- •1. Основные этапы развития бактериологии, вирусологии и иммунологии. Л.Пастер, р.Кох, и.Мечников, д.Ивановский и другие корифеи мировой и отечественной науки.
- •2. Принципы современной классификации микробов. Понятие о виде, разновидности, биовариантах, серовариантах, фаговариантах.
- •3.Основные методы исследования морфологии бактерий. Микроскопия. Методы окраски микробов и их отдельных структур.
- •Специальные методы окраски бактерий
- •4. Морфология, ультраструктура и химический состав бактерий. Субклеточные формы бактерий: протопласты, сферопласты, l-формы бактерий.
- •5. Основные различия прокариот и эукариот, прокариот и вирусов.
- •6. Споры и капсулы. Методы их выявления.
- •7. Размножение бактерий. Скорость и фазы размножения в стандартных условиях. Понятие об м-концентрации.
- •8. Энергетический и конструктивный метаболизм бактерий.
- •9. Условия культивирования микробов. Требования к питательным средам. Классификация питательных сред.
- •10. Микробные ферменты, их использование в культуральной и биохимической идентификации бактерий.
- •11. Понятие о чистой культуре микроба, штамме, клоне. Методы выделения чистых культур аэробных бактерий.
- •12. Выделение и культивирование строгих анаэробов и микроаэрофильных бактерий.
- •13. Понятие об асептике, антисептике, стерилизации и дезинфекции. Асептические и дезинфицирующие вещества.
- •14. Действие физических факторов на микроорганизмы. Методы стерилизации.
- •15. Бактериофаг. Получение, титрование и практическое применение.
- •16. Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Умеренные фаги. Лизогения.
- •17. Генетический аппарат у бактерий. Изменчивость микроорганизмов. Формы изменчивости: генотипическая, фенотипическая.
- •18. Генетические рекомбинации: трансдукция, трансформация, конъюгация, транспозиция. Понятие о генной инженерии.
- •19. Нехромосомные генетические факторы у бактерий (плазмиды, транспозоны,бактериофаги).
- •20. Молекулярные методы диагностики инфекций: полимеразная цепная реакция и другие.
- •21. Учение о микробном антагонизме. Антибиотики, их классификация и получение.
- •22. Определение чувствительности микробов к антибиотикам. Понятие о минимальной ингибирующей концентрации (мик) и терапевтической дозе.
- •23. Механизмы возникновения и распространения лекарственной устойчивости у бактерий. Осложнения при антибиотикотерапии.
- •24. Санитарно-бактериологическое исследование воздуха; методы и критерии оценки.
- •25. Санитарно-бактериологическое исследование продуктов детского питания и молока; методы и критерии оценки.
- •26. Санитарно-бактериологическое обследование лечебных и детских учреждений, материал для исследования, методы, критерии оценки.
- •27. Цели и задачи санитарной микробиологии. Критерии оценки санитарного состояния объекта.
- •29. Санитарно-бактериологическое исследование водных объектов: методы и критерии оценки (микробное число и индекс бгкп ).
- •33. Дисбиоз кишечника у детей: причины возникновения, последствия, диагностика. Пробиотические лечебно-профилактические препараты.
- •34. Морфология, ультраструктура и классификация вирусов.
- •35. Молекулярно-генетическое разнообразие вирусов. Варианты стратегии рнк-геномных вирусов.
- •36. Методы культивирования вирусов. Способы бактериальной деконтаминации биосубстратов перед вирусологическим исследованием.
- •37. Основные стадии репродукции вируса в клетке.
- •38. Типы взаимодействия вируса и клетки (продуктивный, абортивный, интеграционный )
- •39.Современные представления о вирусном онкогенезе. Онкогенные папилломавирусы человека, роль в патологии, достижения в борьбе с ними.
- •40. Особенности противовирусной химиотерапии.
- •41. Природа прионов и прионовых болезней (куру, болезни Герстманна-Штрейсслера, Крейтцфельдта-Якоба, смертельной семейной бессонницы и др.)
- •4. Патогенность и вирулентность. Основные механизмы и факторы патогенности микробов.
- •5. Формы инфекций: экзогенная и эндогенная, очаговая и генерализованная, моно- и смешанная, вторичная, реинфекция и суперинфекция, персистирующая инфекция.
- •Иммунная система: организация и функция.
