Устройство микроскопа (основные узлы)

Электронный микроскоп состоит из 4 самостоятельных узлов:

1. Собственно оптическая система- колонна.

2. Источник высокого напряжения (ВН) – питающее устройство, создающее напряжение до 60000 вольт.

3. Стабилизатор постоянного потока, питающие линзы.

4. Формвакуумный (ротационный) насос.

Колонна микроскопа состоит из деталей:

а) электронная пушка – катод – источник света – потока электронов.

б) камеры объектов

в) объектив

г) стигматор для компенсации астигматизма объектива.

д) проектив, который увеличивает часть изображения, созданного объективом.

е) проекционный тубус с экраном, под которым вставляется приспособление для фотографирования.

ж) на задней части камеры – магнитно-разрядный вакуоометр Пининга.

Приготовление объекта и требования, предъявляемые к нему в связи с электронной микроскопией.

Препараты биологических объектов, предназначены для изучения в электронном микроскопе, должны отвечать требованиям:

1 – должны быть сухими, так как пары воды могут привести к порче объекта;

2 – толщина объекта вместе с подложкой должна быть не больше 0,25 мкм, ибо при большой толщине будет значительная потеря электронов, проходящих через объект, что может привести к снижению разрешающей способности микроскопа;

3 – препараты не должны быть сухими;

4 – препараты должны быть контрастными;

Общая схема препарирования состоит из операций:

а) приготовление подложек;

б) приготовление взвесей, очистка, концентрация объектов и нанесение их на подложку;

в) высушивание объектов;

г) контрастирование объектов.

Приготовление подложек

Подложки должны быть достаточно тонкими, чтобы они хорошо просвечивались электронным пучком. Их толщина и плотность должны способствовать рассмотрению деталей и объектов, прочными, чтобы не разрушиться под взаимодействием пучка электронов.

Подложки из коллодия. Готовят 0,5 – 1,5 % раствор коллодия в амилоцетате. Одну каплю этого раствора наносят в чашку Петри с дистиллированной водой. Капли быстро разбегаются по поверхности воды, образуя очень тонкую пленку. На эту пленку наносим металлические сеточки диаметром до 3 миллиметров. Затем с помощью специального крючка вылавливаем сеточки вместе с пленкой, помещаем их на специальный столик. Даем возможность пленке подсохнуть. На сеточки наносим слегка опалесцирующую эмульсию исследуемого объекта в дистиллированной воде или в физиологическом растворе. Препарат вновь подсушиваем, контрастируем и микроскопируем.

Контрастирование объекта – производят в напылителях, в которых под большим вакуумом распыляют некоторые металлы, дающие бесструктурные пленки.

Приготовленный препарат вставляют в объектодержатель, в микроскоп и микроскопируют.

С помощью электронных микроскопов можно:

1 – дифференцировать вирусы по морфологическим признакам;

2 – производить иммуноэлектронную микроскопию – выявлять результаты взаимодействия специфических корпускулярных или внутриклеточных антигенов.

Применение электронной микроскопии в диагностике вирусных заболеваний содержится ограниченной доступностью.В высокоразрешающих электронных микроскопов для лаборатории и сложностью их технического обслуживания.