Практическая работа №1. Определение количества эритроцитов в крови у чело-века.

Цель работы: Ознакомление с методикой подсчета числа эритроцитов.

Методика: Разводящей жидкостью для эритроцитов служит 0,85-1% раствор хлорида натрия (физ. раствор). В пробирку наливают 4 мл разводя- щего раствора. Пипеткой от гемометра Сали набрать приготовленную кровь до метки, что соответствует 0,02 мл. Столбик крови должен быть цельным и не содержать пузырьков крови. Обтерев кончик капилляра ваткой перенести набранную кровь в пробирку с разводящим раствором. Тщательно переме- шать. Разведение в пробирке 1:200.

Легким движениями больших пальцев обеих рук притереть покровное стекло к счетной камере до появления цветных ньютоновых колец. Стеклян- ной палочкой набрать каплю разведенной крови и поместить в счетную каме- ру (на кончик бороздки, находящейся сбоку от центральной пластинки каме- ры). Жидкость сама заполнит щель толщиной 0,1мм между центральной пла- стинкой и покровным стеклом. Поставить камеру под большое увеличениемикроскопа и приступить к подсчету.

Подсчитать число эритроцитов А в больших квадратах, расположенных по диагонали, что составляет 80 маленьких. При подсчете следует руко- водствоваться правилом Егорова: «Относящимися к данному квадратику счи- таются те эритроциты, которые лежат как внутри, так и на левой и верхнейгранице квадратика». Среднее количество эритроцитов в одном маленьком квадратике А/80. Зная, что объем части камеры над одним маленьким квадра- тиком равен 1/4000 мм3 умножить найденное число на 4000 и на 200, т.е. на разведение.

Х = (А х 4000 х 200) / 80, где Х - число эритроцитов в 1 мм3 крови.

В норме число эритроцитов в 1 л крови у женщин 3,7 - 4,7 10¹²/л; у муж- чин 4,0 - 5,0 10¹²/л.

Оформить результаты работы и выводы.

Практическая работа №2. Определение количества гемоглобина в крови.

Цель работы: Знакомство с методикой определения количества гемо-глобина.

Методика: Определение количествагемоглобина производится колори-метрическим способом.

Гемометр Сали имеет 3 пробирки одинакового диаметра, из которых две крайние запаяны и содержат стандартные растворы хлорида гематина, а средняя - лабораторная. В лабораторную пробирку налить 0,1 № раствора со- ляной кислоты до первой нижней отметки, затем пипеткой от гемометраСали набирать 0,02 мл приготовленной крови и внести в эту же пробирку . Гемоглобин крови под действием 0,1 N раствора соляной кислоты превраща- ется в хлорид гематина бурого цвета. По истечении 5-6 минут к полученному раствору по каплям прибавлять дистиллированную воду до тех пор, пока цвет исследуемого раствора не сравняется с цветом стандартов. Каждый раз после добавления воды перемешивать содержимое пробирки стеклянной па- лочкой. Цвет жидкости стандартов сравнивают при дневном освещении в

проходящем свете, держа в вытянутой руке на уровне глаз. Определяют, ка- кому делению шкалы соответствует нижний мениск жидкости (цена деления шкалы равна 0,2 г%). Количество гемоглобина при оформлении в бланке ана- лиза записывают в граммах на 1 л,для чего полученные данные умножают на 10.

Нормальные величины концентрации гемоглобина: у женщин 115 - 145г/л, умужчин 132 - 164г/л.

Оформить результаты работы и выводы.