- •Міністерство освіти і науки, молоді та спорту
- •Лабораторна робота № 1 органи, тканини і клітини імунної системи
- •Загальні відомості
- •Морфологія та функції крові.
- •Розміри та кількість формених елементів крові людини
- •Центральні і периферійні органи імунної системи.
- •Завдання на виконання:
- •Загальні відомості
- •Показники гемограми та лейкоцитарної формули здорової людини гемограма
- •Лейкоцитарна формула
- •Завдання на виконання:
- •Контрольні запитання:
- •Загальні відомості
- •Завдання на виконання:
- •Лейкоцитарна формула крові щурів
- •Контрольні запитання:
- •Лабораторна робота № 4 кількісне визначення антитіл методом локального гемолізу в гелі
- •Загальні відомості
- •Біологічні властивості т-залежних і т-незалежних антигенів
- •Гель, що мiстить антитiла
- •Завдання на виконання:
- •Контрольні запитання:
- •Лабораторна робота № 5 дослідження фагоцитарної ланки імунітету (початок). Вивчення кисеньзалежної бактерицидності фагоцитів в нст-тесті
- •Загальні відомості
- •Завдання на виконання:
- •Контрольні запитання:
- •Загальні відомості
- •Завдання на виконання:
- •Контрольні запитання:
- •Лабораторна робота № 7 імунодіагностика. Підбір імунокоригуючих препаратів
- •Загальні відомості
- •Препарати природного походження
- •Тимічні препарати
- •Препарати імуноглобулінів
- •Препарати лізатів мікроорганізмів (вакцинуючі імунотропні препарати)
- •Синтетичні імупотропні засоби
- •Рекомбінантні імунотропні препарати
- •Завдання на виконання:
- •Контрольні запитання:
- •Лабораторна робота № 8 підсумкове заняття
- •Завдання на виконання:
- •Рекомендована література
- •Підготовка скляного посуду
- •Підготовка пластикового посуду
- •Рецепти приготування реактивів, барвників, поживних середовищ лабораторна робота №2.
- •Лабораторна робота №3.
- •Лабораторна робота №4.
- •Лабораторна робота №5.
- •Лабораторна робота №6.
- •Лабораторна робота №7.
- •Основи імунології лабораторний практикум
Завдання на виконання:
1. Відібрати самостійно кров з хвостової вени щурів: 1 – 2 краплини крові крапнути на предметне скло та кілька краплин відібрати у пробірку, попередньо крапнувши на предметне скло та у пробірку гепарин.
2. Приготувати мазки крові, використовуючи кров людини та тварин (щурів).
Поетапне приготування мазка крові
Крок. 1 Помістити невелику краплю крові на один кінець предметного скла. Тримати скло в горизонтальному положенні | |
Крок 2. Розташувати допоміжне скельце під кутом 45° до основного, на яке нанесена краплина крові. Дати краплині крові розтектися по шліфу допоміжного скельця | |
Крок 3. Протягнути краплю крові по предметному склу, швидко просуваючи допоміжне предметне скельце до краю основного. | |
Крок 4. Мазок має бути тонким, закінчуватися «віничком».
Мазок швидко підсушити на повітрі. |
3. Підсушити мазки, підписати олівцем та залишити до наступного заняття.
4. У зразках крові, які були відібрані у пробірки провести кількісний облік клітин: визначити відсоток лейкоцитів, еритроцитів та тромбоцитів за допомогою камери Горяєва.
5. Визначити життєздатність клітинних суспензій еритроцитів та лейкоцитів:
Розчини трипанового синього та еозину пропускають крізь паперовий фільтр і змішують у співвідношенні 1:1. Додають 0,5 мл одержаного барвника та 0,1 мл суспензії досліджуваних клітин з концентрацією 5×107 клітин/мл. Заповнюють камеру Горяєва і підраховують 100 клітин. Живі клітини безбарвні, мертві клітини мають синьо-фіолетове забарвлення внаслідок проникнення барвника крізь ушкоджену мембрану. Зависина клітин вважається життєздатною, якщо мертві клітини складають не більше 10 – 13%.
6. Порівняти значення отриманої лейкоцитарної формули аналізованої крові з нормальними показниками.
7. Оформити протокол заняття, зробити висновки.
Контрольні запитання:
Чому еритроцитам та тромбоцитам не потрібне ядро?
В чому полягають особливості будови лейкоцитів?
Яка клітина є центральною клітинною в імунній системі?
Що таке лейкоцитарна формула?
Камера Горєва, техніка підрахунку.
Техніка приготування сумішей еритроцитів та лейкоцитів для визначення концентрації клітин.
Меланжер, будова, правила використання.
ЛАБОРАТОРНА РОБОТА № 3
МЕТОДИ ДОСЛІДЖЕННЯ ЛІМФОЦИТІВ
(метод розеткоутворення)
Мета роботи: навчитися отримувати лімфоцити з дефібринованої крові; навчитися підраховувати кількість різних субпопуляцій лімфоцитів; навчитися готувати препарати крові для визначення співвідношення Т- та В- лімфоцитів.
План:
Загальна характеристика лімфоцитів та їх субпопуляцій.
Маркери Т-лімфоцитів, визначення Т-клітин та їх субпопуляцій.
Т-клітинний рецептор і пов’язані з ним структури.
Генез Т-лімфоцитів.
Формування субпопуляцій Т-клітин.
Рецептор В-клітин для розпізнавання антигену. Його будова.
Генез В-лімфоцитів.
Субпопуляції В-лімфоцитів, їх маркери, функції.
Матеріали та обладнання: світловий мікроскоп, імерсійне масло, знежирені предметні скельця, дефібринована кров людини або лабораторних тварин, порошок фіколу, 60% або 76% розчин верографіну, розчин фікол-урографіну з питомою густиною р = 1,077 г/мл; бараняча кров (еритроцити барана), розчин Хенкса, середовище 199, гемолітична сироватка, мишача сироватка, Т- та В-системи, фарба Романовского-Гімзе, 0,9%-ий розчин NaCl, етиловий спирт; стерильні пластикові або скляні пробірки об’ємом 1 – 2 мм3; центрифуга, центрифужні пробірки, зрівноважувачі для пробірок, пастерки, гумові груші №1, (або готові препарати для підрахунку Т- та В-лімфоцитів).