102. Методы определения активности I фазы свертывания крови.

Определение активности первой фазы свертывания крови. Наиболее простой пробой

является определение времени рекальцификации плазмы. При ней отмечается время, в

течение которого свертывается оксалатная плазма после прибавления к ней оптимального

количества хлорида кальция. Проба характеризует свертываемость крови в целом.

Результаты ее несколько отличаются от таковых при пробе свертывания цельной крови, в

которой участвуют и факторы форменных элементов. Нормальное время рекальцификации около 60—70 с.

Тест потребления протромбина. Этот тест характеризует активность тех факторов

плазмы, которые используют протромбин в процессе образования тромбина. Исследуют

протромбиновое время плазмы (см. далее) и сыворотки. Чем больше протромбина

потребляется при свертывании плазмы, тем меньше его остается в сыворотке, тем дольше

она будет свертываться, и наоборот. Следовательно, укорочение времени при проведении

теста свидетельствует о нарушении тромбопла стинообразования.

103. Методы определения активности II фазы свертывания крови.

Активность второй фазы свертывания крови — фазы образования тромбина — зависит от концентрации

Для получения оксалатной плазмы 9 частей крови соединяют с 1 частью 1,34% раствора ок-салата натрия и центрифугированием отделяют плазму. протромбина. Определение ее сложно, поэтому прибегают к установлению суммарной активности протромбинового комплекса (факторы II, V, VI, VII и X). Метод состоит в определении скорости свертывания оксалатной плазмы после прибавления к ней избытка

тромбопластина и хлорида кальция (время Квика). Так как время свертывания зависит от

ряда условий (препарат тромбопластина, температура и др.), обычно определяют

протромбиновый индекс — выраженное в процентах отношение протромбинового

времени плазмы донора к протромбиновому времени плазмы больного (в норме равен 80

—100%).

Ту же фазу свертывания характеризует толерантность плазмы к гепарину. Проба

состоит в определении изменения (по сравнению с нормой) времени свертывания

оксалатной плазмы после прибавления к ней гепарина с последующей рекальцификацией.

При увеличении активности коагулянтов (склонность к тромбообразованию)

толерантность плазмы к гепарину увеличивается, время свертывания плазмы

укорачивается. Если преобладает активность антикоагулянтов (склонность к

кровоточивости), время удлиняется.

104. Методы определения активности III фазы свертывания крови.

Определение активности третьей фазы свертывания кров и. Основной метод

исследования — определение уровня фибриногена. О последнем судят по эквивалентному

ему содержанию фибрина.

Дополнительные методы исследования. Помимо перечисленных относительно простых

методов, имеется значительное количество проб, определяющих активность тех или иных

компонентов свертывающей и противосвертывающей систем крови. Большинство из них

сложно. Из более простых методов широкое применение нашли две пробы,

характеризующие общую направленность процесса свертывания крови — наклонность к

гипо- или гиперкоагуляции. Это тромботест и тромбоэластография.

Тромботест. При помещении 0,1 мл оксалатной плазмы в 5 мл 0,5% раствора хлорида

кальция в зависимости от способности крови к свертыванию после 30-минутной

инкубации при температуре 37° С происходит выпадение фибрина различного характера

— от опалесценции или мельчайших крупинок фибрина до плотного волокнистого комка.

Различают семь степеней тромботеста, из которых первые три соответствуют

гипокоагуляции, IV— V — нормальной коагуляции, VI—VII — гиперкоагуляции.

Тромбоэластография. Этот метод позволяет графически отобразить весь процесс

спонтанного свертывания неизмененной (нативной) крови или плазмы.

Взятую из вены через силиконированную иглу кровь помещают в небольшую кювету и опускают в нее

стержень с диском. Электродвигатель сообщает кювете колебательные движения. Пока кровь жидкая, диск

при движении кюветы не смещается. По мере сгущения кровь увлекает в движение диск и стержень с

прикрепленным к нему зеркальцем, которое отражает падающий на него луч света. Колебательные

движения луча фиксируются на медленно движущейся фотобумаге в виде зигзагообразной линии. Если

обвести контуры зигзагов, получается характерная фигура, называемая тромбоэластограммой. Измеряя

некоторые ее отрезки, можно определить ряд показателей коагуляции, в частности «время реакции»,

соответствующее продолжительности первой и второй фаз свертывания, время образования сгустка (третья

фаза), его эластичность, прочность и другие дополнительные показатели, отражающие гипер- или

гипокоагуляцию.

