Филиппович Ю.Б. - Основы Биохимии

tлн-асн
/4	S \6	7	8	9
И:Jt 3	uие-про-лей-rли (NH2)
, 2	I /
тир-Цие
окситоuин
		rлн-8СН
		/4		5\6	7	8	9
		фен 3		цис-про-арr-rли (NH2)
		'2		1/
		тир-Цие
		Вазопресеин
	диокси­					..",вал........
ала-три'		лей
					про		арн
		\
•		ма		D-Фен			лей
оКеи----цис		I
					I		"	•
про	'D-тpe				t
					лей		D-фен
	Фаллоидин				\		i
					арн		про
						"-вал"
					Грамицидин S
I	2	3		1	2	3	4	S
Пиparлу-rие-рРО (NH2)				Тир-rли-rли-фен-мет
	Тиролиберин				Мет-энкефалин

фен

8Сн1 6 ")-фен

		I	\
		ЛИ) 4	81'рИ
1	2	I	,
Аnа-rли-цис 3			9 J1И3
		\	I
		цне 12 11	10 1JIC

'-...сер-"""

фен.........	вал	........про
I		\.
фен		про
~		t
про		ала
,		I
npo		фен

'Фен/

Соматос:та1ИН Антамаюш

Пироrпу-nиpor.nyтaминоВ8Jl

кислота,

Cf"l-СНz

о=а/; ~H-COOH

,/

N"

Рис. 22. Биолоrичссхи акТИ1IJlЫС псптиды

Расшифровку сокpawеRИII СМ.-. fa~. 4. Цифры ОКОЛО 118З88IIRII амиНОМСЛОfllhV( оСТатков оllозиа.вют l1li местоПОложение

вмолекуле, СЧRТU от N-конца J( С-концу пептида. СтрелI:И начиваЮ1!;А ОТ ВМRНОJ:RСЛОТ. участвующих в oIIpaзoвавии пептндной свJr.lи СООН-группами. Соседине остапи цистениа в ЦИJ:ЛaX связаны дисульфиднымII мостиками. tpyпna NИz. :Ja![JIюченная

вCIобхи, обозначает амидную группу. Подразумевается, что аминокислотные остатки соединенw пenтидвымlluэямR.. ОксumnЦИll

н ВОЗonpt'Ccuн-гормоны Э8дIIей доли mпофиза. ПостynaJI в кровь, первый НЗ ннх стимулирует сокращение мышечных волоко". расположенных вокруг альвеол моло'ПIЫX .еле1 н мышц матки, второй-дсiicтвyeт главRыM образом на гладкие МЫШ!lЫ

кровеносных сосудов н участвует в реГУЛJЩИн водного баланса организма иа уровне почек. ф.....оuдuн-ядоВитое начало

мухомора, вызывающее в ничтоJl<llЬ!Х концентрациях mбель организма вследствие ВЫХОди ферментов н К+ нз клеток; СВIIЗЬ между

остапами цистеива н триптофана в молекуле фаллоидина обраэоаана за счет взаимодсЙСТ8И11 сульфrв.цpИJlloноlI группы и l!Ир'

РоJll,иоrо кольца их радикал08. l]>а.мlUjUд",,-антибиотИIt, деllствующиll на многне грамПОлО]J[JIТeJI..... liаКтерИII (пневмокок"и,

стрептокопи, стафилококки и др.), нзменяет прониnaeмасть биолоmчеCJ:IIХ мембран для RИзкомолехулllpllЫX соединений и ВЫЗЫ­

вает mбель клеток. 1UролuбеplШ-rормон, синтезирующиilс. в гипоталамусе и обеспечиваЮIIUIЙ 8ысво6oot(дcние (отсюда его

друтое В8З8&lIие-рилизииг-<!Jактор), а ВОЭМО]J[llО, • усиление биосинтеза в гипофизе дpyгoro гормона-тиротропина, который.

вСВОЮ очередь, контролирует деательность 1ЦRТ0видиоll железы в образование в ней гормона-тирокснва; УКвэaннaJI иерархии

•pery~ бвOCIПiТeэа гормоиов lIВЛается IIPI<ИМ примером учаcтu пептвдов в peryлllUltИ обмена мществ. Мtlт-эикeфamш­

пентапетвд, возИИltаюllDdl в нервной лани н ....ОНIIЮIIDdI (оспаБЛIIЮIIUIЙ) БОЛCllwе ошущениа. Он связываетса с рецецторами, ка

котОрые 80здеllcтtуют наРltOтиm, наnpимер морфии, и представляет собой ЭlIдоrеввое вещество психотроnноrо Jteiicтви•.

