Добавил:
kiopkiopkiop18@yandex.ru Вовсе не секретарь, но почту проверяю Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

6 курс / Клинические и лабораторные анализы / Лабораторная_диагностика_туберкулеза_Ерохин_В_В_ред_

.pdf
Скачиваний:
3
Добавлен:
24.03.2024
Размер:
6.25 Mб
Скачать

Тема 6.3. Комплексные технические меры обеспечения биологической безопасности воздушной среды в лабораториях

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 1

Вопросы для самостоятельной проработки

технические меры контроля воздушной среды;

приточно-вытяжная вентиляция, специальное оборудование фильтрации;

 

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

 

1.

Приказ МЗ РФ № 109 от 21 марта 2003 г. «О совершенствовании

 

 

противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации.

 

2.

Приказ МЗСР РФ от 29.12.2010 г. №1224н «Об утверждении По-

 

 

рядка оказания медицинской помощи больным туберкулезом в

 

 

Российской Федерации».

 

3.

СП 1.3.232-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III–

 

 

IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитар-

 

 

ных болезней».

 

4.

СП 1.3.2518-09 «Безопасность работы с микроорганизмами III–

 

 

IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитар-

 

 

ных болезней дополнения и изменения № 1 к СП 1.3.2322-08»

 

5.

СП 3.1.1295-03 «Профилактика туберкулеза» от 25 июня 2003

СЛУШАТЕЛЯ

 

года

6.

ходов лечебно-профилактических учреждений». – М., 1999.

 

СП 3.1.1275-03 «Профилактика инфекционных заболеваний

 

 

при эндоскопических манипуляциях» М.2003г;

ТЕТРАДЬ

7.

СанПиН 2.1.7.727-99 «Правила сбора, хранения и удаления от-

8.

тельность». – М.2010 г.

 

СанПиН 2.1.3.2630-10 «Санитарно-эпидемиологические требо-

 

 

вания к организациям, осуществляющим медицинскую дея-

РАБОЧАЯ

 

 

568

Контрольные вопросы

1.Какие функции выполняет приточно-вытяжная вентиляция

влаборатории ПТУ?

2. Изложите принципы работы шкафа биологической безопасности 2-го класса

3. Перечислите лабораторное оборудование, обеспечивающее биологическую безопасность работы в лаборатории.

Тема 6.4. Калибровка и эксплуатация лабораторного оборудования

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 1

Вопросы для самостоятельной проработки

список лабораторного оборудования для БЛ разных функциональных уровней и КДЛ учреждений ПМСП, правила размещения оборудования в лаборатории;

условия эксплуатации и правила калибровки различного лабораторного оборудования;

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1.Внутрилабораторный контроль качества работы оборудования в микробиологических лабораториях лечебно-профилактиче-

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

569

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ СЛУШАТЕЛЯ

ских учреждений здравоохранения. Пособие для врачей. – ММА им. И.М.Сеченова. – Москва. – 2004. – 31 с.

2.Закон Российской Федерации «Об обеспечении единства измерений» от 27 апреля 1993 года №4871-1.

3.Методические указания по контролю работы паровых и воздушных стерилизаторов. МЗ СССР, 1991 г.

4.Методическое пособие «Перечень средств измерений в соответствии с областями измерительной техники, допущенных Госстандартом России (вошедшими в Госреестр) к применению в РФ (в санэпидслужбе России) по состоянию на 01.01.99 г.» МЗ РФ. Москва 1999 г.

5.Приказ МЗ РФ от 10.05.2000 г. №156 «О разрешении на применение в медицинских целях изделий медицинского назначения

имедицинской техники отечественною и зарубежного производства в РФ».

6.Приказ МЗ СССР от 04.10.1980 г. № 1030 «Об утверждении форм первичной медицинской документации учреждений правоохранения». Журнал контроля работы стерилизаторов воздушного, парового (автоклав). Форма 257/У.

7.Приказ МЗРФ №295 «Об утверждении положения об аккредитации клинико-диагностических лабораторий» от 21.12.93.

