Руководство по иммунофармакологии / 013306

				Лимфоциты	79
сти к простым химическим гаптенам, таким как	торая развивается в течение 96 ч или дольше и
2,3-Динитрохлорбензол (ДНХБ), ковалент-но	характеризуется высокой степенью индура-ции
связанным с белками кожи. Определение	кожи (рис. 35). Такой тип реактивности может
кожной реакции ГСЗТ к антигену инфекцион-	сохраняться многие годы после иммунизации.
ного организма не означает непременного	Второй	тип	ГСЗТ,	известный	как
участия ГСЗТ в механизме защиты и вовсе не	«сенситивность типа Джонса-Мота, характе-
обязательно свидетельствует о высокой степени	ризуется высокой степенью неустойчивости;
резистентности организма. Устойчивость к	реакция наблюдается 7-14 дней после сенсиби-
инфекции и ГСЗТ могут быть направлены	лизации. Реакции этого типа достигают своего
против разных антигенов, особенно у таких	максимума к 24-му часу и исчезают к 48-му
сложных микроорганизмов, как бактерии и	часу, при этом толщина кожи увеличивается
паразиты. В случае менее сложных микроор-	незначительно или не изменяется. Реакции
ганизмов (например, вирусов) резистентность и	ДжонсаМота регулируются супрессорными
ГСЗТ могут быть вызваны одним антигеном.	клетками в большей степени, чем реакции ту-
Роль Т-клеток в устойчивости организма и	беркулинового типа. Подавление активности
ГСЗТ подтверждается экспериментами с ис-	супрессорных клеток может превратить реак-
пользованием методов пассивного переноса.	цию Джонса-Мота в реакцию туберкулинового
Показано, что резистентность организма к	типа. Реакции контактной чувствительности
микроорганизмам (таким как туберкулезные	регулируются супрессорными клетками				таким
бациллы) реакция ГСЗТ на туберкулин и кон-	же образом, как реакции Джонса-Мота.
тактная чувствительность к гаптенам (напри-	Гистологически реакции ГСЗТ на 24-48-й
мер, к ДНХБ) могут быть перенесены суспен-	час представлены главным образом инфиль-
зией периферических Т-клеток (за исключением	тратами мононуклеарных клеток, состоящих из
тимоцитов) от сенсибилизированных доноров; с	равного количества лимфоцитов и макрофагов.
помощью В-клеток или антител они не пере-	Эти клетки расположены в основном
носятся. Макрофаги сами по себе неактивны;	периваскулярно. При реакциях Джонса-Мота и
перенос невозможен и при использовании бес-	контактной чувствительности может опре-
клеточных экстрактов Т-клеток. Имеющиеся	деляться значительное количество базофиль-
сообщения о пассивном переносе ГСЗТ с по-	ных лейкоцитов с характерным расположением
мощью сыворотки вызывают сомнения: дей-	под эпидермисом, ввиду чего эти реакции
ствительно ли индуцировалась истинная ГСЗТ	получили название «кожная базофильная ги-
или же имела место реакция типа феномена	персенситивность». Предполагается, что базо-
Артюса.	фильный инфильтрат зависит от регуляции
Как у человека, так и у экспериментальных	реакции на периферии супрессорными клетка-
животных описаны два типа реакции ГСЗТ. Это	ми.

«истинная туберкулиновая реакция», ко-

Рис. 35. Сравнительные данные о времени развития задержанныхреакцийгиперсенситивноституберкулинового типа (светлые кружки) и типа Джонса-Мота (темные кружки).

80 Глава 7

Рецепторы Т-клеток для антигена

Рецепторы для антигена В-клеток являются иммуноглобулиновыми молекулами, связанными с клеточной поверхностью. В течение длительного времени считали, что антигенные рецепторы Т-клеток несут идиотипические детерминанты, аналогичные наблюдаемым на антигенреактивном участке иммуноглобулиновых (Ig) молекул. В таком случае приготовленные антиидиотипические антитела к специфическому Ig могут «включать» или «выключать» Т-клетки, стимулируя Т-клеточные иммунные ответы или вызывая специфическую толерантность. Таким бразом, допускается, что антигенные рецепторы на Т-клетках имеют, по-существу, такие же участки распознавания, что и антитела. Однако до последнего времени структуры, подобные вариабельным доменам Ig, не были обнаружены. Использование метода клонирования ДНК позволило приготовить цепи рецепторов Т-клеток и затем определить их аминокислотную последовательность. Обнаружено, что данная молекула состоит из двух доменов, соединенных двумя дисульфидными мостиками, причем размеры и общая структура доменов были такими же, как у Ig. Более того, N-концевой домен был вариабельным, а С-концевой-константным, т.е. как у Ig. Структурно рецептор Т-клеток является мономером, в котором две цепи образуют одно место связывания, а каждое место независимо от других встроено в клеточную мембрану. Две гипервариабельные области обеих цепей тесно примыкают друг к другу, образуя антигенреактивный центр. Данная структура соответствует модели единичного рецептора ГКГС-рестриктированного Т-кле-точного распознавания. Согласно этой модели, антиген распознается совместно с молекулами клеточной поверхности главного комплекса гистосовместимости.