- •Медиаторы иммунной системы: иммуноцитокины (интерлейкины, интерферон, туморнекротизирующий фактор, колониестимулирующий фактор и др.)
- •Межклеточная кооперация в иммуногенезе. Механизм “двойного распознавания” чужеродной антигенной информации.
- •9. Клонально-селекционная теория иммунитета.
- •10.Иммунологическая память: природа, биологическое значение.
- •11. Иммунологическая толерантность: природа, биологическое значение и последствия срыва иммунологической толерантности.
- •12. Антигены. Антигенные детерминанты. Протективные антигены. Полноценные и неполноценные антигены.
- •13. Антигенная структура микробов. Сероидентификация бактерий.
- •14. Гуморальные и клеточные факторы неспецифической защиты. Возрастные особенности.
- •15. Система комплемента. Классический и альтернативный пути активации. Возрастные особенности.
- •16. Фагоцитарная реакция, роль лизосомного аппарата фагоцитов. Критерии оценки системы фагоцитоза. Возрастные особенности фагоцитоза.
- •8. Выброс продуктов деградации.
- •17. Гуморальный иммунный ответ: классы иммуноглобулинов, возрастная динамика, защитная функция антител при инфекции.
- •18. Роль секреторных иммуноглобулинов в местном иммунитете у детей и взрослых. Иммунные факторы женского грудного молока.
- •19. Клеточный иммунный ответ: субпопуляция т-лимфоцитов, их значение в противовирусном, трансплантационном и противоопухолевом иммунитете. Возрастные особенности клеточного иммунитета.
- •20. Реакция антиген-антитело. Полные и неполные антитела.
- •21. Монорецепторные агглютинирующие сыворотки. Диагностикумы.
- •22. Реакция агглютинации и ее варианты (бактериальная ра, рнга, коагглютинация, латекс-агглютинация).
- •23. Реакция гемагглютинации, торможения гемагглютинации и гемадсорбции в вирусологической практике.
- •26. Реакция связывания комплемента. Реакция иммунного гемолиза. На неизестные антитела. Если гемолиза нет то реакция положительная и человек болен.
- •29. Особенности иммунитета и неспецифической резистентности организма при вирусных инфекциях.
- •33. Гиперчувствительность замедленного типа (т-зависимая аллергия). Кожные аллергические реакции в диагностике инфекционных болезней.
- •35. Живые вирусные вакцины. Применение в педиатрической практике.
- •Вакцинация против вирусного гепатита( 0-1-2-12-группа риска, либо 0-3-6), полиомиелита( 3, 4, 6,18,20), корь краснуха паротит( 12, 6 лет)
- •36. Серотерапия и серопрофилактика. Предупреждение сывороточной болезни и анафилактического шока у детей.
- •37. Вакцинопрофилактика и вакцинотерапия.
- •38. Живые вакцины. Получение, требования к вакцинным штаммам, достоинства и недостатки живых вакцин.
- •40. Перечень вакцин для плановых профилактических прививок у детей. Оценка поствакцинального иммунитета.
23. Реакция гемагглютинации, торможения гемагглютинации и гемадсорбции в вирусологической практике.
Простейшая из подобных реакций — агглютинация эритроцитов, или гемагглютинация, применяемая для определения групп крови в системе AB0. Для определения агглютинации (или её отсутствия) используют стандартные антисыворотки с анти-А и анти-В-агглютининами. Реакция называется прямой, так как исследуемые Аг — естественные компоненты эритроцитов.
Общие с прямой гемагглютинацией механизмы имеет вирусная гемагглютинация. Многие вирусы способны спонтанно агглютинировать эритроциты птиц и млекопитающих, их добавление к суспензии эритроцитов вызывает образование агрегатов из них.
Эти реакции называются пассивными,, так как при их проведении используют Аг (или AT), искусственно сорбированные на поверхности различных корпускулярных частиц.
Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) — одна из наиболее чувствительных серологических реакций. Основана на способности AT взаимодействовать с Аг, фиксированными на различных эритроцитах, которые при этом агглютинируют. Для большей стабильности диагностикумов эритроциты формалинизируют.
Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) - метод идентификации вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного, основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов препаратом, содержащим вирус, в присутствии иммунной к нему сыворотки крови. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) основана на блокаде, подавлении антигенов вирусов антителами иммунной сыворотки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты. РТГА применяют для диагностики многих вирусных болезней, возбудители которых (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещевого энцефалита и др.) могут агглютинировать эритроциты различных животных.