8.Стерилизаторы медицинские паровые. Правила эксплуатации

итребования безопасности

Контрольные вопросы

1. Перечислите основное лабораторное оборудование, нуждающееся в его поверке

2. Перечислите методы поверки шкафов биологической безопасности 2-го класса

570

3. Каковы правила взвешивания реагентов малой массы на электронных весах?

Модуль 9. Молекулярно-генетические методы для выявления микобактерий туберкулезного комплекса и НТМБ

Тема 9.3 Методология проведения ПЦР анализа

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 3

Вопросы для самостоятельной проработки

основные способы выделения ДНК из диагностического материала

этапы амплификации: денатурация ДНК, отжиг праймеров, элонгация цепи

основные методы детекции результатов ПЦР

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1.Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Изд. Мир, 1984 г. – 479 с.

2.Ребриков Д.В., Саматов Г.А., Трофимов Д.Ю. и соавт. ПЦР «в реальном времени». Под ред. Д.В. Ребрикова, – изд 2-е, испр. и доп. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний. – 2009. – 223 с.

Контрольные вопросы

1. Что такое ПЦР?

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

571

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ СЛУШАТЕЛЯ

2. Какой метод лучше всего применять для выделения ДНК из диагностического материала от больных туберкулезом и почему?

3. Какие виды ПЦР вы знаете?

4. Какой вид ПЦР предпочтительнее применять для выявления ДНК микобактерий из образов в противотуберкулезных лабораториях?

Тема 9.4. «Разнообразие тест-систем для детекции результатов ПЦР-анализа»

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 2

Вопросы для самостоятельной проработки

анализ результатов ПЦР с использованием электрофореза;

ПЦР в режиме реального времени;

особенности основных тест-систем для ПЦР-диагностики туберкулеза

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1. Ребриков Д.В., Саматов Г.А., Трофимов Д.Ю. и соавт. ПЦР «в реальном времени». Под ред. Д.В. Ребрикова, – изд 2-е, испр. и доп. – М.: БИНОМ. Лаборатория знаний. – 2009. – 223 с.

572

Контрольные вопросы

1. Какой из методов визуализации результата ПЦР является самым контаминирующим?

2.Какой из видов ПЦР может дать не только качественную, но

иколичественную оценку результатов?

3. Какой из видов ПЦР позволяет построить кривую плавления?

Модуль 10. Молекулярно-генетические методы для выявления микобактерий туберкулезного комплекса и НТМБ

Тема 10.2 «Методы, позволяющие дифференцировать виды микобактерий внутри туберкулезного комплекса»

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 3

Вопросы для самостоятельной проработки

классификация рода Mycobacterium. Микобактерии, входящие в состав туберкулезного комплекса.

традиционные методы дифференцировки микобактерий внутри туберкулезного комплекса

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

573

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ СЛУШАТЕЛЯ

молекулярно-генетические методы дифференцировки микобактерий внутри туберкулезного комплекса

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1.Литвинов В.И., Макарова М.В., Краснова М.А. Нетуберкулезные микобактерии. – М.: МНПЦБТ, 2008. – 256 с.

2.Национальное руководство ФТИЗИАТРИЯ. Под общей ред. М.И. Перельмана. – М.: ГЕОТАР-Медиа, 2010. – 506 с.

Контрольные вопросы

1. На чем основана идентификация штаммов M.tuberculosis от M.bovis методом сполиготипирования?

2. Назовите традиционные методы дифференциации M.tuberculosis/M.bovis

3. Перечислите виды микобактерий, относящиеся к туберкулезному комплексу:

Тема 10.3 «Молекулярные мишени, позволяющие проводить видовую дифференциацию НТМБ»

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 4

574

Вопросы для самостоятельной проработки

Классификация рода Mycobacterium. Нетуберкулезные микобактерии.

Основные мишени в геноме НТМБ, использующиеся для видовой идентификации

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1.Литвинов В.И., Макарова М.В., Краснова М.А. Нетуберкулезные микобактерии. – М.: МНПЦБТ, 2008. – 256 с.