Пролиферация 'I-лимфоцитов in vivo

Главным событием иммунного ответа in vivo является экспансия специфического клона T- или В-клеток после поступления антигена. По теории, основывающейся на полученных in vitro данных, антиген представляется рецепторам Т- клеток макрофагами или дендритными клетками, такими как клетки Лангерганса в коже. В результате этого запускается пролиферация Т- клеток, которая функционально расширяет

клон таким образом, чтобы в циркуляцию поступило достаточное количество клеток для реакции с антигеном на периферии и для запуска биологических ответов. Индуцированная антигеном пролиферация Т-клеток наиболее выражена в паракортикальных областях лимфатических узлов, дренирующих область пересадки кожного аллотрансплантата или место аппликации химического сенсибилизирующего агента. Увеличение количества больших лимфоцитов в S-фазе клеточного цикла, которые легко распознаются по их высокопиронинофильной или базофильной цитоплазме, достигает пика к 4-му дню после антигенной стимуляции (рис. 36). В любое время до 20% лимфоцитов могут быть в S-фазе; определяется также большое количество митозов. Число делящихся клеток в любой отрезок времени значительно превышает их расчетное количество при условии деления клеток одного клона. Предполагают, что большинство клеток отвечает на неспецифический стимул. Такими стимулами могут быть лимфокин ин- терлейкин-2 или фактор роста Т-клеток, которые секретируются другими активированными лимфоцитами. T-лимфоциты несут рецепторы для ИЛ-2, который обладает антигенно-стью и у человека распознается моноклональ-ным антителом (анти-Тас).

Пролиферация Т-лимфоцитов in vitro

T- и В-клетки пролиферируют in vitro в присутствии антигена, если донор клеток сенсибилизирован. Пролиферацию клеток определяют по образованию бластных клеток или по включению 3Н-тимидина. Лимфоциты также пролиферируют (неспецифически) в ответ на поликлональные лиганды или митогены. Фитогемагглютинин и конканавалин А (Кон-А) действуют так поликлональные активаторы Т-кле- ток. Липополисахарид грамнегативных бактерий и митоген чечевицы обладают некоторой специфичностью по отношению к В-клеткам. Кон-А в определенных дозах специфичен для T- супрессорных клеток.

Хотя митогенез, вызываемый растительными лектинами, является искусственным феноменом в отношении нормальных событий, наблюдающихся в иммунной системе in vivo, его использование для изучения пролиферации лимфоцитов дает больше возможностей, чем исследования in vivo. Важно отметить, что дефект ответа лимфоцитов на митогены тесно

Лимфоциты 81

Рис. 36. ЭлектроннаямикрофотографияТлимфоцита в S-фазе клеточного цикла, пролиферирующеговлимфатическомузле после антигенной стимуляции.

связан с их неспособностью к пролиферации при ряде заболеваний, что придает этому исследованию клиническую значимость.

Трансформация и митогенез лимфоцитов могут индуцироваться и в смешанной культуре лимфоцитов, различающихся по I области главного комплекса гистосовместимости.

Макрофагикаквспомогательныеклетки прииндуцированноймитогенамиили антигенамипролиферациилимфоцитов

Удаление макрофагов из популяции лимфоидных клеток уменьшает способность Т- и В- лимфоцитов к пролиферации в ответ на ряд антигенов или митогенных стимулов. Функ-

цию «вспомогательных» клеток можно восстановить добавлением макрофагов или дендритных клеток из различных источников. Макрофаги, обработанные туберкулином, вызывают антигенспецифическую пролиферацию Т-кле- ток при условии исключения прямого контакта антигена с лимфоцитами. Вероятно, антиген локализуется на мембране макрофагов и в таком виде представляется лимфоцитам, причем в более доступной форме, чем свободный антиген.

Не исключено, что часть иммуностимулирующего действия макрофагов связана с представлением антигена с той части поверхности макрофагов, которая также экспрессирует laантигены, кодируемые I областью генов главного комплекса гистосовместимости. Кроме того, макрофаги секретируют неспецифические

82 Глава 7

растворимые регуляторные продукты-моно- кины. Наиболее важный из них - интерлей-кин-1 - является фактором, активирующим лимфоциты (см. главу 15). ИЛ-1 способен замещать макрофаги в реакциях тимических лимфоцитов на митогены, а также в смешанной культуре лимфоцитов. ИЛ-1 образуется макрофагами при их стимуляции ЛПС или комплексом антиген-антитело.