Co..tUmIoc_-пеlТТJJд, тормозlIIШIII ОCllоБD>I(ДCяие из передиеll доли mпофиэа синтезируемого там ropмон& роста-сомато,

трапного гормона. Анmaманuд-цикличecJtИij декапептид, образующий с Na+. СаН и некоторыми другими катионами комплексы,

которые JlВляются npообразами структур, ответственны" за переиас ионов через биологические мембранм

50

I

О том, что белковые молекулы построены именно тажим образом, свиде­

тельствуют следующие факты:

1. В пативных белках удается обнаружить очень небольшое число свобод­

ных NH2_ и СООН-групп, так как концевые аминокислоты составляют нич­

тожную долю огромной полипептидной цепи беЛI\а.

2. Пригидролизе белков идет посгепеmюевысвобождениеNH2 _и СООН-групп

встрогомсоотношении 1: 1, т. е.происходитраспадпеmидных-СО-NН-связей. 3. При взаимодействии биурета H2 N-CO-NH-CO-NH2 с растворами

щелочи и медного купороса развивается сине-фиолетовое окрашивание (реак­ ция на наличие -СО-NН-связей); все белки дают яркую биуретовую реак­

цИЮ, Т. е. в их молекулах действительно есть большое число пептидных связей. 4. Полипептидная природа ряда белков доказана химическим синтезом.

5. При рентгеносгруктурном анализе строения белков удается наблюдать

непрерьmную полипептидную цепь с характерныIM для .исследуемого белка

расположением в ней аминокислотных остатков.

6. Методы, используемые для определения чередования аминокислотных осгаТков в белках (см. ниже), однозначно свидетельсгвуют о последователь­ ном (в ряде случаев-выборочном, селективном) расщеплении пептидных связей в составе именно полипептидных цепей.

Характерной особенностью сгроения полипептидной цепи является то, что

атомы С и N в ее хребте, составленном из монотонно повторяющих­ ся-СО-СН-NН-фрагментов, располагаются приблизительно в одной плос-

I

косги, В то время как атомы и радикалы >СНR-группировок направленыI

к этой плоскости под углом 109028'. При этом в соседних аминоIшслотныIx

остатках расположение атомов Н и радикалов противоположно. Сказанное

яClIо из рассмотрения рис. 23, А и сгруктуры фрагмента полипеmидной цепи молекулы инсулина (см. с. 54).

Другая особенность строения полипептидной цепи заключается в особом

характере -СО-NН-связи. Расстояние между атомами С и N в пептидной связи 0,1325 нм, т. е. меньше нормального расстояния между a.-углеродныIM

атомом и атомом N той же цепи, равного 0,146 нм. Вместе с тем оно превышает расстояние между атомами С и N, соединенными двойной связью

(0,127 нм). Таким образом, связь С и N в -СО-NН-группировке может

рассматриваться как промежуточная между простой и двойной вследствие

сопряжения 1t-электронов карбонильной группы со свободными электронами

атома азота. Это определенным образом сказывается на свойствах полипеп­

тидов и белков: по месту пептидных связей легко осуществляется таутомерная

перегруппировка, прйводящая к образованию енольной формы пептидной

связи, отличающейся повышенной реакционной способностью:

H2N-СН-СО-NН-СН-СООН+::tН2N-СИ-С= N-CН-COOH
I	I	I	I	I
R'	Rn	R'	ОН·	R"

Третья своеобразная черта строения пептидной связи состоит в том, что все

"&ходящие в ее состав атомы располагаются в одной плоскости (рис. 23, В):

такая конфшурация называется планарной (плоской) и поддерживается дело­ t<ализациеЙ электронной плотности двойной связи карбонильной группы на

Связь между углеродом и азотом (рис. 23, Б).

Наконец, четвертое свойство полипептидной цепи заключается в том, что

ее остов, построенный ·из -NН-СН-СО-фрагментов, окружен разнообраэ-

I

нымя по своей химической природе боковыми цепями, что можно видеть при

рассмотрении структуры фрагмента молеJ<УЛЫ инсулина (см. с. 5$.