2.Национальное руководство ФТИЗИАТРИЯ. Под общей ред. М.И. Перельмана. – М.: ГЕОТАР-Медиа, 2010. – 506 с.

Контрольные вопросы

1. Какие гены могут являться потенциальными мишенями для создания праймеров в ПЦР-тест-системах для идентификации НТМБ до вида?

2. Почему необходимы ПЦР тест-системы для выявления и идентификации разных видов НТМБ?

3. Назовите виды НТМБ, наиболее часто вызывающие микобактериоз у ВИЧ – инфицированных

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

575

РАБОЧАЯ ТЕТРАДЬ СЛУШАТЕЛЯ

Тема 10.4 «Методы, применяемые для видовой идентификации НТМБ»

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 4

Вопросы для самостоятельной проработки

традиционные микробиологические и биохимические методы идентификации нетуберкулезных микобактерий до вида.

молекулярно-генетические методы идентификации нетуберкулезных микобактерий до вида

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1.Литвинов В.И., Макарова Н.В., Краснова М.А. Нетуберкулезные микобактерии. – М.: МНПЦБТ. – 2008. – 256 с.

2.Оттен Т.Ф., Васильев А.В. Микобактериоз. – СПб: Медицинская пресса. – 2005. – 224 с.

3.Приказ МЗ РФ №109 от 21.03.2003. «О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации»

4.Lee A.S., Jelfs P., Sintchenko V., Gilbert G.L. Identification of nontuberculous mycobacteria: utility of the GenoType Mycobacterium CM/AS assay compared with HPLC and 16S rRNA gene sequencing. //J. Med. Microbiol. – 2009. – Vol. 58. – P. 900–904.

5.Richter E., Rьsch-Gerdes S., Hillemann D. Evaluation of the GenoType Mycobacterium Assay for Identification of Mycobacterial Species from Cultures // J. Clin. Microbiol. – 2006. – Vol. 44. – P. 1769–1775.

6.Shitikov E., Ilina E., Chernousova L., Borovskaya A., Rukin I., Afanas’ev M., Smirnova T., Vorobyeva A., Larionova E., Andreevskaya S., Kostrzewa M., Govorun V. Mass spectrometry based methods for the discrimination and typing of mycobacteria // J. Infection, Genetics and Evolution. – 2012. – Vol. 12. – P. 838–845.

7.Susceptibility testing of Mycobacteria, Nocardiae and other aerobic Actinomycetes; Approved Standards. – M 24–A. – Vol. 23. – №18.

Контрольные вопросы

1. Какие традиционные микробиологические методы идентификации НТМБ вы знаете?

576

2. В чем преимущества молекулярно-генетических методов идентификации микобактерий до вида перед микробиологическими и биохимическими? Перечислите.

3. Какой молекулярно-генетический метод является «золотым стандартом» в идентификации бактерий и каковы его ограничения использования в рутинной практике бактериологических лабораторий?

Модуль 11. Молекулярно-генетические основы резистентности микобактерий.

Тема 11.2 «Молекулярно-генетические методы определения ЛУ МБТ»

Количество часов, выделяемых на самоподготовку – 3

Вопросы для самостоятельной проработки

Мутации в геноме микобактерий туберкулеза, отвечающие за возникновение лекарственной устойчивости к противотуберкулезным препаратам.

Достоинства молекулярно-генетических методов определения лекарственной чувствительности по сравнению с традиционными микробиологическими

Рекомендуемая литература для самостоятельной проработки:

1.Антонова О.В., Грядунов С.А., Лапа С.А., Кузьмин А.В., Ларионова Е.Е., Смирнова Т.Г., Носова Е.Ю., Скотникова О.И., Черноусова Л.Н., Мороз А.М., Заседателев А.С., Михайлович В.М. Выявление мутаций в геноме M.tuberculosis приводящих к устой-

Раздел 1. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ ПОДГОТОВКА

577