Вторичные передатчики при активации лимфоцитов

Митогены, вероятно, вызывают изменения внутриклеточного метаболизма, не проходя через плазматическую мембрану. Взаимодействие митогенов со своими рецепторами приводит к образованию внутриклеточных вторичных передатчиков. К наиболее изученным вторичным передатчикам относятся ионы Са2+ и циклический АМФ. Показано, что скорость поступления Са2+ в клетку резко возрастает при экспозиции лимфоцитов с мито-генами. Более того, трансформация лимфоцитов может быть подавлена добавлением хела-торов ионов металлов, например ЭДТА. И наконец, ионофор бивалентного катиона (А23187), переносящий Са2+ через биологические мембраны, также вызывает митогенную трансформацию лимфоцитов.

Роль цАМФ как вторичного передатчика при митогенезе лимфоцитов гораздо более противоречива; имеются аналогичные данные и в отношении циклического ГМФ. В некоторых исследованиях показано увеличение циклического ГМФ в течение нескольких минут после добавления Кон-А или ФГА к лимфоцитам. Другие исследователи не смогли подтвердить эти результаты.

Участие лимфоцитов в хронических воспалительных процессах

Связь секреции лимфокинов in vivo с ГСЗТ

Активность лимфоцитов при хроническом воспалении in vivo, например при ГСЗТ, связана с местной секрецией широкого спектра лимфокинов, подробное описание которых дано в главе 14. Внутрикожное введение супернатанта культур антигенили митогенстимулирован-ных лимфоцитов вызывает воспалительную реакцию, весьма напоминающую ГСЗТ. Тем

не менее митогенная трансформация и секреция лимфокинов, будучи двумя независимыми событиями, могут быть разделены. Максимальные проявления воспалительной реакции, вызванной ЛК, наблюдаются через 12-24 ч после внутрикожного введения; развитие реакции сопровождается повышением проницаемости сосудов и смешанной гранулоцитарно-мо- нонуклеарной клеточной инфильтрацией. Обусловливающая это событие фармакологическая активность супернатанта культуры известна как «реактивный фактор кожи» (РФК); сравнительно недавно были идентифицированы его отдельные компоненты.

Помимо того, что ЛК способны вызывать воспалительные реакции, сходные с ГСЗТ, они могут образовываться при развитии ГСЗТ. При кожных реакциях могут определяться макрофагальная хемотаксическая активность и РФК. Фактор, подавляющий миграцию, и активность РФК могут быть получены из перитонеальной полости сенсибилизированных морских свинок при реакции исчезновения макрофагов. Это еще одна модель ГСЗТ in vivo, в которой через несколько часов после введения специфического антигена в брюшную полость макрофаги исчезают из нее, прикрепляясь к серозной поверхности. Третьим указанием на значимость продуктов активации лимфоцитов для индукции воспаления служит подавление ГСЗТ и реакции исчезновения макрофагов под действием антилимфоцитарной сыворотки. ГСЗТ не индуцируется у неона-тально тимэктомированных животных, а также после введения (животным) антилимфоцитарной сыворотки.

Образованиегранулемы

Гранулема является местом хронического воспаления, которое представляет собой скопление макрофагов или других клеток серии мононуклеарных фагоцитов, обнаруживаемых вместе с клетками других типов (или без них). Хотя гранулематозные воспалительные инфильтраты могут встречаться и в отсутствие иммунологической реакции, многие формы гранулем связаны с функцией лимфоцитов. Такие гранулемы возникают при хронических инфекциях (туберкулез, туберкулезоподобная проказа и шистосомоз). Гранулемы, сопровождающие повышенную чувствительность к бериллию и цирконию, а также наблюдаемые при саркоидозе, имеют лимфоцитарное происхождение и могут быть связаны с ГСЗТ.