Боковые цепи функционально многолики. Они представлены (см. табл. 4

и рис. 18) жирными (ала, вал, лей, ил,?), ароматическими (фен) и гетероцикличе­ скими (про, три, гuc) радикалами. Многие из них несут свободные аминные (лиз, аре), карбоксильные (асn иглу), mДРоксильные и фенолъные (сер, тре, тир), тиольные (цис), амидные (асн, глн) и другие функциональные группы. Взаимодействуя с окружающими молекулами растворителя (вода), свободные

NH2 _ и СООН-группы ионизируются, образуя катионные и анионные центры

молекулы белка. В зависимости от их соотношения белковая молекула полу­

чает суммарный положительный или отрицательный заряд, а также характе­ ризуется тем или иным значением рН среды при достижении изоэлектрической

точки белка. Число и соотношение катионных, анионных и иных групп в неко­

торых белках приведены в табл. 7.

Таблица 7

Распределение грyшr в белках (чвсло групп В OДRoli молекуле)

			..	..
	O~		g	а	..		~	I",	~
	....			I
	~~	I							i
БелОК	~8		I~		~	...~	§	...
	g;~	~~		~	~.	е-	..,	~
	~!;	g		..	i;!~	с	"3		..
				:3		..	.88	~	..
				..			1i...		8.
	8~	~i	li	ё	~~	~	:.:1:-	f!i	'"
									t::
Миоглобин лошади, М=17000	]43	48	]6	2	13	20	29	О	]5
Пепсин, М=35000	34]	136	2]	]8	72	3	71	4	26
Альбумин яичный, М =46000	387	14]	24	9	52	35	84	5	37
Гемоглобин лошади, М=68000	541	209	63	11	59	52	89	3	55

Резкое преобладание в молекуле пепсина карбоксильных групп над амин­

ными требует высокой концентрации водородных ионов для перевода его

в изоэлектрическое состояние, в то время как почти равное число тех или

дрynix в молекуле миоглобина сопровождается изоэлектрической точкой,

близкой к рН нейтральной среды (см. табл. 3).

Строение радикалов оказывает большое влияние на многие другие свойст­

ва белков и особенно на пространственную конфигурацию полипептидной цепи: образующиеся солевые, эфирные, дисульфидные и другие мостики за­

крепляют относительное расположение участков цепи при формировании

третичной структуры белка (см. ниже). Радикалы также в основном определя­ ют круг химических реакций, свойственных белковым телам, и оказьmают

наряду с другими факторами существенное влияние на функциональную ак­

тивность белков.

Долгое время представления о структуре белковой молекулы ограничива­

лись признанием полипептидной цепи как ее основы без какой-либо детализа­

ции закономерностей чередования аминокислотных остатков или конфигура­

ции цепи. Лишь разработка новых методов определения последовательности

расположения остатков аминокислот в полипептИдной цепи и усовершенство­

вание рентгеноструктурного анализа белковых кристаллов позволили продви­

нуться вперед в ПОl!имании как первой (закономерности чередования амино­

кислот), так и второй (закономерности в конфигурации полипептидной цепи)

проблем.

В настоящ~е время в достаточной мере разработан вопрос о первичной,

вторичной, третичной и четвертичной структурах белковой молекулы. Пред­

ставление О четырех уровнях структуры белковой молекулы впервые выдвинуто

52

г

пn_ (nnанарные) ПetIТlWlЫе CD8, сж&дво IIp'ЩВЮЩВeCII

по а·yrперодному атому

Рис. 23. Стандартные значения межатомных расстояний (В нанометрах) и ва­

лентных углов В полипептидной цепи (А) и делокализация ~лектронной плот­

ности по пептидному звену (Б), приводящая к стабилизации его плоской

конфигурации (В и I)

53

фptШUЮII' """'.....-.....ljI!U< _	Ш<t1N"'" (1 - II-Q """'''''''''<.WIIIIНW
",, __

	NНz	НС-СН
	I	'1	\\
	Н-С- щ- С		'си
I . =_(1)	I	\,
		СН=СН
	со
	I
Н С	NН
	t
З

)СН-С-Н

НаС Jю

0CТmI8

- (2)

I

		NН
Ocn_		I	#10
		н-с-щ-с
8Cl8p1n8(3)
		I	'NНz
		со
		I
О"		NН
		I
~	с-щ-щ-с -Н		ocmaк
		J:o
			.~(4)
		I
		NН
		I
		Н-С-Щ-С:=СН,
		I	I	NН
		со	N=CН/
		I
нзс,		NН
		,
	CH-СНz-С-И
не./'		I
	3	со
		I
		NН
		I
Ост.....		н- С- йlz- s- ..... .
. - (7)		I

со

I

NН

I

н-с-н

I

со

I

NН

"

~H-C-CIЦ)H

_ (9)	I
	со

I

•

•

•

•

Линдерстром-Лангом, исходя из методических соображений. Естественно, что

все перечисленные уровни структуры сосуществуют в белковой молекуле и их уникальное сочетание в каждом конкретном случае определяет общее строение белковой частицы.

