Завдання на виконання:

1. Самостійно виділити лімфоцити з периферійної крові в градієнті густин фікол-верографіну (центрифугування, 1500 об/хв, 15 – 20 хв) (див. Лаб. робота №3):

1.1. В чисту пробірку №1 наливають 1 мл гепаринізованої крові і додають 3 мл фізіологічного розчину.

1.2. В пробірку №2 наливають 5 мл розчину фікол-верографіну (ρ = 1,077 г/мл). Обережно, по внутрішній стороні пробірки пастеркою з грушею додають 2,5 – 3 мл розведеної крові з пробірки №1.

1.3. Кров центрифугують упродовж 20 хв за кімнатної температури при 1500 об/хв.

1.4. Після центрифугування в пробірці спостерігають чотири фракції (Рис.3.1): І – уламки клітин і еритроцити; ІІ – градієнт густини фікол-верографіну; ІІІ – лімфоцити; ІV – плазма крові.

2. Обережно підвести кінчик пастерки до шару лімфоїдних клітин і за допомогою гумової груші відібрати ці клітини і перенести їх в стерильну пробірку.

3. Клітини відмити в середовищі 199 за допомогою центрифугування (центрифугування 1500 об/хв, 5 – 7 хв).

4. Після центрифугування надосадову рідину злити, до осаду додати 0,5 – 1 мл середовища 199, осад ресуспендувати.

5. У пробірці №2 змішати 4,5 мл (мг) імуномодулятора (Імунал, настойка ехінацеї тощо) та 5 мл середовища 199 – Ім.-система.

6. До 0,1 мл виділених лімфоцитів додати 0,1 мл Ім.-системи. Добре струсити та поставити на 1 год в термостат за 37°С.

7. Проби дістати з термостату та відмити 2 рази фіз. розчином (центрифугуванням 1500 об/хв, 5 – 7 хв).

8. Надосадову рідину злити, до осаду додати 0,1 мл Т-системи, струсити і поставити на 1 год в холодильник за температури 6 – 8°С.

9. Дістати проби з холодильника та за допомогою камери Горяєва нативно під мікроскопом (40) підрахувати кількість лімфоцитів, що зв’язали 2 і більше еритроцитів.

10. Оформити протокол заняття, зробити висновки.

Контрольні запитання:

1. Дайте визначення поняттю "імунотропні засоби".

2. Наведіть класифікцію імунотропних засобів.

3. Перерахуйте основні принципи призначення імунотропних засобів.

4. Наведіть приклади імунотропних препаратів природного походження.

5. Наведіть приклади імунотропних препаратів синтетичного походження.

6. Наведіть приклади імунотропних препаратів, які діють переважно на рівні факторів природженої резистентності.

7. Наведіть приклади імунотропних препаратів, які діють переважно на клітинну ланку імунітету.

8. Наведіть приклади імунотропних препаратів, які діють переважно на гуморальну ланку імунітету.

9. В чому полягають особливості застосування вакцинних препаратів?

10. Перерахуйте основні переваги та недоліки застосування вакцин.

Лабораторна робота № 8 підсумкове заняття

Мета роботи: підвести підсумки лабораторних занять.

Матеріали та обладнання: протоколи занять, оформлені належним чином.

Завдання на виконання:

1. Підвести підсумки лабораторних занять.

2. Перевірити протоколи.

3. Провести модульний контрольРЕКОМЕНДОВАНА ЛІТЕРАТУРА

1. Петров Р.В. Иммунология. – М.: Медицина, 1982. – 368 с.

2. Вершигора А.Е. Общая иммунология. – К.: Вища шк., 1990. – 735 с.

3. Імунологія / Вершигора А.Ю., Пастер Є.У., Колибо Д.В., Позур В.К., Віхоть М.Є, Михальський Л.О., Швець Ю.В., Холодна Л.С., Моложава О.С. – К.: Вища шк., 2005. – 599 с.

4. Ройт А, Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. – М.: Мир, 2000. – 581 с.

5. Дранник Г.Н. Иммунотропные препараты. – К.: Здоров’я, 1994. – 287 с.

6. Ярилин А.А. Основы иммунологии. – М.: Медицина, 1999. – 608 с.

7. Галактионов В.Г. Иммунология. – М.: Нива России, 2000. – 488 с.

8. Маянский А.Н. Лекции по иммунологии. – Нижний Новгород: Изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 2003. – 272 с.

9. Хаитов Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология. – М.: Медицина, 2000. – 432 с.

10. Скок М.В. Основи імунології. Курс лекцій. – К.: Фітосоціоцентр, 2002. – 152 с.

11. К.Г.Гаркава. Методи імунологічних досліджень: Конспект лекцій для студ. напряму підготовки 0929 «Біотехнологія» денної та заочної форми навчання. – К.: НУХТ, 2009. – 53 с. (Шифр 7363).

12. Практикум по иммунологии / И.А. Кондратьева, А.А. Ярилин, С.Г. Егорова. – 2-е изд., испр. и доп. – М.: Издательский центр «Академия», 2004. – 272 с.

13. Навчальний посібник з клінічної імунології та алергології для аудиторної роботи студентів / Казмірчук В.Є. та ін. – 2-е вид., доп. . – К.: ТОВ «Поліграф плюс», 2008 – 263 с.

14. Медуницин Н.В. Вакцинология. – М.: Триада-Х, 1999. – 327 с.

15. Плейфэр Дж., Чейн Б.М. Наглядная иммунология. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. – 96 с.

16. Хаитов Р.М. Физиология иммунной системы. – М.: Винити РАН, 2001. – 224 с.

17. Возианов А.Ф., Бутенко А.К., Зак К.П. Цитокины. Биологические и противоопухолевые свойства. – К.: Наукова думка, 1998. – 317 с.

18. Иммунология: Практикум / Пастер Е.У., Овод В.В., Позур В.К., Вихоть Н.Е. – К.: Выща шк. Изд-во при Киев. ун-те, 1989. – 304 с.

19. Гистология / Под ред. Афанасьева Ю.И., Юриной Н.А. – М.: Медицина, 1989. – 672 с.

Додатки