инфузия рекомбинантного человеческого колониестимулирующего фактора активирует гемопоэз. Непрямым свидетельством участия КСФ в регуляции нейтрофилов in vivo является корреляция колебаний уровня КСФ в моче с изменением количества нейтрофилов у больных циклической нейтропенией.

Факторы, влияющиенаразвитиенейтрофилов

Все КСФ, ответственные за развитие клеток крови, относятся к гликопротеинам, активным в концентрациях 10-12-10-10 М. Они не просто запускают формирование колоний в агаре, но и должны длительное время присутствовать в среде как для поддержания пролиферации коммитированных прогениторных клеток, так и для их выживаемости. Ранние прогениторные клетки нейтрофильной линии способны развиваться либо в гранулоциты, либо в макрофаги. Известны четыре КСФ, участвующие в контроле развития гранулоцитов и макрофагов у мышей, и четыре-пять-у человека (табл. 23). Эти факторы многократно переименовывались, в том числе в связи с их белковыми характеристиками, что обусловило определенные трудности при разработке номенклатуры, от которой требовались в равной мере точная описательность и неамбициозность. Используемые здесь термины предложены Metcalf в

208 Глава 20

Таблица 23. Известные колониестимулирующие факторы гранулоцитов и макрофагов

'(к.с.)-источником является кондиционированная среда указанных клеток.

РФТК - ростовой фактор тучных клеток; ИЛ-З-интерлейкин-3; БОА - бурстобразующая активность; ФСПК-фактор, стимулирующий Р-клетки; МГИ-МС- макрофаго-гранулоцитарный индуктор (специфический для макрофагов); МГЙ- ГМС-макрофаго-гранулоцитарный индуктор (специфический для макрофагов и гранулоцитов); МГИ-ГС-макрофаго- гранулоцитарный индуктор (специфический для гранулоцитов); КСФ-1-колониестимулирующий фактор I. [По Metcalf (1986); см. также Clark, Kamen (1987) и Sieff (1987).]

1986 г. Так, ГМ-КСФ обозначает фактор, сти-	ных клеток и имеют важное значение для
мулирующий образование гранулоцитов и	пролиферации и выживаемости этих клеток.
макрофагов; Г-КСФ стимулирует преимущест-	КСФ не обладают какой-либо гомологией
венно развитие гранулоцитов, а М-КСФ-раз-	последовательности с другими ростовыми
витие макрофагов. Мульти-КСФ обозначается	факторами (фактор роста эпидермиса, ростовой
фактор, стимулирующий не только гранулоциты	фактор из тромбоцитов или интерлейкин-2) или

имакрофаги, но и эритроидные клетки, с любыми другими известными белками. Не

эозинофилы, тучные клетки, мегакариоциты и стволовые клетки.

Активность ряда факторов перекрывается, и, как уже указывалось, по крайней мере два, а возможно, и три фактора имеют важное значение для полного развития клеточной линии. Так, факторы I класса, такие как мультиКСФ и ГМ-КСФ, действуют на полипотентные стволовые клетки и незрелые прогениторные клетки. Эти факторы неспецифичны по отношению к какой-либо конкретной клеточной линии и необходимы при дифференциации. Факторы II класса, Г-КСФ и М-КСФ, влияют на дифференциацию более зрелых прогенитор-

обладают они гомологией последовательности и с известными в настоящее время продуктами онкогена, хотя c-fms-протоонко-генные продукты родственны рецептору для мышиного КСФ. Из этого следует, что КСФ не происходят из одной общей молекулы-предшественника. Однако у человека гены рецепторов ГМ-КСФ и М-КСФ физически связаны с 5-й хромосомой. Поэтому вполне вероятно, что, хотя разные КСФ весьма различаются по полипептидной структуре, они обладают генетическими признаками, позволяющими координировать их на уровне активации транскрипции, которая параллельна действию КСФ при

стимуляции пролиферации макрофагов и гранулоцитов.

Все нормальные ткани способны синтезировать один или более КСФ, хотя и в минимальных количествах. По-видимому, синтез четырех главных КСФ in vivo осуществляется в основном фибробластами, эндотелиальными клетками, лимфоцитами и макрофагами-кле- тками, широко распространенными во всех органах, которые, вероятно, первыми контактируют с внедрившимися микроорганизмами. Т-лимфоциты, стимулированные лектинами, синтезируют ГМ-КСФ и мульти-КСФ вместе с другими лимфокинами, например интерлей- кином-2. Наиболее богатым источником ГМКСФ и Г-КСФ для экспериментальных исследований является «кондиционированная среда» культивируемых легочных тканей мышей, которым вводится эндотоксин. Из 1000 мышиных легких можно получить только 5-12 мкг ГМ-КСФ и 2-4 мкг Г-КСФ. Некоторые КСФ клонированы (см. табл. 23), что в будущем обеспечит доступность больших количеств чистых КСФ.