Первичнаи структура беЛХ8. Под первичной структурой белка понимают

последовательность в расположении а~окислотных остатков в одной или

нескольких полипептидных цепях, составляющих молекулу белка. Зная пер­

вичную структуру белка, можно написать его полную химическую формулу.

54

Схема 1. Последовательность операций при установлении

первичной структуры белка

Белок

Раскрытие дисульфидных

мостиков оки~леиием б~лка

		1
			надмуравьинои кислотои
		Денатурированный белок
			селективный гидролиз в присутствии
			ферментов или избирательная деструкцИJI
			при помощи химичесIOЦ методов
		Смесь пеlnтидоВ
			Фракционирование методом
			высоковольтного электрофореза
				Кислые
Основные		Нейтральные
пептиды		пептиды		пептиды
			Субфраl[ЦИОНИРОВ8ние методами
			электрОфор.за и хроматографии
		Индивидуальные пептиды
			0пределеииепоследовательности
			аминокислотных остатков
			18 каждом пеnтиде

Первичн8Я tтpyJtTypa двух полных наборов

индивидуальных пептидов

Воссоздание первичиой

структуры белка

1

Первичная ctpynypa белка

Учитывая, что в составе белковой молекулы содержится как минимум несколЬ:­

ко десятков аминокислотных остатков, определение местоположения каждого

из них составляет вееьма сложную задачу. Ее решение может быть достигнуто

в результате осушествления ряда операций, приведенных на схеме 1.

Раскрыте дисульфидных связей в молекуле белка (схема 1) необходимо,

е одной стороны, для обеспечения последующего этапа фрагментирования полипептидной цепи белка и, с другой-для превращения всех остатков цис

. в белке в остатки цистеиновой ICЙслоты, не разрушающейся при дальнейшем

анализе:

в цепь-NН-СН-СО-в цепь		в цепь-NН-СН-СО-в цепь
I	о	I
СН2		СН2
I	1I	I
	ИСООИ; И2О2
S	(NИ4)2МО04	SОз"
~
		SОзН
I
		I
СН2
		СН2
I
		I
В цепь-NН-СН-СО-в цепь
		в цеnь-NН-СН-СО-в цепь

55

Селективный гидролиз денатурированного белка ведут протеолитическими ферментами, чаще всего либо трипсином (по остаткам арг и лиз), либо

химотрипсином (по остаткам три, фен и тир):

H(NH-СН-СО)х-NН-СН-СО-(NН-СН-СО)у-NН-СН-СО-(NН-СН-СО) -он
I	I		I		. I		I	Z
R'	(Сн})		!r'		(сн)		R'"
	I	4			I	}]
	NH2				NH-С-NНz
						NH
						"
	~					;>	+ H(NH-CH-CO).OH
H(NH-t;Н-СО)х-NН-СН-С::			+ H(NH-СН-СО)rNН-СН-С...
I	I -	"он	I		I	'он	I
R'	<1Н2)4		R"		(~H}»)		R'·
	NH2				NH-C-NH}			,
						Ан

Можно деструктировать белок и химическими агентами, например, бром­

цианом-по остаткам мет, 2,4-динитрофторбензолом-по остаткам цис,

N-бромсукцинимидом-по остаткам тир или три и т. п.:

I

H(NH-~Н-СО)ХNН-IН-СО-(NН-~Н-СО).гон

~	k'
	НгСНгS-СН)
	9О%-муравьинц кислот&,
	I:ОМН4ТН&II температура
	"'-НВr+СН)SСN

H(NH-~Н-СО)хNН1Н-С~ + H(NH-~Н-СО).гОН

R'

/0

R-

СНГСН2

В результате получают два-три различных набора пептидов изучаемого

белка, что обеспечивает воссоздание его первичной структуры на заверша­

ющем этапе работы.

