ХОД РАБОТЫ

*Задание I Определить уровень глюкозы в сыворотке крови ортотолуидиновым методом

1.В пробирке смешивают 0,9мл 3% ТХУ и 0,1мл сыворотки крови.

2.Смесь встряхивают и центрифугируют при 8000g в течение 5мин.

3.Отбирают 0,5мл супернатанта и к нему добавляют 4,5мл о-толуидинового реактива.

4.Пробирку со смесью помещают в кипящую водяную баню. Через 8 мин инкубации содержимое пробирки охлаждают.

5.Оптическую плотность раствора регистрируют на спектрофотометре SOLAR PV 1251 при 590 нм против холостой пробы (дистиллированная вода).

6.Концентрацию глюкозы (в моль/л) в сыворотке крови определяют по ка-

либровочному графику.

Построение калибровочного графика осуществляется посредством введения в данную методику вместо сыворотки крови - 0,1мл стандартных растворов глюкозы с концентрациями 5,55 ммоль/л и 16,67 ммоль/л.

*Задание II Определить уровень глюкозы в сыворотке крови глюкозооксидазным методом

1.В соответствии с табл. 1 готовят опытную и холостую пробы. Для этого к 0,05 мл сыворотки крови или воды, соответственно, добавляют 0,5 мл 3% раствора ТХУ.

				Таблица 1
				Холостая проба
	Реактивы	Опытная проба
		(мл)		(мл)
	Сыворотка крови	0,05		0,05
	Дистиллированная вода
	ТХУ (3% раствор)	0,5		0,5

2.Смесь встряхивают и центрифугируют при 8000 g в течение 5мин.

3.Далее с пробами работают в соответствии с табл. 2. К 0,2 мл супернатанта добавляют 2 мл рабочего реагента.

69