Количественный анализ лекарственных веществ

Спектрофотометрия в УФ-области широко используется для количественного определения лекарственных средств и включена во все фармакопеи.

При прохождении излучения через раствор светопоглощающего вещества поток излучения ослабляется тем сильнее, чем больше энергии поглощают частицы данного вещества. Понижение интенсивности зависит от концентрации поглощающего вещества и длины пути, проходимого потоком. Эта зависимость выражается основного законом светопоглощения - законом Бугера-Ламберта-Бера.

Основным условием для количественного анализа является соблюдение закона Бугера-Ламберта-Бера.

Согласно этому закону, светопоглощение (оптическая плотность А) прямо пропорционально коэффициенту светопоглощения (k), концентрации вещества в растворе (С) и толщине поглощающего слоя (l).

Он имеет математическое выражение:

А = k · С · l

Графическое выражение – кривая зависимости оптической плотности от концентрации имеет прямолинейный характер и должна проходить через начало координат (градуировочный график). Пропорциональное выражение – оптические плотности стандартного и анализируемого образцов прямо пропорциональны их концентрациям.

На этих выражениях закона основаны три способа расчета концентрации анализируемого вещества (С_х):

1. Обычно определение концентрации спектрофотометрическим методом проводят с использованием стандартного образца.

Расчет концентрации основан на использовании уравнения:

где: С и С₀ - концентрации испытуемого раствора и раствора стандартного образца соответственно;

А и А₀- оптические плотности испытуемою раствора и раствора стандартного образца соответственно.

Вначале измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца, приготовленного, как указано в частной фармакопейной статье, затем проводят измерение оптической плотности испытуемого раствора. Второе измерение проводят сразу после первого, с использованием той же кюветы, в тех же экспериментальных условиях.

Кроме того, указанные формулы дополняются аналитическими данными (навеска (а), разведение (W), аликвота (V_a), общая масса лекарственного препарата (P) или 100 (расчет, %).

Метод с использованием стандартного образца является более точным и надежным.

2) по удельному показателю поглощения:

Возможность применения значения удельного показателя поглощения в каждом конкретном случае следует обосновывать. В случае отсутствия СО, расчет концентрации проводят по удельному показателю поглощения ( ), значение которого приводится в НД. Этот способ расчета используется в ФС для ретинола ацетата, таблеток левомицетина и др. Недостатком этого метода является возможность инструментальной ошибки, связанной с работой на разных приборах. Обычно метод с использованием значения удельного показателя поглощения применим при допусках содержания анализируемого вещества не менее ±10 % от номинального содержания.

Расчет по градуировочному графику является очень громоздким (требуется приготовление серии стандартных растворов), поэтому используется редко. Наиболее распространенным является расчет по отношению оптических плотностей анализируемого и стандартного образцов.

В дифференциальной спектрофотометрии также используются три способа расчета анализируемой концентрации: