78.Фитогормоны, классификация, характеристика. Индукторы митотического цикла.

Фитогормоны - низкомолекулярные органические вещества, вырабатываемые растениями и имеющие регуляторные функции. Используются в составе косметических препаратов, т.к. благодаря регуляторному действию позволяют эффективно воздействовать на состояние кожи, затормаживая старение, стимулируя рост и обновление клеток.

Бывают ситуации, когда растение в принципе здорово, но стрессовые факторы (пересадка/перевалка, транспортировка, ошибки в уходе) снижают его защитные силы и способность сопротивляться инфекциям.

Повысить жизнеспособность таких растений можно с помощью биостимуляторов - специальных препаратов, которые состоят из растительных экстрактов и содержат в различных пропорциях микроэлементы, аминокислоты, протеины (белки), кислоты жирного ряда, витамины, ферменты (энзимы) и вытяжки из компоста.

Здесь мы рассмотрим основные биостимуляторы, которые продаются в специализированных цветочных или садовых магазинах, а также некоторые теоретические материалы по этой теме.

Гормоны растений и классы фитогормонов

Эпин — регулятор роста растений Отечественный вариант японского природного биорегулятора и стимулятора эпибрассинолида JRDC-694, который содержится в клетках всех растений. Безопасное для человека и животных (КO – 4) и экологически безвредное средство, призванное помочь растениям, попавшим в сложные условия существования.

Циркон Биологический иммуностимулятор, корнеобразователь, индуктор цветения.

Гетероауксин (индолил-уксусная кислота) Препарат для стимулирования корнеобразования у черенков, рассады, луковиц цветов.

Силк Стимулятор роста и индуктор иммунитета растений.

Обязательными компонентами питательных сред должны быть фи-тогормоны. К ним относятся ауксины, регулирующие рост и дифферен-цировку клеток и цитокинины, индуцирующие клеточное деление. Природный ауксин в растении представлен в основном в виде |3-индолил-3-уксусной кислоты (ИУК). Для практических целей чаще применяют не ИУК, а синтетические ауксины (а-нафтил-1-уксусная кислота (НУК), 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота (2,4-Д), фенилук-сусная кислота (ФУК), фенилмасляная кислота (ФМК) и др.) В отличие от природных ауксинов эти соединения не разрушаются ИУК-оксида-зой в клетках растений.

В качестве источников цитокининов в средах используют кинетин, зеатин, 6-бензиламинопурин и др. Действие цитокининов проявляется прежде всего в ускорении клеточных делений, что опосредуется усилением синтеза ДНК, РНК, белков, а также в дифференцировке клеток. В состав некоторых сред входит ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) или ее натриевая соль, которые улучшают усвоение клетками железа.

79.Иммуносупрессоры. Циклоспорин а-ингибитор иммунного ответа кальций нейрина. Применение втрансплантологии. Новые иммуносупрессоры природного присхождения.

Среди иммунодепрессоров известны синтетические вещества (азатиоприн, меркаптопурин, преднизон, циклофосфамид и пр.), отдельные антибиотики (блеомицин, циклоспорин А,), а также зообиотехнологические продукты — антилимфоцитарный иммуноглобулин, aHTn-Rh0(D)Ig человека и лимфоцитарные кейлоны. Антилимфоцитарный IG получают из сыворотки крови животных по схеме, близкой к выделению IgG. При этом иммунизирующим агентом (антигеном) являются чело-веческие лейкоциты.

При выделении суммарных иммуноглобулинов можно использовать два подхода. Одии из них базируется на высаливании Ід-ов иасыіценным раствором аммония сульфата (3,9 М при 0°С или 4,06 М при 20вС) с последуіощей хроматографией раствореішого осадка антилимфоцитарного Ід в подходяіцем буфере (например, фосфат-ном — 0,01 М с рН 6,5). Хроматографию проводят на ионообмен-никах — ДЭАЭ-сефадексе или ДЭАЭ-целлюлозе.

Поскольку антилимфоцитарный Ід содержит разные Ig-ы со сходными характеристиками, то их можно разделить, измёняя ионную силу элюента.

В производственных условиях получают в среднем 5,5—6,0 г lgG из I л иммунной сыворотки в пересчете на сухое вещество. Более высокого выхода Ід удается достигнуть согласно другому методу — с помощью 2-этокси-6,9-диаминоакридинлактата, или риваиола (Дж. Хорейси, 1952). Выход IgG при этом составляет в среднем 60—65%.

Реакция взаимодействия риванола(катион) с белками протекает при незначительиом сдвиге рН от изоэлектрической точки, то есть при малом отрицательном заряде белковой молекулы, а образую-щийся риванольно-белковый комнлекс слабо растворим в воде — он растворим при рН 5,0.

В слабо щелочной среде риванол не обраэует комплексов с IgG, иа чем и основана очистка IgG:

IgG можно выделять прямо из иммунной сыворотки, добавляя к ней 0,75% раствор риванола в соотношении примерно 1:2.

80.Выделение, концентрирование и очистка биотехнологических продуктов. Сорбционная, ионообменная, аффинная хроматография применительно к выделению ферментов. Методы мембранного разделения.

На стадии выделения продукта главная задача — отделить основную часть продукта, пусть даже и с некоторыми примесями. Получается как бы неочищенный продукт. Поэтому, когда необходимо получать биопродукты высокой кондиции, добавляют еще стадию очистки продукта. Задача этой стадии — убрать примеси и сделать продукт максимально чистым.

Эта задача решается с помощью разнообразных процессов, в которых многие из тех, что уже были рассмотрены ранее (экстракция и экстрагирование, адсорбция, ионный обмен, ультрафильтрация и обратный осмос, ректификация и ферментолнз). Кроме этих процессов используют и следующие.

Хроматография — процесс, напоминающий адсорбцию. На твердом сорбенте собираются растворенные вещества, но не одно, а несколько, часто близких по структуре. Например, смеси белков, нуклеотидов, сахаров, антибиотиков. При адсорбции они и абсорбируются вместе. А вот при хроматографии они выходят из сорбента как бы по очереди, что и позволяет их разделять и, значит, очищать друг от друга.

Диализ — процесс, в котором через полупроницаемую перегородку могут проходить низкомолекулярные вещества, а высокомолекулярные остаются. Путем диализа осуществляют очистку вакцин и ферментов от солей и низкомолекулярных растворимых примесей.

163