Фракционирование пептидов является многоступенчатым, длителJ,НЫМ, трудоемким, но необходимым элементом схемы определения первичной

структуры белка. Для этой цели используют преимушественно высоковольт­

ный (до 1О000 В) электрофорез на бумаге, особенно на заключительном этапе

фракционирования, и хроматографию различных видов, в том числе ионооб­

менную и распределительную.

Определение последовательности аминокислотных остатков в индивидуаль­ ных пептидах-нтiболее ответственная процедура при установлении первичной структуры белков. В настоящее время эту работу ведут преимущественно либо

фенилизотиоцианатным методом Эдмана, ли~о масс-спектрометрическим.

фенилизотиоциаиатный метод Эдмана (1950) реализуется в специально со­

зданном для этой цели приборе, получийшем название секвенатор (от ашл. sеqиеnсе-последовательность). Принципиальная схема устройства твердо­

фазного секвенатора и принцип его работы показаны на рис. 24. В современ­

ных моделях секвенатора удается определить чередование аминокислотных

остатков не только в коротких пептидах, но и непосредственно в полипептид­

ных цепях белка, проходя до 70 аминокислотных звеньев в его молекуле.

56.

·-				r-"J		Nz
-1	"""1	r-"I	"""1				-~
I	I	I	I	I
1:: _:?		---~	-	---	-
	-.:.:,,~		----
M~тaHOJ\	дИXJJорэтан	Буфер	ФеННJI-	Трнфтор-
			ИЗОТИО-	уксусная
			цианат	КИCJl0Т8
							Колонки
Р	Р	Р	Р	Р			!	1
у....	'у'	'у'	'у	~
Р-Поыпа						Сброс	КoJIJJ~Krop	сброс
V - П~~ючатсль
						ре•• -	фракций	~­
						ТИВОВ		'ПIIIOI

Рис. 24. Схема устройства секвенатора (пояснения в тексте)

~eTOД Эдмана СВОДИТСЯ к обработке фенилизотиоцианатом белка или

пеmида (рис. 25), присоединенного через С-концевую аминокислоту к инерт­

ному носителю (полистиролу или пористому стеклу) в колонке секвенато-

Q+

i

С

11

ФeiaIлиoo'nш.

-S

~:o

R-~H

NH2

ЩС:llOЧllOО рн	HSHHOH	е
	I 11 I I U I---.J	Инертный
<--'6!		-
---	~ N-C-N-C-C-N-, П~птид

Фе....1IIOКapI!8~

jТрIlФТОРУ,",УСВ"

...c:nora

(ОТЩСUllOllllе)

o-rd:

ФсвМ11IОПlДIllТОИН

Укорочениwil neD1IIД

Рис. 25. Химические реакции, протекающие при секвенировании пептидов и белков (поясне­

ния в тексте)

57

Рис. 26. ПринципиалънаJl схема устройства масс-спектрометра:

I-инжекторное устройство ДЛ. ввода образца; 2 - ионизационная камера; 3 в .5-система фильтров; 4-электромагнит; б-детектор; 7-привоД само· писца; В-лента самописца

ра (реакция сочетания). После промыкии колонки растворителями (метанол, дихлорэтан) образовавшийся фенилтиокарбамилпептид подвергают воз­

действию безводной трифторуксусной кислоты, в результате чего высво­

бождается аниmпютиазолинон и в его составе N-концевая аминокислота

(реакция отщепления), а укороченный на один аминокислотный остаток

пептид или белок остается связанным с носителем. Анилинотиазолинон поступает в коллектор фракций и, далее, после превращения в водной среде в фенилтиоmдантоин (реакция конверсии)-на хроматографическое определение отщепившейся N-концевой аминокислоты. Будучи промыт растворителями, секвенатор готов к следующему циклу работы в авто-

матическом режиме.

.

Масс-спектрометрический метод определения первичной структуры пепти­

дов, приложимый пока лишь к сравнительно коротким, примерно, 1О-членным

пептидам, состоит в фрагментации аминокислотного типа эфиров ацилпеп­

тидов с последующим разделением полученных при этом положительно заря­

женных фрагментов. Фрагментацию осуществляют воздействием электронно­

го удара, а разделение фрагментов-в масс-спектрометре (рис. 26). В резуль­

тате получают масс-спектр фрагментов пептида (рис. 27), расшифровывая

который, делают заключение о первичной структуре пептида. Хотя расшиф-

-.._----...-...		..		....		. ~ ..
лей	ала		ала		ала	ОМе
268		339

Рис. 27. Масс-спектр метилового эфира N-деканоиллейцилаланил­

аланилаланина

На рисунке приведены массовые числа, соответствуюшие аминокислотному типу фрагмен· тации пептида; I:В ЕВО ИI названи,. исследованного соединенив, аминоrp)'Jша N-концевой