Реакция гемадсорбции - ставится на культурах ткани при некоторых вирусных болезнях с целью обнаружения вируса в клетках зараженных культур ткани на ранних стадиях размножения вируса, то есть до появления цитопатогенного действия (ЦПД). По своей сущности эта реакция не является серологической и основана на способности зараженных вирусом клеток культуры ткани адсорбировать на себе эритроциты.
24. Реакция преципитации. Преципитация в геле. Иммуноэлектрофорез.
Реакция преципитации (РП) - это формирование и осаждение комплекса растворимого молекулярного антигена с антителами в виде помутнения, называемого преципитатом. Он образуется при смешивании антигенов и антител в эквивалентных количествах; избыток одного из них снижает уровень образования иммунного комплекса. РП ставят в пробирках (реакция кольцепреципитации), в гелях, питательных средах и др. Широкое распространение получили разновидности РП в полужидком геле агара или агарозы: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и др. Механизм. Проводится с прозрачными коллоидными растворимыми антигенами, экстрагированными из патологического материала, объектов внешней среды или чистых культур бактерий. В реакции используют прозрачные диагностические преципитирующие сыворотки с высокими титрами антител. За титр преципитирующей сыворотки принимают то наибольшее разведение антигена, которое при взаимодействии с иммунной сывороткой вызывает образование видимого преципитата — помутнение. Реакция кольцепреципитации ставится в узких пробирках (диаметр 0,5 см), в которые вносят по 0,2—0,3 мл преципитирующей сыворотки. Затем пастеровской пипеткой медленно наслаивают 0,1—0,2 мл раствора антигена. Пробирки осторожно переводят в вертикальное положение. Учет реакции производят через 1—2 мин. В случае положительной реакции на границе между сывороткой и исследуемым антигеном появляется преципитат в виде белого кольца. В контрольных пробирках преципитат не образуется.
Иммуноэлектрофорез Образец антигенного материала разделяют электрофорезом в геле (обычно агарозном), в результате чего формируются характерные зоны. Далее параллельно зонам электрофореза вносится преципитирующая антисыворотка, антигены и антисыворотка диффундируют навстречу друг к другу, и в месте встречи антисыворотки с антигеном появляются линии преципитации, имеющие форму дуги.
25. Иммунолюминесцентный метод и его применение в диагностике инфекционных заболеваний.
Иммунофлюоресцентный метод (РИФ, реакция иммунофлюоресценции, реакция Кунса) - метод выявления специфических АГ с помощью АТ, конъюгированных с флюорохромом. Обладает высокой чувствительностью и специфичностью. Применяется для экспресс-диагностики инфекционных заболеваний (идентификация возбудителя в исследуемом материале), а также для определения АТ и поверхностных рецепторов и маркеров лейкоцитов (иммунофенотипирование) и др. клеток. Обнаружение бактериальных и вирусных антигенов в инфекционных материалах, тканях животных и культурах клеток при помощи флюоресцирующих антител (сывороток) получило широкое применение в диагностической практике. Приготовление флюоресцирующих сывороток основано на способности некоторых флюорохромов (например, изотиоцианата флюоресцеина) вступать в химическую связь с сывороточными белками, не нарушая их иммунологической специфичности. Различают три разновидности метода: прямой, непрямой, с комплементом. Прямой метод РИФ основан на том, что антигены тканей или микробы, обработанные иммунными сыворотками с антителами, меченными флюорохромами, способны светиться в УФ-лучах люминесцентного микроскопа. Бактерии в мазке, обработанные такой люминесцирующей сывороткой, светятся по периферии клетки в виде каймы зеленого цвета. Непрямой метод РИФ заключается в выявлении комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой сыворотки, меченной флюорохромом. Для этого мазки из взвеси микробов обрабатывают антителами антимикробной кроличьей диагностической сыворотки. Затем антитела, не связавшиеся с антигенами микробов, отмывают, а оставшиеся на микробах антитела выявляют, обрабатывая мазок антиглобулиновой (антикроличьей) сывороткой, меченной флюорохромами. В результате образуется комплекс микроб + антимикробные кроличьи антитела + антиглобулиновая сыворотка, меченные флюорохромом. Этот комплекс наблюдают в люминесцентном микроскопе, как и при прямом методе.