ЭффектыКСФ

КСФ действуют на клетки-мишени через специфические высокоаффинные рецепторы клеточных мембран. Каждый КСФ обладает собственным рецептором, а каждая клетка-ми- шень имеет несколько типов рецепторов к КСФ. Связывание КСФ с рецепторами при 0 °С происходит очень быстро и практически необратимо. При связывании одного вида рецепторов КСФ наблюдается отрицательная модуляция связывания других видов рецепторов КСФ. Влияние КСФ на клетки-мишени включает по крайней мере четыре разных, но взаимосвязанных эффекта.

1.Они прямо стимулируют клональную пролиферацию предшественников гранулоцитов и макрофагов, а также прогениторных клеток при концентрации 10-12-10-10 М (рис. 85). Следует отметить, что все другие известные вещества, стимулирующие пролиферацию, делают это непрямым способом, индуцируя синтез КСФ.

2.В исследованиях in vivo они способствуют выживаемости прогениторных и зрелых терминальных клеток.

3.Они способствуют коммитированию бипотенциальных прогениторных клеток гранулоцитов и макрофагов к ограниченному пути дифференциации (либо к формированию гра-

Лейкоцитоз 209

нулоцитов или макрофагов). Этот процесс необратим; он происходит в течение одного или двух клеточных делений и требует длительного присутствия КСФ.

4. Они способны стимулировать ряд функций зрелых конечных клеток: а) КСФ индуцируют изменения формы, адгезию и экспрессию мембранных антигенов нейтрофилов и макрофагов, а также облегчают фагоцитарную активность; б) КСФ стимулируют синтез арахидоновой кислоты, простагландина Е2, интер- лейкина-1, интерферона и активатора плазминогена, а также индуцируют продукцию перекисей; в) КСФ усиливают антитело- и комплементзависимую цитотоксичность в отношении микроорганизмов; г) ГМ-КСФ является фактором хемотаксиса нейтрофилов.

Установлены два уровня КСФ-контроля популяции гранулоцитов и макрофагов.

Базальный контроль. Базальный уровень продукции и дифференциации клеток поддерживается КСФ, которые генерируются стромальными клетками костного мозга.

Реакция на инфекцию. Эндотоксины и другие продукты микроорганизмов могут стимулировать образование КСФ в периферических тканях, особенно при действии на моноциты. Так, при экспериментальном введении эндотоксина отмечается 1000-кратное увеличение циркулирующих КСФ, особенно ГМКСФ и Г-КСФ, а также повышение их концентрации во всех тканях. В эту реакцию вовлекается интерлейкин-1 (см. главу 15). Эффект возникает через несколько минут после введения и достигает максимума через 3-6 ч. Вероятно, при локальном введении КСФ синтезируется местно. КСФ образуется в периферических тканях и выделяется в циркуляцию, связываясь в костном мозге и селезенке (показано при изучении распределения радиоактивно меченного вещества), где он оказывает влияние на пролиферацию гранулоцитов и макрофагов. Местно КСФ может усиливать функциональную активность клеток в месте инфекции.

Упрощенная версия базального контроля КСФ продукции лейкоцитов, а также действие инфекции показаны на рис. 86.

Значение КСФ при инфекции установлено Metcalf (1987). Ясно, что большое значение в реакциях организма на инвазию микроорганизмов имеют Т- и В-клетки. Но при первичной инфекции для развития ответа лимфоцитов требуется от 4 до 7 дней, что недостаточно для борьбы с высокопатогенными, быстро делящимися организмами. Давно известно, что

210 Глава 20

Рис. 85. Кривые доза-эффект образования мышиных гранулоцитомакрофагальных колоний в мягком агаре под действием рекомбинантных ГМ-КСФ, мульти-КСФ и Г-

КСФ человека. (По Metcalf, 1987.)

в критическом, раннем и иммунологически неспецифическом ответе участвуют нейтрофилы и макрофаги. Вероятно, что система КСФ имеет важное значение для мобилизации и активации этих клеток.

Человеческий рекомбинантный Г-КСФ вызывает дозозависимое увеличение числа нейтрофилов у мышей (рис. 87). Аналогичный эффект наблюдается у обезьян; у них также отмечается сокращение периода восстановления нейтрофилов при миелодепрессии, вызванной циклофосфамидом. Человеческий рекомбинантный ГМ-КСФ у обезьян увеличивает количество циркулирующих лейкоцитов. В обоих случаях для получения эффектов требуется постоянная инфузия фактора. В предварительных исследованиях рекомбинантный ГМ-КСФ отменял нейтропению у больных СПИДом.

Гемопоэтические факторы потенциально терапевтически целесообразны при необходимости увеличения количества лейкоцитов у больных с миелосупрессией, а также для повыше-

ния защитных сил организма при инфекции, когда они подавлены. До сих пор не установлена их роль в лечении лейкоза.

Практически вся экспериментальная работа по изучению роли КСФ проведена in vitro. До сих пор неясно взаимоотношение эффектов конкретного КСФ и событий in vivo, хотя последовательность развития нейтрофилов давно хорошо известна. Так, первые распознаваемые предшественники нейтрофилов появляются в костном мозге, где они проходят две фазы развития. Первоначальная пролиферация и дифференциация (миелобластпромиелоцит- миелоцит-метамиелоцит) включают шесть делений и занимают около 6 дней; поздняя фаза постмитотического созревания длится примерно 8 дней (рис. 88). Во время второй фазы клетки приобретают функциональные характеристики: способность прикрепляться к поверхности, отвечать на хемотаксины, осуществлять фагоцитоз и т.д. Ia-антигены присутствуют в ранних клетках и исчезают на стадии

Лейкоцитоз 211

Рис. 86. Упрощенная схема участия гемопоэтических ростовых факторов в контроле образования лейкоцитов.