				Лимфоциты	83
Узловые гранулемы развиваюся в месте про-		миелинизация и другие признаки делают эту
ведения теста кожной чувствительности при		экспериментальную модель близкой к рассеян-
сенсибилизации к металлам или при сарко-		ному склерозу у человека. Поражения головного
идозе в ответ на введение экстракта селезенки		и спинного мозга по некоторым признакам
(тест Квайма). Такие повреждения развиваются		напоминают ГСЗТ в коже, что говорит о
через 1 - 3 нед после кожного теста в отличие от		сходстве с взаимодействием лимфоцитов и
ГСЗТ, появляющейся через 24-48 ч.		макрофагов при участии лимфокинов in vivo.
При гистологическом исследовании грану-
лем, сопровождаемых повышенной активно-		Состояния, связанные с дефицитом
стью лимфоцитов, клетки системы мононукле-
арных фагоцитов имеют признаки эпителиоид-		лимфоцитов
ных клеток. Эпителиоидные клетки отличаются
от фагоцитирующих макрофагов тем, что они		Значимость лимфоцитов, в частности Т-клеток,
не фагоцитируют и нередко обнаруживают		для ряда биологических состояний подтвержда-
наличие шероховатого эндоплазматического		ется неспособностью неонатально тимэктоми-
ретикулума, что свидетельствует об опреде-		рованных мышей, крыс и цыплят воспроизво-
ленной секреторной функции. Эти клетки несут		дить подобные состояния. Многие из таких
специфический макрофагальный антиген ак-		реакций могут отменяться и антилимфоцитар-
тивации точно так же, как активированные		ной сывороткой, в том числе ГСЗТ, контактная
фагоцитирующие макрофаги. Эпителиоидно-		чувствительность, отторжение аллотрансплан-
клеточные гранулемы обычно сопровождаются		тата, трансформация лимфоцитов in vitro
значительной	активацией фибробластов и	митогенами и антигенами, устойчивость орга-
увеличением синтеза коллагена, что в неко-		низма к целому ряду облигатных и факульта-
торых случаях может привести к быстрому		тивных внутриклеточных организмов, грибков и
разрешению повреждений.		простейших. У людей нарушение развития
Роль лимфоцитов, особенно Т-клеток, изу-		третьей и четвертой жаберных дуг может обу-
чалась в экспериментальных моделях образо-		словить врожденную недостаточность вилоч-
вания гранулем в легких после внутривенного		ковой железы. Дефицит лимфоцитарных ство-
введения мышам яиц шистосом. У животных,		ловых клеток может привести к нарушению
предварительно сенсибилизированных антиге-		развития Т- и В-клеток. Иммунные дефекты
нами шистосом, определяется увеличение ко-		могут быть частичными или полными, необра-
личества гранулем. Гранулемы не развиваются		тимыми или восстановимыми со временем.
у тимэктомированных животных или после		Ретровирусная инфекция, особенно вирус
введения (мышам) антилимфоцитарной сыво-		иммунодефицита человека, который обладает
ротки.		аффинитетом к антигену CD4, может привести к
		развитию синдрома приобретенного иммунного
Экспериментальныйаллергический		дефицита. При этом отмечается уменьшение
энцефаломиелиткакаутоиммунноесостояние		нормального отношения Тп:Тс-CD4:CD8, что
Экспериментальный аллергический энцефало-		связано с сокращением числа Т-клеток-
		помощников. В результате нарушаются все
миелит (ЭАЭ) вызывается сенсибилизацией		указанные выше функции Т-клеток, включая
экспериментальных животных тканью гомоло-		снижение устойчивости к оппортунистическим
гичного или гетерологичного головного или		инфекциям. Аномальные грибковые инфекции и
спинного мозга в полном адъюванте Фрейнда		кандида	постоянно	обнаруживаются	при
(см. главу 28). Болезнь проявляется параличом		тяжелых,	быстро	прогрессирующих
одной из задних конечностей и сопровождается		заболеваниях, вызванных Micobacteria и
смешанной	периваскулярной инфильтрацией	Pneumocystis carinii. У больных развиваются
лимфоцитов и макрофагов в головном и спин-		редкие злокачественные новообразования, осо-
ном мозге. ЭАЭ переносится лимфоцитами у		бенно саркома Капоши. У больных, получаю-
инбредных морских свинок и не развивается у		щих антилимфоцитарный глобулин или аза-
неонатально тимэктомированных крыс. Хро-		тиоприн, а также при некоторых врожденных
ническая, затихающая и вновь обостряющаяся		иммунодефицитных состояниях отмечается
форма заболевания может быть вызвана у		тенденция к развитию ретикулоклеточных сар-
морских свинок (инбредная линия XIII), им-		ком или лимфосарком.
мунизированных вскоре после рождения. Де-

84	Глава 7
Цитокины как регуляторы функции						зующих клеток к эритроцитам барана у мышей-
лимфоцитов						nude с дефицитом Т-клеток;
						г) индуцирует аллоантигенспецифичные ти-
Интерлейкины						моциты и цитолитическую активность Т-клеток
						мышей-nude (см. главу 30). ИЛ-2 является
						гликопротеином, который элюирует с гель-
Интерлейкины		являются		наиболее важными		фильтрационных колонок с молекулами, име-
регуляторными		молекулами,			образуемыми	ющими массу от 25000 до 40000 дальтон. В
лимфоцитами и моноцитами. Роль этих молекул						других исследованиях указывается молеку-
была установлена главным образом в экс-						лярная масса около 20000. Предполагается, что
периментах in vitro с использованием проли-						образование ИЛ-2 стимулируется и регу-
ферации лимфоцитов. Интерлейкин-1 первона-						лируется ИЛ-1. Однако некоторые исследова-
чально был описан как фактор, активирующий						тели полагают, что ИЛ-1 не является необхо-
лимфоциты и присутствующий в культуре						димым для образования ИЛ-2, а нужен только
макрофагов. ИЛ-1 способен замещать макро-						для регуляции его продукции. Эти авторы рас-
фаги в пролиферативной реакции лимфоцитов						сматривают ИЛ-2 как необходимый внеклеточ-
на аллоантиген (см. главу 15). Такой вывод был						ный митогенный сигнал для Т-клеток, стиму-
сделан при проведении экспериментов, в						лированных поликлональными активаторами и
которых культуральная среда человеческих и						антигенами. Митогенная активность ИЛ-2
мышиных макрофагов, стимулированных ли-						приводит к клональной экспансии незрелых
пополисахаридом, усиливала ответ мышиных						тимоцитов и лимфоцитов, которые затем диф-
тимусных клеток и периферических Т-клеток на						ференцируются в зрелые цитотоксические, су-
митоген (липополисахарид). Сейчас известно,						прессорные или хелпервые клетки.
что ИЛ-1 представляет собой пептидную						Мощным влиянием на регуляцию иммун-
молекулу с массой 17 500. Данная молекула						ного ответа обладают, помимо интерлейкинов,
обладает различными формами активности, из						лимфокины, активирующие макрофаги. Лим-
которых наиболее интересна активность уже						фокины первоначально были описаны как
известного эндогенного пирогена. Кроме того,						растворимые факторы активированных in vitro
ИЛ-1	обладает следующими способностями:					лимфоцитов, которые подавляют миграцию
а) вызывает выделение				ИЛ-2	Т-клетками;	макрофагов из капиллярных трубочек. Сейчас
б) усиливает ответы антител in vitro, действуя						известно, что они вызывают глубокие изме-
на Т- и В-клетки; в) усиливает цитотоксичность						нения метаболизма макрофагов. Метаболиче-
лимфоцитов; г) индуцирует маркеры Lyt (суб						ские эффекты включают повышение уровней
популяция лимфоцитов); д) увеличивает обра						глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, окислитель-
зование стабильных Е-розеток; е) индуцирует						ной активности НАДФН, активности сукци-
синтез коллагеназы и простагландинов в сино						натдегидрогеназы и р-глюкуронидазы. В других
виальных клетках; ж) вызывает пролиферацию						исследованиях отмечается повышение уровня
фибробластов; з) индуцирует образование ами						внутриклеточного цГМФ и не обнаруживается
лоида сыворотки. ИЛ-1 может также участво						увеличения цАМФ.
вать в Т-клеточной супрессии.						Интерлейкин-3 - гемопоэтический ростовой
Открытие ИЛ-2 (Т-клеточный ростовой						фактор, который поддерживает рост полипо-
фактор) явилось результатом следующего на-						тентной стволовой клетки, частично приводя к
блюдения: супернатант стимулированных ми-						дифференциации в сторону миелоидного ряда.
тогеном (Кон-А) лейкоцитов периферической						ИЛ-3 также индуцирует экспрессию Thy-1
крови человека содержит фактор, вызывающий						антигена Т-лимфоцитов. Он присутствует в
пролиферацию клеток in vitro. Получение ИЛ-2						супернатантах культур Т-клеток-помощников.
стало	возможным		при		использовании	ИЛ-4 вызывает активацию, пролиферацию и
долгоживущих культур клонированных Т-кле-						дифференциацию В-клеток, является фактором
точных популяций. Показано, что очищенный						роста Т-клеток и ряда других клеток. ИЛ-5
ИЛ-2 способен осуществлять следующие функ-						является активирующим, ростовым и диффе-
ции:						ренцирующим фактором В-клеток; он также
а) он запускает пролиферативную экспан						вызывает дифференциацию эозинофилов. ИЛ-6
сию активированных клонов Т-клеток;						продуцируется активированными Т-клетками
б) усиливает митогенез тимоцитов;						или Т-клеточными линиями и способен
в)	усиливает формирование бляшкообра-					стимулировать В-клетки человека.

