8. Методика постановки реакции агглютинации при инфекционном аборте лошадей

Испытуемые сыворотки, гемолизированные, мутные, проросшие и загнившие безусловно бракуются. От каждой сыворотки, признанной годной для постановки реакции агглютинации, приготовляют разведение 1 : 100, беря 0,1 см³ сыворотки и прибавляя к ней 0,9 физиологического раствора поваренной соли (основное разведение). Для реакции берут по пять пробирок на каждую сыворотку и вливают в них по 1 см³ разведённых сывороток 1:100; 1:400; 1:600; 1:800; 1:1000. Данные разведения производят следующим образом: в соответствующую пробирку вливают из основного разведения (1 :100);

0,25 см² + 0,75 физиологического раствора равно . 1:400

0,17 см³ (из 1 : 100) + 0,83 » » . 1:600

0,13 см³ (из 1 : 100) + 0,87 » » .1:800

0,1 см³ (из 1:100) + 0,9 » » .1:1000

В каждое полученное разведение сыворотки, а также и в контроли (заведомо нормальная и заведомо агглютинирующая сыворотка при тех же разведениях и контроль на физиологическом растворе) добавляют градуированной однограммовой пипеткой по 0,05 паратифозного антигена. Паратифозный антиген изготовляют научно-исследовательские ветеринарные учреждения и ветеринарные лаборатории с разрешения Главного ветеринарного управления Министерства животноводства СССР.

Все пробирки тщательно встряхивают и ставят в термостат при температуре 37—38° С на 3 часа, после чего учитывают реакцию первый раз. Окончательный учёт результатов реакции производят на другой день, когда пробирки стоят при обычной комнатной температуре. Положительной реакцией считается макроскопическая агглютинация в разведении сыворотки 1 :600 при условии полного просветления жидкости с образованием зонтика при встряхивании пробирки и при отрицательном результате агглютинации в кон-трольных пробирках.

Отрицательной реакцией считается наличие реакции агглютинации с сыворотками в разведении ниже 1 :400 при полном отсутствии агглютинации микробов в пробирках с сывороткой в разведении 1 :600 и выше.

4. Методика постановки реакции агглютинации со свежей каплей крови при диагностике бациллоносителей белого поноса у кур

Перед употреблением флакон с антигеном тщательно взбалтывают, встряхивая его до получения однородной взвеси. Для проведения капельной реакции агглютинации при помощи иглы Франка или путём надреза берут каплю крови из гребня курицы на обезжирен-ное чистое предметное стекло, и слегка размазывают. Затем при помощи капельницы или пипетки наносят в центр мазка одну каплю антигена. Эти ингредиенты перемешивают между собой при помощи стерильной платиновой петли или стеклянной палочки.

При положительной реакции появляются хорошо видимые простым глазом взвешенные палочки склеенных микробов; при отрицательной реакции взвесь микробов не изменяется и остаётся однородной. В сомнительных случаях рекомендуется проверка реакции под агглютиноскопом.

Реакция обычно наступает через 1—2 минуты. Температура помещения, где производится реакция агглютинации, не должна быть ниже 10° С. В качестве контроля используется агглютинирующая пуллёрная сыворотка.