Депарпамент образования и науки

ХАНТЫ-МАНСИЙСКОГО АВТОНОМНОГО ОКРУГА – ЮГРЫ

. .

СУРГУТСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

ХАНТЫ-МАНСИЙСКОГО АВТОНОМНОГО ОКРУГА

══════════════════════

Кафедра микробиологии

МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

В ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ

(методическое пособие)

Сургут

Издательство СурГУ

2014

УДК 579.2.083 (072)

ББК 28.4я73

М 545 Методы исследований при идентификации микроорганизмов / Метод. пособие / Сост.: Т.Д. Ямпольская, А.И. Фахрутдинов. – Сургут: Изд-во СурГУ, 2014. – 45 с.

В пособии предложено подробное описание и последовательность работы с темнопольным и фазово-контрастным конденсорами. Приведены схемы приготовления реактивов и красителей, используемых в микробиологии при изучении морфологических характеристик микробных культур. Дано описание культуральных свойств микроорганизмов, выделяемых из различных субстратов. Указаны наиболее распространенные физиолого-биохимические тесты для проведения идентификации микроорганизмов.

Методическое пособие составлено в соответствии с учебным планом и предназначено для студентов специализации «микробиология» биологического факультета.

Библиогр.: 17 назв.

Печатается по решению редакционно-издательского совета Сургутского государственного университета

Рецензенты: Ю.А. Старых, кандидат медицинских наук, доцент

кафедры физиологии Сургутского государственного

университета;

Л.Д. Зарянова, кандидат биологических наук, доцент

кафедры ботаники Сургутского государственного

университета.

Сургутский государственный университет, 2008

Оглавление

Глава 1.	Особенности некоторых методов микроскопии …...	5
1.1.	Устройство и принцип работы темнопольного конденсора ОИ-13 ……………………………….........	5
	1.1.1. Условия работы с темнопольным конденсором	6
	1.1.2. Порядок работы с темнопольным конденсором	6
1.2.	Принцип и порядок работы с фазово-контрастным устройством КФ-4 ………………………………..........	7
	1.2.1. Устройство фазово-контрастной приставки КФ-4 ……………………………………………..	8
	1.2.2. Порядок работы с фазово-контрастным устройством ..........................................................	8
Глава 2.	Методы окраски фиксированных препаратов ………	9
2.1.	Подготовка красителей и реактивов для окраски по методу Грама и техника окрашивания ……………....	9
	2.1.1. Особенности подготовки красителей …………	9
	2.1.2. Техника окраски по методу Грама ……….......	10
	2.1.3. Дифференциация бактерий по Граму без окрашивания ………………………………….....	10
2.2.	Выявление кислотоустойчивости и спиртоустойчивости бактерий ………………………	11
	2.2.1. Окраска по методу Циля-Нильсена ……………	11
	2.2.2. Красители и реактивы для окраски кислотоустойчивых бактерий ……………….....	12
2.3.	Методы окраски спор у бактерий ……………………	12
	2.3.1. Метод Циля — Нильсена в модификации Мюллера …………………………………..........	13
	3.3.2. Окраска спор по методу Пешкова ......................	14
	2.3.3. Окраска спор по методу Виртца в модификации Саватеева ………………………	14
	2.3.4. Окраска спор по методу Виртца в модификации Шеффелера и Фултона …………	14
	2.3.5. Окраска спор по Битеру ……………………	15
	2.3.6. Реактивы и красители для окрашивания спор бактерий ……………………………………………….	15
2.4.	Методы окраски капсул ………………………………	15
	2.4.1. Окраска капсул по методу Бурри-Гинса ……	15
	2.4.2. Окраска капсул по методу Михина ……………	16
	2.4.3. Окраска капсул методом Кауфмана …………	16
	2.4.4. Реактивы и красители для окрашивания капсул	16
2.5.	Методы окраски жгутиков бактерий …………….......	17
	2.5.1. Окраска жгутиков по методу Леффлера ………	17
	2.5.2. Метод серебрения жгутиков по Морозову ……	18
	2.5.3. Окраска жгутиков по методу Грея ……………	19
2.6.	Окраска включений клеток микроорганизмов ………	19
2.7.	Окраска генома бактерий ……………………………	21
	2.7.1. Окраска генома бактерий методом Романовского-Гимза	21
	2.7.2. Выявление генома по реакции Фельгена	22
Глава 3.	Определение качественного состава микроорганизмов по культуральным, морфологическим и физиолого-биохимическим признакам …………………………………….	23
3.1.	Морфологические признаки …………………………	23
3.2.	Культуральные признаки	24
3.3.	Физиолого-биохимические признаки микроорганизмов ……..	31
	3.3.1.Тест на наличие каталазы ………………………	33
	3.3.2. Тест на наличие оксидазы……………………	33
	3.3.3. Окислительно-ферментативный (О/F) тест на использование глюкозы (тест Хью—Лейфсона)	34
	3.3.4. Тест на наличие уреазы ………………………	35
	3.3.5. Тест на наличие протеолитической активности протеиназы) ……………………...	36
	3.3.6. Тест на наличие диастазы (амилазы) …………	37
	3.3.7. Тест на наличие липаз …………………………	38
	3.3.8. Тест на использование углеводов и органических кислот …………………………	39
	3.3.9. Тест на редуцирующую способность микроорганизмов ……………………………	40
	3.3.10. Тест на декарбоксилазы и дегидролазы ……	41
	3.3.11. Тест на образование индола и сероводорода	42
	3.3.12. Тест на использование фумарата в анаэробных условиях …………………….........	44
Список использованной литературы ……………………………......		45