аминОКИСдоты-леЙЦlПlа ацилирована и несет деканоильную

группировку, а карбоксильная группа С-концевой аминокислоты- аланина, этерифнциро­

вана И несет метильную rpyrlJlY; именно такое производное пешида фрагмеНТllруетси rlO 8.МIIНOЮICЛОТНОМУ типу, Т. е. преимущественно [IO пеПТИДRJaIМ СВИЗJIМ с образо.кинем фраrментов, характеризуюши~си соответствующими маССОВЫМН числами

58

ровка масс-спектра фрагментов пептида весьма сложна, однако, исходя из

знания ~нокислотного состава пептида и используя электронно-вычисли­

тельные машины для просчета различных вариантов сочетания аминокислот­

ных остатков в пептиде, находят тот вариант структуры, расчетные данные

которого совпадают с экспериментальными.

Заключительный этап работы при выяснении порядка следования амино­

кислотных остатков в белковой молекуле-воссоздание первичной структуры

белка на основании данных о последовательности их расположения в пеп­

тидах, полученных при селективном гидролизе. Так как избирательное

расщепленИе пептидных связей при исследовании первичной структуры

белков ведут не менее чем двумя агентами, обеспечивающими разрыв

пептидных связей в разных точках полипептидной цепи, то первичные структуры того и другого набора полученных пептидов неизбежно перекрыва­ ются. Это открьiвает возможность воссоздания первичной структуры белка

(рис. 28). Если при посредстве секвенатора удалось выяснить чередование аминокислотных звеньев в фрагментах белковой молекулыI значительного

размера, то это существенно упрощает процесс воссоздания ее первичной

структуры.

Другие методы определения последовательности расположения аминокис­

лотных остатков в белковой молекуле основаны главным образом на ис­ пользовании ферментов, способных ускорять реакции последовательного от­

щепления аминокислот либо с N-, либо с С-конца полипептидной цепи. Однако

они не получили еще столь широкого распространения и аппаратурного

оформления, как рассмотренные выше. В последние годы ведущее место

в выяснении первичной структуры белков занял метод, который условно

можно назвать генетическим: он основан на выведении последовательности

аминок.ислот в белковой молекуле исходя из структуры гена, кодирующего

биосинтез этого белка. Именно так была расшифрована структура самых

длинных полипептидных цепей-фактора VIII свертывания крови (2332 ами­

нокислотных остатка) и субъединицы тиреоглобулина (2750 аминокислотных остатков). Нельзя не упомянуть также только что появившиеся сообщения об

определении первичной структуры белков методом лазерной фотодиссоциации;

учитывая его высочайшую чувствительность (для анализа достаточно 5 нмоль

белка при молекулярной массе 50 кДа), он, по-видимому, имеет большое будущее.

Первым белком, первичную структуру которого удалось расшифровать

благодаря работам Ф. Caнrepa и сотр. (1951-1953), был инсулин быка (за это в 1958 г. Ф. Caнrepy была ПРИСуЖДена Нобелевская премия). Инсулин-бе­

лок-гормон, регулирующий углеводный обмен. Он синтезируется в поджелу­

дочной железе в виде предшественника, структура которого показана на рис. 29. При нарушении биосинтеза инсулина у человека развивается сахарное

мочеизнурение, или диабет.

Субъединица инсулина (М =6000) состоит из 51 аминокислотного остатка,

собранных в две полипептидные цепи (А и Б), которые соединены двумя дисульфидными мостиками.

Согласно справочнику л. Крофта на август 1975 г. была выяснена пер­

вичная структура 932 соединений пептидной природы, из числа которых не менее 800-белки. Учитывая, что в последующее время расшифровывали

от нескольких десятков до нескольких сотен первичнь~ структур ежегодно

(в 1976 г.-76; в 1977 г.-380), список белков с полностью известным чере­

дованием аминокислот в их молекулах к январю 1985 г. достиг 2657. В ряде

случаев определена первичная структура одного и того же белка, но вьще­

ленного иJ разных организмов. Так, первичная стРуктура инсулина, миогло-

59