Добавил:
krasnodar.anruis@yandex.ru Общественный деятель Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Применение препаратов в вет практике 1946.doc
Скачиваний:
274
Добавлен:
03.05.2018
Размер:
859.14 Кб
Скачать

Титрация трипанозомного антигена

Для титраций берут две позитивные трипанозомные сыворотки

( ++++, ++) и 3-4 нормальные сыворотки. Позитивные сыворотки предварительно разводят следующим образом:

2,0см3 сыворотки +8,0 см3 физиолог, раствора равно разведению 1:5

1,0 » +9 « » » » 1:10

0,5 » +9,5 » » » » 1:20

0,25 » +9,75 » » » » 1:40

Нормальную сыворотку берут в дозе 0,1. Комплемент, гемолизия и эритроциты—в рабочих титрах, температура водяной бани и время—обычные. Схема реакции следующая:

Разведение антигена

1:10

1:20

1:40

1:60

1:80

1:100

1:120

1:140

1:160

1:180

Антиген

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Первое разведе- ние сыворотки .

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

Комплемент ; : ;

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0.5

0.5

0,5

0,5

Физиологичес-кий раствор • • •

0,5

20 минут в водяной бане при 37° С.

Гемолизин • Взвесь эритроцитов

0,5 0,5

0,5 0,5

0,5 0,5

0,5 0,5

0,5 0,5

0,5

0,5

0,5 0,5

0,5 0,5

0,5 0,5

0,5

15 минут в водяной бане при 37° С.

При мало активных антигенах титрацию их проводят также в 10 пробирках, но в более частых разведениях.

По этой же схеме ставят и остальные разведения сыворотки. При отсутствии высокоактивных сывороток берут сыворотки, давшие в предыдущих исследованиях с другим антигеном в разведении 1:5 ++++, +++, ++ и +.

Титром антигена считается то разведение, которое даёт те же результаты на указанных сыворотках, которые были получены с прежним антигеном.

В качестве контроля берут антиген во всех разведениях без сыворотки, а также все сыворотки с вытитрованным ранее антигеном и без антигена.

Примерный результат титрации следующий (определение произведено в крестах).

Разведение антигена

1:10

1:20

1:40

1:60

1:80

1:100

1:120

1:140

1:160

1:180

Разведение сыворотки 1:5 . .

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

-

-

-

То же 1:10 ...

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

++

+

-

-

-

То же 1:20 . .

+++

++

+

-

-

-

-

-

-

-

То же 1:40 ...

+

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Например, предполагаемый титр антигена 1:140, рабочий титр—1:70.

При встряхивании антиген должен давать незначительное помутнение без грубых неразбивающихся комков и хлопьев.

Срок годности антигена до четырёх месяцев при условии периодической проверки его титра каждые две декады.

Антиген должен сохраняться в тёмном прохладном месте.