105. Общие представления о коагулограмме.

Это анализ гемостаза (системы свертываемости крови). Коагулограмма (анализ крови на гемостаз) — необходимый этап исследования свертываемости крови при беременности, перед операциями, в послеоперационном периоде, то есть в тех ситуациях, когда пациента ожидает некоторая потеря крови. Также гемостазиограмма крови входит в комплекс обследований при варикозном расширении вен нижних конечностей, аутоиммунных заболеваниях и болезнях печени.

106. Методы выявления нарушения проницаемости капилляров.

В клинических условиях о проницаемости кровеносных капилляров можно судить по косвенным признакам, а также определять ее методами, основанными на прижизненном количественном изучении перехода белков через капилляры. Так, при капилляроскопии ногтевого ложа и биомикроскопии конъюнктивы по картине фона делают заключение о состоянии проницаемости капилляров.

Существуют более точные методы определения проницаемости капилляров, которые объединяются в 3 группы, основанные: 1) на изучении скорости удаления из тканей введенных веществ; 2) на оценке состава тканевой жидкости (экссудата или транссудата); 3) на определении быстроты перехода из крови в ткани естественных или введенных извне компонентов крови [Казначеев В.П., Дзизинский А.А., 1975].

Первая группа предусматривает изучение скорости резорбции радиоактивных, люминесцентных и других веществ, введенных в ткань обычно подкожно. Так, скорость поступления в кровь изотопов, введенных внутрикожно, подкожно, внутримышечно, в ткань органа, определяют по времени полувыведения или полурезорбции, которое вычисляют по полулогарифмическому графику [Kety S., 1949]. Несмотря на широкое применение этого метода, трактовка его результатов остается нечеткой [Чернух A.M. и др., 1975].

Вторая группа методов определения проницаемости капилляров основана на изучении состава тканевой жидкости из пузырька на коже, получаемого путем наложения кантариди- нового пластыря или внутрикожного введения гистамина. О состоянии проницаемости судят по количеству образовавшейся жидкости и содержанию в ней белка [Карачунский М.А., Кузнецова Б.А., 1970].

В основу третьей группы методов положен наиболее физиологичный принцип — оценка перехода из сосудистого русла в ткани составных частей плазмы крови (жидкость и белки). При введении в кровеносное русло красящих и флюоресцирующих веществ они образуют комплексы с белками плазмы, по скорости выведения которых из крови и судят о состоянии общей сосудистой проницаемости [Чернух А.М, 1979]. В качестве метки обычно используют краски (синий Эванса, трипановый синий, конго красный и др.) или флюоресцирующие вещества (флюоресцеин, акрихин, сульфацил-натрий). При использовании изотопов белки (чаще всего альбумин и фибриноген) метят радиоактивным йодом [Lassen N. et al, 1983]. По мнению некоторых авторов, указанные методы не вполне адекватны [Казначеев В.П., Дзизинский А.А., 1975].

К третьей группе относят также методы, основанные на изучении обмена естественных крупномолекулярных частиц (белков плазмы) между кровью и тканью. Проба Лендиса [Lan- dis E. et al., 1932], относящаяся к этой группе методов, получила наибольшее признание клиницистов. Она основана на определении количества белка и жидкости, вышедших из капиллярного русла. Расчет производят по разности концентрации белка и гематокритного числа крови, взятой из вены руки после наложения на плечо манжетки на 30 мин при давлении 40 мм рт. ст. и из вены другой (»контрольной») руки.

Г.П. Артынов и Е.Д. Семиглазова (1949) разработали метод, в основу которого положено представление о переходе белков крови в направлении кровь—ткань и обратно. Сущность его заключается в определении артериовенозной разницы по белку и гематокритному числу крови, взятой из вены и артерии одной руки исследуемого. Проницаемость определяется по формуле Лендиса. Этот метод считается наиболее физиологичным, так как он позволяет определить проницаемость капилляров в естественных условиях, без какого-либо дополнительного вмешательства. Однако взятие крови из артерии иногда весьма затруднительно, что ограничивает применение метода.