Самостоятельная работа студентов:

1. Студенты изучают устройство электронного мкроскопа.

2. Студенты анализируют структуру объктов по фотографиям, сделанным на электронном микроскопе.

3. Студенты знакомятся с приготовлением препаратов на подложках.

Контрольные вопросы:

1. Каково строение электронного микроскопа?

2. Каков принцип работы электронного микроскопа?

3. Как готовятся препараты для просмотра их в электронном микроскопе?

Занятие 6 Культивирование вирусов в организме лабораторных животных. Культивирование вирусов в эмбрионах кур. Схема эмбрионов кур. Освоение методов заражения эмбрионов кур.

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ: Ознакомить студентов с лабораторными

животными и особенностями культивирования вирусов в организме лабораторных животных, с особенностями культивирование вирусов в эмбрионах кур, схемой эмбрионов кур и методами заражения эмбрионов кур.

МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ:

- Белые мыши;

- морские свинки;

- кроли­ки;

- клетки для животных;

- бокс;

- халаты, перчатки, маски, головные уборы и бахилы;

- стерильный физиологический раствор NaCl;

- стерильные пипетки;

- иодированный спирт с квачиком;

- вата;

- эксикатор;

- эфир;

- подготовленный для работы бокс;

- 7-9 суточные куриные эмбрионы;

- набор стерильных хирургических инструментов - пинцет, ножницы, скальпель в стаканчике со спиртом;

- одноразовые шприцы на 1 мл;

- пипетки с парафином;

- вируссодержащий материал в пробирке;

- спиртовки;

- иодированный спирт для дезинфекции скорлупы;

- ватный квачик в пустой пробирке для обжигания скорлупы.

В связи с тем, что вирусы могут размножаться только в живых клетках, на самых ранних этапах развития вирусологии широко применяли культивирование вирусов в организме лаборатор­ных животных, специально выращиваемых для проведения на них исследований.

В вирусологии для постановки биопробы используют сле­дующие виды лабораторных животных: белые мыши, белые крысы, морские свинки, хомячки, кролики, кошки, собаки, птицы, обезьяны и др.

Лабораторные животные должны отвечать определенным требованиям:

1. Быть абсолютно здоровы, т. е. свободными от инфекции и инвазии.

2. Обладать стандартной чувствительно­стью (восприимчивостью) к определенным вирусам; лучше использовать животных одной линии.

3. Должны быть одинакового возраста (желательно молодые) и пола, породности, упитан­ности и массы тела.

Плохая упитанность животных, взъерошенный волосяной покров, катаральные явления (насморк, затрудненное дыха­ние), отказ от корма, понос и другие признаки дают основа­ние предполагать о заболевании животного.

В виварии лабораторных животных содержат в изолиро­ванных помещениях: 1) для чистых, т. е. здоровых; 2) для зараженных, т. е. больных. Кормление лабораторных живот­ных должно быть строго по соответствующему рациону, со­держание - соответствовать зоогигиеническим нормам.

Лабораторных животных используют для:

1. обнаружения вируса в патматериале;

2. первичного выделения вируса из патматериала;

3. накопления вирусной массы;

4. поддержания вируса в лаборатории в активном состоянии;

титрования вируса;

5. получения гипериммунных сывороток;

6. в качестве тест-объекта в реакции нейтрализации.

Перед заражением всех животных маркируют различны­ми методами: 1) кроликам выстригают шерсть на спине и боку, на ушах делают насечки и дырочки, закрепляют бирки; 2) морских свинок различают по пятнам и окраске, выстрига­ют шерсть на спине; 3) птицам навешивают бирки на крылья, надевают кольца с номером на ноги; 4) мышам и крысам на кожный покров наносят краску на места, соответствующие порядковому номеру, ампутируют пальцы (мышатам).

Перед заражением животное фиксируют, при необходимости выстригают шерсть, обрабатывают спиртом место инъекции. Суспензией инфицированного материала заражают лабораторных жи­вотных и учитывают реакцию на заражение. В вирусологичес­кой лабораторной практике для диагностики бешенства ставят биопробу на мышатах, инфекционный бронхит кур диагности­руют на цыплятах и т. д.