Аналитические основы коагулогических исследований.

Для коагулогических исследований нужна венозная кровь. Капиллярная кровь имеет ограниченное значение как диагностический материал.

Взятие крови для коагулогических исследований должно быть приурочено ко времени исследования (коагулограмма должна быть произведена в первые 2 часа). Во время венопункции длительность венозного стаза должно быть не более 1 минуты, а сила сдавления – ниже диагностического давления крови.

При прокалывании иглой сосуда тканевой тромбопластин попадает с током крови в пробирку, поэтому первые 1,5-2 мл крови не годятся для проведения коагулогических тестов. Не рекомендуется использовать при заборе крови шприц из-за опасности гемолиза.

В особых случаях можно использовать кровь, полученную из подключичного катетера, но при этом следует удалить первые 10-15 мл крови, а затем забрать кровь на исследование. Такой способ применим только в тех случаях, когда в катетер не вводится гепарин.

Материалом для коагулогических исследований является плазма. Антикоагулянт выбора для ее получения – 3,8% цитрат натрия. Для получения достоверных результатов обязательным является соотношение крови и антикоагулянта 9:1. Для получения богатой тромбоцитами плазмы необходимо отцентрифугировать цитратную кровь 10 мин при 1500 об/мин. Верхняя часть плазмы (75%) отбирается пластиковой пипеткой в закрывающуюся пластиковую пробирку. Затем, для получения бестромбоцитарной плазмы, взятую кровь еще раз необходимо отцентрифугировать 20-30 мин при 1500 об/мин.

Исследования должно быть выполнено тотчас после центрифугирования. Если тотчас невозможно, плазму можно сохранить при t⁰ – +4 ⁰C не более двух часов.

Для оценки первичного сосудистого – тромбоцитарного гемостаза используются следующие тесты:

1. Подсчет количества тромбоцитов (в норме 180-360х10⁹/л). используется любой способ: в камере Горяева, в мазках, на анализаторе.

2. Время капиллярного кровотечения по Дьюке, по Айви, по Сухореву.

По Дьюке – на ногтевой фаланге безымянного пальца наносится прокол на всю глубину скарификатора, включается секундомер, и через каждые 30 секунд на фильтровальную бумагу снимаются капельки крови до их исчезновения. Норма 2-4 мин. (до 5 мин.). Если это время удлинено, то можно думать о тромбоцитопении или тромбоцитопатии.

По Айви – определяется время кровотечения при повышении венозного давления до 45-50 мм рт ст. Одевают манжетку на плечо, нагнетают давление и на ладонной поверхности предплечья делают 3 насечки или прокола. Включают секундомер и выбирают то место, где дольше текла кровь. Норма 1-7 мин. Это время увеличено при тромбоцитопениях (менее 100х10⁹/л), при врожденных и приобретенных тромбоцитопатиях, лейкозах, уремии, опухолях печени, некоторых инфекционных заболеваниях, болезни Виллебранда, гипофибриногенемии, применении аспирина, С-гиповитаминозе, гипофункции коры надпочечников. Время уменьшено при повышенной спастической способности капилляров.

Метод Сухорева – определяется начало свертывания, конец и диапазон, В норме начало свертывания 30 сек.- 2 мин., конец – 3-4-5 мин. Если удлинено начало свертывания, то можно думать о нарушении тромбоцитарного звена или дефиците факторов I фазы. Если начало в норме, а конец удлинен, то можно думать о недостатке фибриногена для образования сгустка или передозировке гепарина. Если и начало, и конец удлинены, то это значит, что что-то мешает образованию сгустка – это либо глубокая гипофибриногенемия, либо идет активация фибринолиза. Бывает, что нет начала и конца – при афибриногенемии, ДВС – синдроме.