Действие мульти-КСФ (или интерлейкина-3) на полипотентные стволовые клетки показано у мышей, но пока не показано у человека. Другие КСФ, вероятно, образуются в низких концентрациях покоящимися стромальными клетками (эндотелиальными клетками и фибробластами). При микробной инфекции эндотоксин вызывает выделение ИЛ-1 моноцитами, что приводит к повышенному выделению ГМ-КСФ, ГКСФ и М-КСФ. Кроме того, макрофаги, стимулированные эндотоксином, образуют Г-КСФ и М-КСФ. Лектины и, возможно, антигены также стимулируют выделение Т-клеточных гемопоэтических факторов. Гран/моно - гранулоциты/моноциты; светлыми стрелками обозначено превращение; темными стрелками - образование, выделение; зигзагообразными стрелками-действие. Непрерывная линия означает базальный контрольный механизм, пунктирнаяуказывает указывает на инфекцию. (По Sieff, 1987.)

промиелоцитов. Примерно 17% нейтрофилов в костном мозге находится в пролиферирую-щем отсеке, остальные же покоятся в отсеках для созревания и хранения, что позволяет поддерживать в течение нескольких дней поступление нейтрофилов в циркуляцию.

Получены некоторые достаточно противоречивые данные об избыточной продукции нейтрофилов в костном мозге; эти клетки гибнут вплоть до поступления «команды» на увеличение их количества.

Простагландины серии Е, как и некоторые препараты лейкоцитарных интерферонов, подавляют пролиферацию колониеформирующих единиц. Синтез и выделение двух противоположно направленных типов медиаторов, а именно КСФ и ПГЕ1 могут иметь важное значение для регуляции миелопоэза.

Предполагается, что зрелые гранулоциты по принципу обратной связи оказывают негативное влияние на гранулопоэз. В исследованиях in vitro зрелые клетки и(или) их продукты уменьшают образование КСФ у макрофагов и подавляют колониеобразование. Есть дан-

ные о том, что лактоферрин, входящий в состав специфических гранул, принимает участие в этой ингибиторной активности. Лактоферрин (более насыщенная железом молекула по сравнению с аполактоферрином) обладает мощным бактериостатическим эффектом. Один нейтрофил содержит 3-6 пкг лактоферрина; этого количества вполне достаточно для значительного подавления КСФ моноцитами (105), но недостаточно для подавления продукции КСФ, стимулированной эндотоксином (см. ниже).

Распределение нейтрофилов

Зрелые нейтрофилы могут поступать в циркуляцию или храниться в костном мозге, что обеспечивает их резервный пул, составляющий примерно 8-10 клеток (см. рис. 88). Резервный пул составляет приблизительно 50% клеток костного мозга. Нейтрофилы (около 1010) ежедневно выделяются в кровоток. Подсчитано, что плотный орган с такой продукцией

212 Глава 20

Рис. 87. Влияние рекомбинантного человеческого Г-КСФ на количество лейкоцитов в крови мышей.

Инъекции каждой дозы проводились 3 раза в день в течение 6 дней. Б-без введения; И-инъекция препарата (растворитель: сыворотка - солевой раствор). (По Metcalf, 1987.)

клеток увеличивался бы на 50-100 г в день.	но связывается с гранулоцитами после стадии
В крови содержится примерно 6 х 1010	миелоцитов. Собственные клетки (меченые и
нейтрофилов, половина из которых составляет	реинфузированные) быстро распределяются в
циркулирующий гранулоцитарный пул (ЦГП), а	общем циркулирующем пуле нейтрофилов; из-
остальныемаргинированный гранулоцитарный	менение радиоактивности в крови отмечается
пул (МГП). Нормальное содержание нейт-	после построения экспоненциальной кривой с
рофилов в крови-примерно 3500/мкл; падение	периодом полураспада 5,3 или 6,7 ч в разных
ниже уровня 500 клеток/мкл обусловливает	исследованиях. С другой стороны, 51Сг метит
выраженную чувствительность к инфекции.	все клетки крови, поэтому необходимо отделе-
Время полураспада нейтрофилов в цирку-	ние нейтрофилов либо перед инфузией, либо в
ляции определяется при измерении кинетики	образцах, полученных для измерения. В ис-
клеток, меченных диизопропилфлюорофосфа-	следованиях с использованием 51Сг отмечается
том, содержащим 32Р (ДФ 32Р), 3Н-тимиди-ном,	продолжительность полужизни, равная 16 ч.
(3НТдн) радиоактивным хромом (51Сг) или	Оба метода включают обработку нейтрофилов
окисью 111I. ДФ 32Р достаточно селектив-	in vitro, что может быть источником ошибок.