Вопрос 4 Строение хромасом. Кариотип. Идиограмма. Уровни упаковки хромасом эукариот.

ХРОМАСОМА - это молекула ДНК в комплексе с белком, образующим ее упаковку.

Кариотип – совокупность пизнаков полного набора хромасом, пресущая клеткам данного биологического вида.

ИДИОГРАММА – схематичное изображение гаплоидного набора хромасом организма, которые распологаются в ряду в соответсятвии с их размерами.

Каждая хромасома состоит из 2 храматид. Хроматиды соедениниы в области центромеры. концевые участки хромасом называются теломерами- они препятсятвуют слипанию хромасом. участки между теломерой и центромерой называются плече.

В зависимости от расположения центромеры различают следующие типы хромасом:

• Метацентрические – центромера расположена по середине, плечи примерно равны. (q/p=1- 1,3)

• СУБМЕТАЦЕНТРИЧЕСКИЕ – центромера смещена от середины, плечи разной длинны. (q/p=1,3-3,0)

• АКРОМЕТАЦЕНТРИЧЕСКИЕ – центромера очень смещена от середины. (q/p >3,0)

(где p- длинное плече.

q- короткое плече.)

Уровни упаковки хромасом эукариот:

• ПЕРВИЧНАЯ СТРУКТУРА - последовательность НУКЛЕОТИДОВ в цепи ДНК .Полимерная цепь образуется за счет 3’-5’-фосфодиэфирной связи между 3’-гидроксилом одного нуклеотида и 5’-гидроксилом другого.

• ВТОРИЧНАЯ СТРУКТУРА ДНК – свёрнутые в спираль ДВЕ комплементарно взаимодействующие и антипараллельные полинуклеотидные цепи. Вторичная структура образуется при проявлении эффектов КОМПЛЕМЕНТАРНОСТИ.

• ТРЕТИЧНАЯ СТРУКТУРА ДНК многократная спирализация ДНК сопровождается образованием комплексов с белками . спирализованная двунитевая ДНК оборачивает гистоны Н2а+Н2b+H3+H4 двумя витками происходит сокрашение длинны в 7 раз. тдельно –дополнительный гистон Н1. Всё вместе - ХРОМАТОСОМ

• ВИНТООБРАЗНАЯ СТРУКТУРА и как результат компактный хроматин.

2 типа хроматина :

• ЭУХРОМАТИН – упакован менее плотно, генетически активен.

2 ) ГЕТЕРОХРОМАТИН упакован более плотно, генетически не активен в связи с высокой спирализацией .

Вопрос 5 приготовление хромасомных препоратов. Использование Колхицина. Гипотония, фиксация и окрашивание. Дифференциальное окрашивание хромосом.

Приготовление хромасомных препаратов:

• для определения человеческого кариотипа используется одноядерные лейкоциты.

• плазму отстаивают. помещают в питательную среду

• при добавлении колхицина происходит остановка деления клетки на стадии метафазы( колхицин разрушает или блокирует веретено деления)

• получившиеся клетки фексируют либо гипотоническим шоком( происходит набухание) или жидкостью Корнуа( смесь ледяной уксусной кислоты и спирта)

• окрашивают и фотографируют под микроскопом.

ОКРАШИВАНИЕ:

окрашивание происходит не равномерно, появляется полосатая структура в виде поперечных меток.

• Q-окрашивание – исследуют под флюорисцентным микроскопом.

• G-окрашивание – по РОМАНОВСКОМУ-ГИМЗЕ ( окрашивание с полосочками) как основной генетический метод

• R-окрашивание – окрашивание красителями при увеличении температуры, окрашиваются участки не способные к окраске по РОМАНОВСКОМУ-ГИМЗЕ.

• Т- окрашивание – анализ теломерных районов хромасом.

• итд.

проводят анализ с выявлением внутрихромасомных перестроек и т д. Важно для медицины позволяет диагностировать хромасомные болезни.