- •Львівський національний медичний університет
- •Загальні правила техніки безпеки при роботі студентів у навчальній хімічній лабораторії
- •Модуль 2. Загальні закономірності метаболізму Тематичний план практичних занять з модуля 2
- •Тематичний план лекцій з модуля 2
- •Завдання для самостійної роботи студентів (срс)
- •Вимоги до виконання та перевірки самостійної роботи студентів (срс)
- •Методика проведення та критерії оцінювання підсумкового модульного контролю
- •Модуль 2. Загальні закономірності метаболізму.
- •Теоретичні питання
- •Наукові напрями роботи кафедри біохімії
- •Характеристика фізико-хімічних методів дослідження
- •Загальні принципи клініко-біохімічної оцінки результатів досліджень
- •Помилки, що трапляються під час проведення лабораторних досліджень
- •Практична робота Визначення оптичної густини забарвлених розчинів у залежності від їх концентрації.
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Дослід 2. Дослідження термолабільності амілази слини.
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •1/16 Мл сечі розщеплює 2 мл 0,1 %-го розчину крохмалю;
- •1Мл сечі розщеплює - х мл 0,1 %-го розчину крохмалю,
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •А. Амілази, ліпази, фосфатази
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •А. Ацетил-КоА
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •1. Дослідження дії якого з перерахованих ферментів базується на знебарвленні бензидину при його окисненні?
- •3. За яких умов відбувається забарвлення пірокатехіну при окисненні його молекулярним киснем в присутності фенолоксидази:
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів.
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота Дослід 1. Вивчення окисного фосфорилування в мітохондріях та дії роз’єднувача – 2,4-динітрофенолу на цей процес.
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •2. Універсальність хеміоосмотичної теорії для живих систем. Література
- •Теоретичні питання
- •Приклади тестового контролю знань.
- •А. Аконітатгідратази
- •Приклади тестів та ситуаційних задач по засвоєнню практичних навичок
- •Література Основна:
- •Модуль 3. Метаболізм Вуглеводів, ліпідів, амінокислот та його регуляція
- •Тематичний план лекцій з модуля 3
- •Завдання для самостійної роботи студентів (срс)
- •Критерії оцінювання поточної навчальної діяльності студента
- •Методика проведення та критерії оцінювання підсумкового модульного контролю
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок -1”
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів “Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Принцип методу. В результаті реакції креатиніну і пікринової кислоти в лужному середовищі утворюється кольорова сполука, інтенсивність забарвлення якої прямопропорційна концентрації креатиніну.
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Тема № 9. Дослідження процесів детоксикації аміаку та біосинтезу сечовини.
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Індивідуальна самостійна робота студентів
- •Література Основна:
- •Теоретичні питання
- •Практична робота
- •Контроль виконання лабораторної роботи
- •Приклади тестів „Крок-1”
- •Самостійна індивідуальна робота студентів
- •Література
- •Теоретичні питання
- •Приклади тестового контролю знань „Крок 1”
- •Приклади тестів та ситуаційних задач по засвоєнню практичних навичок
- •Література
Принцип методу. В результаті реакції креатиніну і пікринової кислоти в лужному середовищі утворюється кольорова сполука, інтенсивність забарвлення якої прямопропорційна концентрації креатиніну.
Матеріальне забезпечення: Насичений розчин пікринової кислоти (2 г пікринової кислоти розчиняють в 100 мл гарячої (70-80оС) дистильованої води) залишають на добу при кімнатній температурі, фільтрують, зберігають у темному посуді; основний стандартний розчин креатиніну (8,8 мМ 100 мг креатиніну розчиняють в 100 мл 0,1 н розчину хлоридної кислоти) зберігають у холодильнику з притертим корком; 10% розчин їдкого натрію; 0,1 н розчин хлоридної кислоти; центрифуга, водяна лазня, фотоелектроколориметр або спектрофотометр.
Хід роботи:
1. Контрольна проба: до 3 мл насиченого розчину пікринової кислоти додають 0,2 мл розчину 10 % NаОН і доводять водою до 10 мл.
2. Дослідна і стандартна проби: беруть 2 пробірки. У першу (дослід) додають 2 мл сироватки, у другу (стандарт) - 2 мл робочого стандартного розчину. До обох пробірок додають по 6 мл прозорого насиченого розчину пікринової кислоти, перемішують. Через 5 хв пробірки поміщають на 15-20 с в кип’ячу водяну баню, охолоджують. Вміст дослідної пробірки центрифугують (або фільтрують). В окремі пробірки відбирають по 4 мл.
До 4 мл стандартної проби та дослідного супернатанту додають по 0,2 мл розчину NаОН, перемішують і доводять водою до 10 мл. Через 10 хв проби колориметрують при зеленому світлофільтрі (довжина хвилі 530 нм) у кюветі з товщиною шару 20 мм проти контрольної проби.
Розраховують концентрацію креатиніну (Х) за формулою :
|
Х = |
Адосл. Аст. |
∙ 0,088 ммоль/л |
|
Х = |
Адосл. Аст. |
∙ 88 (мкмоль/л) |
або
де: Адосл. – екстинкція дослідної проби;
Аст. – екстинкція стандартної проби;
0,088 ммоль/л (88 мкмоль/л) – концентрація креатиніну в стандартній пробі.
Зробити висновки.
Клініко-діагностичне значення. Креатинін – кінцевий продукт обміну креатину. Концентрація креатиніну в крові є досить постійною величиною, що відображає м’язову масу і не залежить від харчування та інших факторів. Креатинін не реабсорбується в ниркових канальцях, тому з діагностичною метою використовується його визначення в крові та сечі для оцінки швидкості клубочкової фільтрації нирок.
У нормі вміст креатиніну у жінок – 0,044-0,097 ммоль/л або 44-97 мкмоль/л; у чоловіків – 0,044-0,115 ммоль/л або 44-115 мкмоль/л. Підвищені показники можуть бути на фоні приймання нефротоксичних препаратів, при лейкемії, гемолізі, кетоацидозі, занижені – при жовтяниці.
Підвищена концентрація креатиніну в крові спостерігається при гострих і хронічних захворюваннях нирок, активній акромегалії, гігантизмі, гіпертиреозі. Зниження даного показника може спостерігатись протягом І і ІІ триместрів вагітності, а також при зменшенні м’язової маси (обумовленому віком або м’язовою дистрофією).