Определение креатинина в моче

Клинико-диагностическое значение метода: выведение креатина и креатинина с мочой указывает на состояние мышечной системы организма. Креатинин непрерывно образуется в мышцах из креатинфосфата. Обратный процесс невозможен, поэтому креатинин, попадающий в кровоток, активно секретируется в мочу и быстро выводится. Количество выводимого креатинина является постоянным у каждого человека вне зависимости от объема мочи и количества поступающего с пищей азота. Это позволяет использовать креатинин как точку отсчета для сопоставления с другими веществами, выводимыми с мочой.

Количество креатинина в моче зависит от мышечной массы тела (10-25 мг/1кг массы) и в норме за сутки выделяется 4,4-17,6 ммоль/сут, или 53,0-106,1 мкмоль/л. Гиперкреатининурия наблюдается при синдроме длительного сдавливания, после снятия кровоостанавливающего жгута, лихорадочных состояниях, пневмонии, после тяжелой мышечной работы. Гипокреатининурия отмечается при хроническом нефрите, мышечной атрофии, дегенерации почек, лейкемии, в старческом возрасте. Креатин в моче взрослого человека отсутствует, так как используется повторно для синтеза креатинфосфата и полностью реабсорбируется в почечных канальцах. Однако у детей, беременных женщин и в послеродовом периоде, а также у подростков моча почти всегда содержит креатин. Креатинурия у взрослых указывает либо на поражение мышечной ткани, либо на уменьшение ее массы (голодание, мышечные дистрофии и т.д.).

Реактивы:

1. ТХУ, 1,22 моль/л (депроитеинизирующий раствор);

2. Пикриновая кислота, 0,04 моль/л;

3. NaOH, 0,75 моль/л;

4. Эталон креатинина - раствор 177 мкМ/л.

Принцип метода. Креатинин при взаимодействии с пикриновой кислотой в щелочной среде образует окрашенные соединения, интенсивность окраски которых измеряют фотометрически при длине волны 500-510 нм.

Ход работы

Мочу перед исследованием развести в соотношении 1100 дистиллированной водой.

1. В три стеклянные пробирки отмерить компоненты, перечисленные в таблице, и их содержимое перемешать.

Отмерить (мл)	Проба	Эталон	Контроль
1. Разведенная моча	0,50	-	-
2. Калибровочный раствор (эталон креатинина	-	0,25	-
3. Вода дистиллированная	0,25	0,50	0,75
4. Депротоинирующий раствор	0,25	0,25	0,25
5. Пикриновая кислота	0,50	0,50	0,50
6. Раствор гидроксида натрия	0,50	0,50	0,50

2. Через 20 мин измерить оптическую плотность пробы (А₁) и эталона (А₂) против контрольного раствора.

3. Расчет произвести по формуле:

Креатинин (мкмоль/л)=177А₁/А₂

Учитывая разведение мочи, результат умножить на 50.

2. Ресинтез АТФ за счет АДФ (миокиназная реакция). Происходит путем взаимодействия 2-х молекул АДФ, одна из которых передает свою концевую фосфатную группу другой молекуле, превращаясь в молекулу АМФ.

2 АДФ ^{миокиназа} АТФ + АМФ

АМФ может дезаминироваться и потерять способность ресинтезироваться, что не желательно. При мышечной деятельности эта реакция идет только в случае значительного утомления, когда ресинтез АТФ за счет других механизмов затруднен. Это последний, аварийный путь ресинтеза, происходящий в анаэробных условиях.