				Лимфоциты	85
	Интерферон и лимфотоксин			к их пролиферации. ПГЕ! также вызывает
	Интерферон является еще одной макромоле-			быструю экспрессию Thy-1 антигена в культуре
				эмбриональных мышиных тимусов. Боль-
	кулой, которая может играть важную роль в			шинство исследований иммунорегуляторных
	регуляции иммунного ответа (см. главу 29).			эффектов ПГ в отношении функции Т-клеток
	ИФН может иметь лимфоцитарное происхож-			проведено на моделях митогенного или анти-
	дение. Показано, что ИФН обладает рядом			генного бластогенеза. Во многих публикациях
	иммуномодулирующих эффектов. К ним отно-			сообщается о подавлении митогениндуциро-
	сятся подавление и стимуляция ответа антител,			ванного бластогенеза nrEj и ПГЕ2, а также об
	подавление	гиперсенситивности	замедленного	отмене супрессии индометацином. ПГЕ зна-
	типа и отторжения трансплантата, супрессия			чительно подавляет продукцию Т-клетками
	митогенеза лимфоцитов, активация макрофагов,			лимфокина-фактора, угнетающего миграцию.
	увеличение экспрессии поверхностных ан-			ПГ могут также угнетать способность сенси-
	тигенов лимфоцитов и выделение гистамина			билизированных Т-клеток к специфическому
	базофилами. Кроме того, интерферон повышает			лизису опухолевых клеток-мишеней. Однако
	цитотоксичность Т-клеток, антителоза-висимую			для этого требуются высокие концентрации ПГ.
	клеточную	цитотоксичность,	активность	Предположительно ПГ оказывают подав-
	естественных киллеров. Указанные формы			ляющее влияние на пролиферацию лимфоцитов
	активности присущи прежде всего ИФН-а,			через активацию аденилатциклазы и повышение
	который образуется Т- и В-клетками, а также			уровня цАМФ. ПГ, повышая внутриклеточный
	макрофагами. Многими из перечисленных форм			уровень цАМФ, усиливают бластоге-нез
	активности обладает и ИФН-/3, образуемый			тимоцитов, но подавляют бластогенез цир-
	активированными Т-лимфоцитами.			кулирующих Т-клеток, не разделенных на суб-
	Лимфотоксин - это вещество, относящееся к			популяции. Из этого наблюдения был сделан
	фактору некроза опухолей (ФНОа; иногда его			вывод об основном действии, связанном с су-
	называют ФНОр, так как оба вещества			прессорными клетками периферической крови.
	обладают сходными биологическими и струк-			Ингибиторы синтеза простагландинов, такие как
	турными свойствами). ФНОа образуется			индометацин, подавляют функции Т-кле-ток-
	макрофагами, а ФНОр-активированными Т-			супрессоров в культуре лимфоцитов, сти-
	клетками. Лимфотоксин цитотоксичен для			мулированных Кон-А. На функции В-клеток ПГ
	определенных опухолевых клеточных линий и			оказывают модулирующее действие. Ин-
	вызывает геморрагические некрозы некоторых			дометацин усиливает формирование антитело-
	опухолей. Предполагается, что ФНОа и ФНОР			продуцирующих клеток на эритроциты барана.
	ответственны за ряд воспалительных эффектов,			Вероятно, что на Т-клетки-помощники ПГ
	наблюдаемых при реакциях гиперсенси-			влияют так же, как на В-клетки.
	тивности замедленного типа и ранее относимых
	к кожным реактивным факторам.			Гормоны вилочковой железы
	Простагландины
				С тех пор как была открыта роль вилочковой
	Простагландины-это широко распространенное
				железы в регуляции иммунного ответа, был
	семейство соединений, производных по-			разработан целый ряд препаратов тимусного
	линенасыщенной жирной кислоты (арахидоно-			происхождения. Многие из них химически оха-
	вой), которые образуются при участии цикло-			рактеризованы. К главным препаратам относят
	оксигеназной активности. Показано, что ПГЕ2,			следующие: тимозин, тимопоэтин, тими-ческий
	nrF2, nrF2a (простациклин) и ТА2		(тромбоксан)	гуморальный фактор и сывороточный фактор
	синтезируются макрофагами некоторых видов.			вилочковой железы.
	Макрофаги	обладают	активной	Тимозин
	циклооксигеназной системой. Лимфоциты не
	обнаруживают способности к синтезу ПГ,			Этот препарат является неочищенным экстрак-
	поэтому вполне логичным представляется про-
	ведение исследования влияния ПГ на Т-клетки,			том сыворотки теленка, а изученный активный
	nrEj и ПГЕ2	в отличие от nrFla или ПГЕ2(1 могут		препарат обычно называют 5-й фракцией ти-
	вызвать быстрое 2-4-кратное увеличение цАМФ			мозина. Эта фракция состоит из ряда пепти-

в тимоцитах, что через 2-4 ч приводит

7 1134

86 Глава 7

дов; некоторые из них происходят от тимического эпителия, а остальные-от тимоцитов. Определена аминокислотная последовательность пептидов, обладающих биологической активностью; так, тимозин-сц состоит из 28 аминокислотных остатков. Пятая фракция тимозина и некоторые ее биологически активные пептиды используются в экспериментальных моделях, а также при иммунодепрессии у больных раком и при тяжелых вирусных инфекциях. Показано, что большинство функций Т-клеток индуцируется или усиливается этими препаратами. Важно отметить, что помимо усиления эффекторных функций Т-клеток 5-я фракция тимозина и особенно тимозин 7 индуцируют образование супрессорных клеток у мышей. Аналогичный эффект наблюдается у людей. Учитывая данное наблюдение, необходимо рационально использовать препараты этого типа, пока не будет произведена очистка отдельных пептидов, а также точное определение их клеток-мишеней.

