12.12. Специфическая индикация

Специфическая индикация — комплекс специальных мероприятий, проводимых медицинской и ветеринарно-санитарной службами, для подтверждения факта применения БО (при положительных результатах неспецифической индикации) и определения вида биологического агента. Ее осуществление возлагается:

• на лабораторные подразделения СЭУ армий, фронтов, военных округов, флотов, госпитальных баз и другие равные им лабораторные подразделения санитарно-эпидемиологических учреждений армий и фронта;

• на лаборатории ветеринарно-эпизоотологических отрядов и других учреждений ветеринарно-санитарной службы.

К проведению специфической индикации могут привлекаться микробиологические лаборатории инфекционных госпиталей и научно-исследовательских учреждений страны. С учетом особенностей современных боевых действий, обусловливающих частые передислокации санитарно-эпидемиологических учреждений, и необходимости в связи с этим поэтапного последовательного исследования проб в различных лабораториях организация специфической индикации БС предусматривает строгое соблюдение принципа преемственности в работе.

Принципы преемственности в работе лабораторий предполагают:

• единые способы отбора проб;

• единые методы исследования и схему анализа;

• общую унифицированную (сквозную) нумерацию и обозначение материалов проб;

• обязательную для всех лабораторий, проводящих специфическую индикацию в сокращенном объеме, пересылку в кратчайшие сроки не менее 2/3 каждой пробы в СЭО омедб армии и(или) СЭО фронта, обеспечивающие исследование проб в полном объеме.

Преемственность в работе предусматривает также возможность пересылки исследуемых проб (в виде первичных посевов или зараженных животных) в другие лаборатории для продолжения анализа.

В основе специфической индикации БС лежат методы лабораторного экспресс-анализа проб с помощью метода флюоресцирующих антител (МФА) в прямой или непрямой модификации с контрастированием неспецифического свечения альбумином, меченным производными родамина, иммуноферментного анализа (ИФА) или реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) по единой схеме (схема 12.1), предусматривающей два взаимодополняющих этапа исследования:

• первый этап — выявление БС с помощью экспресс-методов непосредственно в нативной пробе без ее биологического обогащения;

• второй этап — выявление и идентификация БС после предварительного биологического обогащения проб путем накопления возбудителей на питательных средах и культурах клеток, а также в органах и тканях чувствительных лабораторных животных.

Перечисленные методы не единственные, используемые для экспресс-анализа. В микробиологических лабораториях широко используют различные модификации ИФА и полимеразную цепную реакцию (ПЦР). По мере насыщения лабораторий соответствующими техническими и реагентными средствами для СИ БПА можно использовать ИФА (для подвижных медицинских комплексов — только мембранно-фильтрационный точечный дот-ИФА) и ПЦР.

Схема 12.1. Специфическая индикация БПА и бактериальных токсинов

Прием, сортировка и регистрация проб

Первичная обработка и подготовка проб для анализа

ПРОБА

жидкая

сухая

Концентрирование возбудителей

Перевод пробы в жидкую фазу (получение вторичного материала)

Приготовление мазков и мазков-отпечатков из биологического материала

Доведение пробы до конечного объема — 22 мл, распределение и подготовка взвеси для дальнейшего исследования

Анализ нативных материалов с помощью МФА и ИФА

Постановка биопробы

Биологическое обогащение пробы

Накопление бактерий и грибов на питательные среды

Накопление возбудителей в организме мышей

Накопление риккетсий и хламидий в культуре

Накопление вирусов в культуре

Исследование биологически обогащенных материалов пробы с помощью МФА и ИФА (РИГА)

В первую очередь исследованию подлежат:

• пробы воздуха;

• содержание и осколки биологических боеприпасов;

• смывы из носоглотки людей, оказавшихся без защиты в зоне прохождения аэрозольного облака;

• материалы от внезапно заболевших людей.

Объединение указанных проб не допускается.

Специалисты санитарно-эпидемиологических лабораторий соединений (и им равных) участвуют преимущественно в санэпидразведке, сборе и сортировке проб и обеспечивают их пересылку соответственно в СЭО армии, фронта или ЦГСЭН военных округов, армии или фронта для проведения специфической индикации.

Санитарно-эпидемиологические отряды армии, фронта, ЦГСЭН военных округов и флотов, как правило, проводят индикацию БПА в объеме, предусматривающем выявление и идентификацию до вида содержащихся в пробах БПА, наиболее значимых в военно-эпидемиологическом отношении.

В первую очередь СИ должны подвергаться пробы на содержание в них БПА наиболее опасных для личного состава (высокая степень контагиозности, короткий инкубационный период, устойчивость во внешней среде). В этом случае выявлению подлежат возбудители чумы, сибирской язвы, натуральной оспы и некоторых геморрагических лихорадок (Ласса, Эбола и др.), а также ботулинический токсин. В последующем СИ подлежат возбудители туляремии, бруцеллеза, сапа, мелиоидоза, Ку-лихорадки, эпидемического сыпного тифа, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, лихорадок долины Рифт и западного Нила, орнитоза, а также стафилококкового энтеротоксина.

Объем исследований в зависимости от конкретных условий может определяться изменением перечня подлежащих выявлению видов БПА и числа этапов анализа проб.

При усилении лабораторий необходимыми силами и средствами объем исследований может быть расширен для проведения СИ в отношении других возбудителей опасных инфекционных заболеваний (восточного и западного энцефаломиелитов лошадей, лихорадок денге, Мачупо, аргентинской и желтой лихорадок, конго-крымской геморрагической лихорадки, японского энцефалита и др.), а также токсинов рицина и сакситоксина.

В зависимости от этапа и результатов исследования выдаваемые лабораторией ответы могут быть предварительными и(или) окончательными. Предварительный ответ выдается только на основании положительных результатов исследования нативных материалов пробы (4—12 ч). Отрицательный предварительный ответ на основании результатов исследования нативного материала пробы лаборатория не выдает.

Окончательный ответ о наличии в пробе БС (48—72 ч) может быть выдан лабораторией при получении с помощью МФА и РИГА положительных результатов исследования биологически обогащенных проб (положительных результатов биопробы на ботулинический токсин).

Окончательный отрицательный ответ выдается только на основании повторных отрицательных результатов исследования на первом и втором этапах анализа, а также полного микробиологического анализа, проведенного в соответствии с классическими методами исследования.

Приемы и методы полного (классического) микробиологического анализа длительны и трудоемки, так как предполагают обязательное выделение чистой культуры возбудителя и его идентификацию. Как правило, в лабораториях военно-медицинской службы для специфической индикации БС они не применяются.