Рецепты питательных сред Рецепт 1 Кровяной агар цитратный

От здоровой коровы из яремной вены берут 250мл крови в стерильную колбу с 50мл стерильно приготовленного 5% раствора лимоннокислого натрия. По мере взятия кровь в колбе смешивают с лимоннокислым натрием. Полученную цитратную кровь проверяют на стерильность путем посева на МПБ и только после этого используют для приготовления кровяного агара, цитратную кровь можно сохранять в течение 10-15дней в холодильнике. МПА расплавляют в кол­бе, затем охлаждают до 45°С и стерильной пипеткой вносят в него10-15%цитратной крови, равномерно смешивая, после чего разливают в чашки Петри по 15мл. Застывший агар помещают в термостат при температуре 37°С на 24ч для проверки на стерильность.

Для приготовления кровяного агара можно использовать дефиб-ринированную кровь барана.

Рецепт 2

ДНК-новокаиновый агар

К 150мл расплавленного стерильного З% МПА (рН 8,6)добавляют150 мг ДНК-натриевой соли, предварительно растворенной в 10мл (подщелоченной 2каплями 10% едкого натра) дистиллированной воды, 1 и 3мл 2%раствора новокаина. После перемешивания среду прогрева­ют в течение 30мин в кипящей водяной бане. К остывшей до 45-50°С среде добавляют 7-8мл 5% сыворотки крови крупного рогатого скота и 1,2мл 10% стерильного раствора хлористого кальция, перемешивают и разливают в чашки Петри.

Рецепт 3

ДНК-агар

К 150мл расплавленного 2%МПА (рН 8,6)добавляют 150мг ДНК-натриевой соли, растворенной в 10мл дистиллированной воды (подщелоченной 2каплями 10%едкого натра). Среду прогревают 30 мин в кипящей водяной бане, затем охлаждают до 50-60°С и добавля­ют 1,2мл 10% стерильного раствора хлористого кальция и 13-14мл(8-9%)сыворотки крови крупного рогатого скота или 8мл (5%) дрожжевого экстракта.

Рецепт 4 Среда Гисса с манитом

Приготовление индикатора Андраде:

0,5г кислого фуксина растворяют в 100мл стерильной дистиллированной воды, добавляют 16,4мл 1н едкого натра, стерилизуют при 100°С 5мин, хранят в темном месте с притертой пробкой.

К полужидкой пептонной среде (I%пептона, 0,5%хлорида нат­рия, 0,15%.агар-агар) с рН 7,4после ее расплавления добавляют 0,5% манита и I%индикатора Андраде, перемешивают, разливают в пробирки по 10 мл.Стерилизуют при 0,5атм. 30 мин,после чего наслаивают стерильное вазелиновое масло высотой 1см.

Рецепт 5

Среда Карташовой

К 500мл готового стерильного МПБ добавляют 2,5г лактозы, 1 мл спиртово-водного раствора 1:100бромкрезолпурина (после растворения 1г порошка в 50мл спирта добавляют 50мл дистиллирован­ной воды).

Колбу со средой ставят, в холодную водяную баню, доводят да кипения и кипятят 5-7мин. Охлаждают среду до 50-55°С и добавляют,50мл сыворотки крови и 50Ед/мл неомицина. Среду разливают в стерильные пробирки по 5мл.

Рецепт 6

Глюкозный МПБ

В 100мл МПБ добавляют 1г глюкозы, среду стерилизуют при0,5атм. В течение 30мин. Доводят рН среды до 7,2-7,4.

Рецепт 7

Мпб с желчью

К 90мл стерильного МПБ (рН 7,4)добавляют асептический 10 мл стерильной бычьей желчи, перемешивают, разливают в пробирки и стерилизуют при 0,5атм. 20мин.

Рецепт 8

Молоко с метиленовым голубым

0,2г метиленового голубого растворяют в 20мл горячей дис­тиллированной воды, пропускают через бумажный фильтр и стерилизуют при 0,5атм. 20мин. К стерильному обезжиренному молоку добавляютI%приготовленного раствора метиленового голубого.

Рецепт 9

Среда КОДА

Среда выпускается промышленным способом в виде порошка (Да­гестанский НИИ питательных сред) и готовится в соответствии с инструкцией.

Рецепт 10