Тимопоэтин

Тимопоэтин был первоначально получен в ходе исследований на экспериментальной модели миастении гравис и охарактеризован в соответствии с его влиянием на нейромышечную передачу. Было показано также влияние тимопоэтина на раннюю дифференциацию Т-клеток. Тимопоэтин химически охарактеризован, он представляет собой полипептидную цепь, содержащую 49 аминокислот. В последующем Гольдштейн и его коллеги выделили пентапептид с аналогичной биологической активностью, который был назван ТП5. ТП5 исследован в ряде экспериментальных мышиных моделей. В частности, пентапептид эффективен при экспериментальном аутоиммунном заболевании животных.

Гуморальныйфакторвилочковойжелезы

Данный фактор представляет собой пептид (молекулярная масса 3000), выделяемый из диализата неочищенного экстракта вилочковой железы. На модели «трансплантат против хозяина» in vitro гуморальный фактор вилочковой железы и подобные ему препараты способны восстанавливать иммунную активность

лимфоцитов неонатально тимэктомированных мышей.

Гуморальный фактор вилочковой железы 1 используется при лечении иммунодепрессив- J ных состояний у людей.

Сывороточныйхимическийфактор

Сывороточный тимический фактор (СТФ) является единственным гормоном вилочковой железы, который приготавливается не из экстракта железы теленка. Он представляет со-] бой нонапептид (молекулярная масса 900), выделенный из сыворотки, но еще не синтезированный. СТФ способен индуцировать маркеры Т-клеток (Thy-1 мембранный антиген) у предшественников Т-клеток и отсутствует в сыворотке тимэктомированных животных. В ряде тестовых систем действие СТФ аналогично (но не идентично) действию тимопоэтина.

Одно из направлений в изучении тимических факторов - исследование их влияния на процессы старения. Уровни тимопоэтина и СТФ в сыворотке с возрастом снижаются. Иммунитет старых мышей восстанавливается после введения ТП5. Как и тимозин, СТФ в высоких концентрациях обладает стимулирующим действием на Т-супрессорные клетки, поэтому он может подавлять сенсибилизацию к динитрофторбензолу и отторжение кожного трансплантата. У человека СТФ в определенных условиях угнетает образование Т-клеток- супрессоров in vitro.

Список литературы

Hamblin A.S. (1988) Lymphokines. IRL Press. Oxford. Howard J. (1984) The T-cell antigen receptor-paradigm regained. Immunol. Today 5, 188-189.

Hume D.A. & Weidemann M.J. (1980) Mitogenic Lymphocyte Transformation. Elsevier/North Holland, Amsterdam.

Moiler G, (ed.) (1984) T-cell receptors and genes. Immunological Reviews vol. 81, Munksgaard, Copenhagen.

Pernis B. & Vogel H.J. (eds) (1980) Regulatory T-lymphocytes.

Academic Press, New York.

Simonsen M. (1984) May T3 protect us. Immunol. Today 5, 314-315.

Turk J. L. (1980) Delayed Hypersensitivity, 3rd ed., Elsevier/ North Holland, Amsterdam.

Yoshida T. (1983) Lymphokines mediate and regulate in vivo delayed hypersensitivity reactions. In: Hadden J. W., Che-did L., Dukor P., Spreafico F. & Willoughby D. (eds) Advances in Immunopharmacology 2. pp. 609-614. Perga-mon Press, Oxford.

8		Эндотелиальные клетки сосудов
		М.М. Дейл, Т-П.Д. Фан (М.М. Dale, T-P.D. Fan)

Сосудистый эндотелий представляет собой не-	Эндотелиальные клетки in vitro имеют повы-
прерывный монослой клеток, выстилающих	шенную скорость обмена и часто весьма напо-
люминальную поверхность кровеносных сосу-	минают «травмированные» клетки in vivo. Более
дов всего организма и отделяющих кровь от	того, эндотелиальные клетки в отличие от
субэндотелиальных тканей. Этот монослой не	фибробластов и гладкомышечных клеток об-
является пассивным барьером между кровью и	лигатно растут монослоем как in vivo, так и in
тканями. Это метаболически активная ткань,	vitro, проявляя характерное контактное тор-
обладающая многочисленными функциями.	можение и осуществляя межклеточные контак-
Подробные сведения об этих функциях были	ты. Не следует также забывать о разносторон-
получены лишь в последнее десятилетие бла-	ности эндотелиальных клеток в отношении
годаря развитию эффективных методов куль-	некоторых функций in situ. Так, люминальная
тивирования эндотелиальных клеток in vitro.	поверхность	клетки	обладает	механизмами
Эндотелиальные клетки различных органов	предупреждения адгезии тромбоцитов (см. ни-
и тканей не идентичны и различаются по своей	же), тогда как ее противоположная поверхность
структуре или функции. Например, некоторые	способствует	тромбогенезу.		Ангиотен-
эндотелиальные слои обладают преимущест-	зинконвертирующий		фермент локализуется		на
венно плотными соединениями между клетка-	люминальной поверхности, а коллагеназа-на
ми, что характерно для гематоэнцефалическо-	противоположной. Такая «ориентация по
го барьера; в костном мозге подобные соеди-	сторонам» у клеток в культуре не очевидна.
нения отсутствуют. В легких клетки эндотелия	Подавляющее большинство сосудистых эн-
в отличие от других сосудистых областей спо-	дотелиальных клеток организма находится в
собны метаболизировать циркулирующие пеп-	микрососудах,	главным образом		в капиллярах
тиды. Эндотелиальные клетки посткапилляр-	(рис. 37). Стенки сосудов микроциркуляторно-го
ных венул активно отвечают на циркулирую-	русла состоят из концентрических, послойно
щие в крови вещества повышением проницае-	расположенных тканей, причем слои варьируют
мости сосудов. Подобной способностью не	в зависимости от типа сосудов (рис. 38).
обладают клетки эндотелия капилляров и ар-	Эндотелий примыкает к базальной мембране
териол.	поверхностью, противоположной люминальной.
В функциональном плане эндотелий наде-	Стенка капилляров и посткапиллярных венул
лен широким спектром форм активности, но в	состоит в основном из этих двух элементов. В
этой главе основное внимание будет уделено	этой части сосудистого русла с эндоте-
тем функциям, которые имеют отношение к	лиальными клетками связаны перициты -
воспалительным и гиперсенситивным реакци-	длинные, узкие клетки (длина 150-200 мкм,
ям. Приведенные здесь данные были получены	ширина 10-25 мкм) (см. рис. 38). Они распола-
частично в исследованиях in vivo, частично-in	гаются на базальной мембране, образуя пре-
vitro на культурах клеток. Следует подчерк-	рывистый слой, распространяющийся от ар-
нуть, что в большинстве исследований in vitro	териол до мышечных венул. На этом отрезке
использовались эндотелиальные клетки доста-	имеются и переходные формы между перици-
точно крупных кровеносных сосудов, посколь-	тами и гладкомышечными клетками. Перициты
ку разработка методов длительного культиви-	выполняют	сократительную		функцию	и
рования больших количеств эндотелиальных	обеспечивают механическую поддержку эндо-
клеток микрососудов находится лишь на своем	телиальных клеток. Имеются свидетельства в
начальном этапе. Следует также отметить, что	пользу фагоцитарной активности перицитов.
эндотелиальные клетки in vivo являются по	Кроме того, перициты могут служить источ-
существу покоящимися и в нормальных усло-	ником недифференцированных			мезенхималь-

виях уровень обмена в них достаточно низок.

87

8 мкм капилляры

Рис. 37. Площадь поверхности эндотелия, приходящегося на единицу объема крови, выражена как функция диаметра сосудов на различных участках циркуляции.

Для вычисления использовалось отношение площади цилиндрической поверхности сосудов диаметром от 8 мкм (капилляры) до 20 мм (крупные артерии и вены) к 1 см3 объема [Busch и

соавт.-Lab. Invest., 1982, 47, 498].

ных клеток при воспалительных и препаратив-	диаторов и клеток, участвующих в воспалении,
ных процессах.	в зону поражения. Однако исследования в
Эндотелий небольших артериол и постка-	культуре клеток пока не выявили различий
пиллярных венул имеет непосредственное от-	между эндотелиальными клетками из разли-
ношение к воспалительной реакции. Артериолы	чных областей микроциркуляции.
контролируют переход клеток и плазмы из
крови в область воспаления. Венулы принимают	Морфология эндотелия
участие в контроле направленного из сосудов
потока жидкости и медиаторов, комплемента,	Сосудистые эндотелиальные клетки представ-
антител, а также в контроле прохождения
клеток непосредственно в зону внедрения	ляют собой уплощенные полигональные клетки
патогена или другого вредоносного агента (см.	длиной 25-50 мкм и шириной 10-15 мкм,
главу 18). Эндотелиальные клетки данной части	которые образуют одноклеточный слой на вну-
микроциркуляции сравнивают со стражниками,	тренней стороне кровеносных сосудов, причем
которые отвечают на различные химические	длинная ось клеток ориентирована в направле-
сигналы инициацией соответствующих реакций,	нии кровотока. Толщина концов клеток очень
регулирующих доставку ме-	невелика (1 мкм в артериях и менее 0,1 мкм

Рис. 38. Основные структуры микроциркуляции и их взаимосвязь с остальными частями сосудистого ложа." Детальное строение стенки посткапиллярной венулы представлено в нижней части рисунка [Rodin J. A. G.- In: Handbook of Physiology: The Cardiovascular System II, Chap. I/Eds. D. F. Bohr, Somlyo, Spaks].